鄒冬梅 林向東 林君君

【摘 要】 目的：檢測2015年～2018年建卡孕婦ABO血型及Rh血型，做好母嬰血型不合孕婦的保健指導工作。方法：微柱凝膠法檢測血型。結果：2567例孕婦：A+型765例，A-型1例;B+型715例，B.型4例;O+型824例，O-型4例;AB+型252例，AB-型2例;A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。孕婦A型、B型、O型三種血型的分布率明顯高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）;孕婦A型、B型、O型三種血型分布率無顯著差異（χ2=3.85，P>0.05）。孕婦Rh陽性血型檢出率明顯高于Rh陰性檢出率（χ2=6.63，P<0.01）。結論：根據血型檢測結果進行分析，及時地對孕婦進行血型知識的普及、健康教育和個體化指導，能夠有效減少新生兒溶血癥的發(fā)生率，保證母嬰安全。

【關鍵詞】

血型;新生兒溶血?。℉DN）;血清IgG抗體;微柱凝膠法

為了進一步做好母嬰血型不合的孕婦保健指導工作，做到早期預測新生兒溶血?。℉DN）發(fā)生的可能性，對2015～2018年2567例建卡孕婦進行了ABO血型及Rh血型檢查。

1 資料與方法

1.1 一般資料

使用EDTA抗凝管采集2015年～2018年2567例早孕建卡的孕婦靜脈血2.0mL，年齡21～45歲。標本要求無血液稀釋、細菌污染、離心后無溶血及明顯乳糜。

1.2 儀器與試劑

卡式血型離心機（Dianafuge）：由北京佰利申科貿有限公司提供。

ABO.Rh血型檢測卡：由Diagnostic Grifols，S.A.提供，有效期內使用。

1.3 方法

微柱凝膠法[1]。微柱凝膠法結果敏感、準確、重復性好，肉眼觀察清晰明確，易于客觀判定，可避免因經驗不足對結果判定的影響。可拍照保留試驗結果圖像，較試管法保存時間更長。適用于大量標本檢測，可單份標本多項指標一次離心檢測，配套儀器將整個過程自動化標準化。微柱凝膠技術用于孕婦產前檢測，操作方便簡單，可為新生兒溶血疾病的提早預防提供更多理論依據[2.4]。

1.3.1 檢驗原理 紅細胞抗原與相應抗體在凝膠介質中發(fā)生肉眼可見的凝集。將特定配比的葡萄糖凝膠顆粒分散裝到特制的凝膠微柱中，制備成微柱凝膠卡。凝膠柱的上層為“反應池”（抗體抗原反應區(qū)），柱的下層為“分離池”。其原理是利用凝膠顆粒與凝膠顆粒之間的間隙形成的分子篩作用，在微柱凝膠介質中紅細胞與相應抗體結合，經過低速離心，凝集成塊的紅細胞由于體積大被凝膠阻滯不能通過凝膠層，留在凝膠介質的上層或中間，即陽性反應;未凝集游離紅細胞由于體積小而通過凝膠之間的間隙沉積在微柱凝膠檢測管底部（管底尖部），形成細胞扣，即陰性反應。

1.3.2 操作 1）配制紅細胞懸液：一次性試管中加入0.5mL 0.9%的氯化鈉溶液;吸取全血25μL加入至有0.5mL 0.9%的氯化鈉溶液的一次性試管中，配制為2%～3%的RBC混懸液，混勻后待用。2）標記、加紅細胞懸液：用標記筆在微柱血型卡上標記標本號;按照試劑卡說明書要求，用微量加樣器于標簽為抗A、抗B的微柱反應孔中央加定量待檢的紅細胞懸液（正定型），在標簽為A、B紅細胞的微柱反應孔中央分別加定量的A1、B型紅細胞懸液試劑（反定型），在質控管中加定量待檢的紅細胞懸液。3）加血漿、離心：按照試劑卡說明書要求，在標簽為A、B紅細胞的微柱反應孔中央加一定量的待檢的血漿（反定型），按照試劑卡說明書要求在專用離心機上水平離心。4）觀察結果：取出凝膠微柱卡，用肉眼觀察。陽性：對照管的細胞沉淀在管底，檢測管的凝集塊在膠上或膠中;陰性：質控管和檢測管的紅細胞均沉淀在管底。5）判讀結果見表1。準確報告后登記完善。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數據處理及統(tǒng)計學分析，計數資料以%表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2015年～2018年2567例孕婦ABO血型分布情況見表2。

