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      一起哺乳仔豬肺部奇異變形桿菌的初步分離鑒定

      2020-05-23 11:19:32柯海華高義平
      江西畜牧獸醫(yī)雜志 2020年2期
      關(guān)鍵詞:革蘭氏無菌菌落

      柯海華,張 軼,高義平

      (彭澤縣畜牧獸醫(yī)局,江西九江,332700)

      變形桿菌是一種人和動物的寄生菌和病原菌。廣泛分布在自然界中,如土壤、水、垃圾、腐敗有機(jī)物及人或動物的腸道內(nèi)。根據(jù)生化反應(yīng)的不同,可分為普通、奇異、潘尼和產(chǎn)粘液變形桿菌四類。變形桿菌在食物中能產(chǎn)生腸毒素,并且可以使蛋白質(zhì)中的組氨酸脫羧而形成組胺,從而引起胃腸炎或過敏性反應(yīng)。大量變形桿菌在人體內(nèi)生長繁殖也是構(gòu)成食物中毒的主要因素。變形桿菌一般不致病。夏、秋季節(jié)溫度高,變形桿菌在被污染的食物中大量繁殖。食用被污染的食物后2~30h出現(xiàn)上腹部刀絞樣痛和急性腹瀉,伴有惡心、嘔吐、頭痛、發(fā)熱。病程較短,一般1~3d可恢復(fù),很少有死亡。筆者從一例患病仔豬肺部分離到一株具有遷徙生長現(xiàn)象的菌株,經(jīng)鑒定初步判斷為奇異變形桿菌,現(xiàn)匯報如下。

      1 材料與方法

      1.1 實驗材料

      1.1.1 病料。彭澤縣某豬場患病哺乳仔豬,剖檢無菌采集肺臟。

      1.1.2 常用設(shè)備。生化培養(yǎng)箱、無菌操作臺、顯微鏡、酒精燈、接種(棒)環(huán)、培養(yǎng)皿、載玻片等。

      1.1.3試劑。革蘭氏染色液:草酸銨結(jié)晶紫溶液、碘液、95%酒精溶液、沙黃溶液。微量生化發(fā)酵管:硫化氫溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸櫞酸鈉、木糖、吲哚、鳥氨酸脫羧酶等。

      1.2 實驗方法

      1.2.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng)。用接種環(huán)從無菌采集的病料肺臟中鉤菌,劃線接種于血平板,置37℃培養(yǎng)24~48h,觀察并記錄結(jié)果。

      1.2.2 細(xì)菌染色鏡檢。用接種環(huán)鉤取可疑菌落,涂片,革蘭氏染色,油鏡鏡檢,觀察并記錄結(jié)果。

      1.2.3 細(xì)菌的遷徙實驗。取兩套普通固體瓊脂培養(yǎng)基,在其表面等距滴幾滴無菌蒸餾水,再用無菌接種環(huán)將細(xì)菌接種到清水中,置37℃的恒溫箱中培養(yǎng)18~24h,觀察并記錄菌落的形態(tài)。

      1.2.4 細(xì)菌的生化鑒定。將分離純化的可疑變異桿菌菌株,培養(yǎng)16~18h新鮮菌落,用接種環(huán)鉤取單個菌株,分別接種到含有硫化氫溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸櫞酸鈉、木糖、吲哚、鳥氨酸脫羧酶的微量生化試驗發(fā)酵管中,置37℃的恒溫箱中培養(yǎng)18~24h,觀察并記錄結(jié)果。

      2 試驗結(jié)果

      2.1 細(xì)菌分離結(jié)果

      普通培養(yǎng)基中長出淡黃色的菌落,且菌落呈擴(kuò)散狀態(tài)生長。沒有劃線的地方也有菌苔形成,同時發(fā)生了溶血現(xiàn)象,打開平皿時有臭味。

      2.2 可疑菌株鏡檢結(jié)果

      可疑菌落經(jīng)涂片染色鏡檢,均為兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌,多散在,無芽胞和莢膜(見圖1)。

      圖1 可疑菌落革蘭氏染色(10×100倍顯微鏡觀察)

      2.3 可疑菌株遷徙生長實驗結(jié)果

      在固體普通培養(yǎng)基上呈擴(kuò)張性生長,布滿整個平板表面,形成以菌種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的灰白色波紋狀菌苔,呈典型的遷徙生長現(xiàn)象(見圖 2)。

      圖2 可疑菌株的遷徙生長現(xiàn)象

      2.4 分離細(xì)菌的生長鑒定結(jié)果(見表1)

      表1 生化反應(yīng)管實驗結(jié)果

      3 小結(jié)與討論

      本菌從實驗的結(jié)果推測是奇異變形桿菌,屬于腸桿菌科的變形桿菌屬,為革蘭氏陰性、無芽胞、無莢膜、周身鞭毛、運動活潑、兩端鈍圓的小桿菌。兼性厭氧。在自然界中存在極廣,水、泥土、陰溝及各種腐敗的動、植物中最多,也存在于健康人和動物的腸道中。它們是條件致病菌,在特殊情況下對人致病。如食物中毒、尿路感染、夏季腹瀉或其他混合感染。

      由變形桿菌引起的食物中毒一般不必服抗生素,僅需補液、解癥等對癥處理,重癥患者可用氯霉素、諾氟沙星等抗菌藥物。預(yù)防的重點在于加強食品管理,注意飲食和環(huán)境的衛(wèi)生。糞便培養(yǎng)可檢得變形桿菌。血清凝集抗體有助于診斷。本病需與霍亂及副霍亂、急性細(xì)菌性痢疾、病毒性胃腸炎、非細(xì)菌性食物中毒等疾病相鑒別。

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