2015年～2018年2567例孕婦Rh血型分布情況見表3。

3 討論

奧地利維也納大學的Landsteiner在1900年發(fā)現了人類第一個血型系統(tǒng)，即ABO血型系統(tǒng)。1924年Bernstein提出，ABO血型遺傳的基因座上，有A、B、O三個等位基因，是常染色體顯性遺傳，每個子代均可從親代各得到一個單倍體，子代從父母雙方各獲得一種基因，可有六種基因組合，有A型、B型、O型及AB型四種表現型[5]。1940年，Landsteiner和Wiener用恒河猴的紅細胞免疫豚鼠和家兔，發(fā)現恒河猴和多數人體內的紅細胞上存在一種同樣的Rh血型抗原物質，就以恒河猴（Rhesus monkeys）外文名稱的頭兩個字母Rh命名。Rh基因位于第1號染色體上由RHD和RHCE兩個緊密連鎖的基因構成。Rh血型共有五種抗原，即C、c、D、E、e，其中以D抗原的抗原性最強。由于D抗原最早被發(fā)現，故臨床上凡是紅細胞上D抗原陽性者稱為Rh陽性，紅細胞上無D抗原者稱為Rh陰性。這樣就使已發(fā)現的紅細胞A、B、O及AB四種主要血型的人，又都分別一分為二地被劃分為Rh陽性和Rh陰性兩種。

由表2可知，2015年～2018年2567例孕婦血型分布A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。經統(tǒng)計學處理，孕婦A型、B型、O型三種血型的分布率均明顯高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）。孕婦A型、B型、O型三種血型分布率無差異（χ2=3.85，P>0.05）。由表3可知，2015年～2018年2567例孕婦Rh血型檢查結果，Rh陽性血型檢出率明顯高于Rh陰性血型檢出率，經統(tǒng)計學處理，χ2=6.63，P<0.01。11例Rh陰性血型：1例A-、4例B-、4例O-和2例AB-。

新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn，HDN）一般是指母嬰血型不合而引起胎兒免疫性溶血性貧血。其中ABO和Rh血型系統(tǒng)引起的新生兒溶血病最常見[6]。O型血孕婦懷有的A型或B型胎兒，其母親體內的抗-A、抗-B抗體為IgG類，能夠通過胎盤屏障引起胎兒溶血，會造成新生兒溶血性黃疸、貧血、水腫、膽紅素腦病、肝脾腫大，嚴重危害患兒健康及智力[7.8]，直接威脅新生兒安全[9]。

O型母親血清中IgG抗A（B）效價較A型血清中的抗B和B型血清中的抗A為高，辛磊等[10]認為：O型血母親抗A（B）抗體效價與ABO新生兒溶血檢出率呈正相關，一定程度上可以對新生兒溶血率進行預測。符小玲等[11]認為：O型血孕婦HDN的發(fā)生率較高，與丈夫ABO血型和新生兒性別均無關，與孕婦產前血清IgG抗.A（B）效價有關，隨抗體效價增高而升高。O型血孕婦抗體效價與新生兒溶血發(fā)病率之間存在明顯聯系[12]，因此，密切監(jiān)測O型血孕婦抗體效價，可幫助預測新生兒溶血病發(fā)生率，并選擇有效預防和治療措施，降低新生兒溶血風險[13]。又因為胎兒紅細胞上的A位點（抗原決定簇）較B位點為多，故發(fā)生ABO溶血病以A型嬰兒比B型嬰兒為多[14]。但是馮素芳等[15]認為：ABO.HDN中，A型HDN的發(fā)病率與B型HDN的發(fā)病率差異無顯著性;紅細胞抗體釋放試驗最敏感;IgG血型抗體效價與HDN的發(fā)病率呈正相關，隨著IgG血型抗體效價的升高，HDN的發(fā)病率也隨著升高。因AB血型物質廣泛存在于自然界某些植物、寄生蟲及細菌中，O型母親通常在第一胎前即可受到自然界具有A、B血型物質的刺激而產生抗A、抗B抗體（IgG），故40%～50% ABO溶血病發(fā)生在第一胎。夫婦血型不合時，監(jiān)測O型血孕母血清中IgG抗體效價，可預測新生兒溶血病發(fā)生的可能性，但不能判定新生兒溶血癥的發(fā)生時間及嚴重程度[16.17]。

本文資料，2015年～2018年824例O+型血孕婦及其丈夫接受了詳細的ABO血型知識普及和健康指導。O型孕婦ABO血型特殊抗體檢測，抗體滴度越高，其發(fā)生新生兒溶血反應概率越大，且O型孕婦開展ABO血型特殊抗體檢測對新生兒發(fā)生溶血反應有較高預測價值[18]。王宣力等[19.21]認為：孕婦分娩前IgG抗.A（B）抗體滴度的升高可顯著增加新生兒溶血的發(fā)病率，對于夫妻ABO血型不合的孕婦應加強其IgG抗.A（B）抗體的檢測。ABO溶血病的發(fā)病率隨著孕婦血清抗體效價的增高而增加，O型孕婦產前抗體效價的檢測對預防新生兒溶血病、降低患病風險具有重要意義[22]。對產前保健孕婦開展ABO血型抗體效價檢測，并對探查到的異常情況開展及時有效的治療，可使母嬰血型不合導致的新生兒溶血癥的發(fā)生得以有效減少[23]。孕母O型血清中IgG抗（A）B抗體效價與ABO.HDN高度相關，動態(tài)監(jiān)測孕母O型血清中IgG抗（A）B抗體效價，對預防和治療新生兒溶血疾病具有非常重要的臨床價值[24]。當孕婦IgG抗體A（B）效價≥64，新生兒就有可能出現HDN[25];如果抗體滴度達到1∶512則高度懷疑胎兒溶血。但孕婦抗A或抗B滴度的高低并非都與胎兒溶血成正比，需要結合其他檢測方法綜合判斷。

Rh血型抗體主要是IgG，且多數是IgG亞類，其能夠通過胎盤，從而導致新生兒溶血病。其中引起新生兒溶血病的最主要和最常見的Rh血型抗體是抗D。通常發(fā)生于第二次或多次妊娠的孕婦，而且隨著妊娠次數的增加，發(fā)生新生兒溶血病的機會也隨之增多，Rh血型抗體引起的新生兒溶血病比ABO血型引起的溶血病要嚴重。本文11例Rh陰性孕婦及其丈夫在第一時間接受了有關Rh血型知識的健康教育和個體化指導。根據有關要求及孕婦本人的意愿轉診Rh陰性孕婦至上級婦產醫(yī)院并在妊娠16周時檢測Rh血型抗體作為基礎值，以后每2～4周檢測1次。定期監(jiān)測RhD陰性孕婦的血型不規(guī)則抗體，對抗體陽性且效價較高者進行必要的產前治療。加強對尚未生育過的Rh陰性年輕女性的血型知識宣教是預防HDN的重要措施[26]。Rh血型不合中，抗D抗體滴度自1∶2開始即有意義?？笵滴度達到1∶16時胎兒溶血情況加重。Rh母兒血型不合與ABO血型不合不同，抗體滴度與胎兒溶血程度成正比。因此對于IgG效價高的孕婦在產前進行效價的控制，對于降低新生兒溶血病的發(fā)病率具有重要的臨床意義[27]。文藝[28]認為：溶血疾病的診療時間與疾病的嚴重程度呈正相關性，就診時間越遲，疾病程度越嚴重。診斷方法也不能僅局限于單純的溶血疾病本身，應對其潛在或正伴有的并發(fā)癥進行聯合治療。而在治療方法中，應注意光療、補堿及給與丙種球蛋白等方法的綜合應用。對孕婦進行產前的中藥預防，可顯著降低新生兒溶血疾病的發(fā)生率。新生兒溶血者在以丙種球蛋白、間斷光療治療期間給予護理，患兒T.BIL水平明顯降低，黃疸癥狀改善良好，患兒恢復快[29]。劉巧英等[30]認為：通過應用抗D免疫球蛋白治療針對Rh血型不合孕婦來說，具有預防死產及孕婦死亡的價值;并且可以有力的減輕及減少新生兒溶血病的發(fā)生。

經隨訪：2015年～2018年建卡孕婦824例O+型血孕婦：血清中IgG抗A（B）效價≥64、分娩后的新生兒為A型或B型者及11例Rh陰性孕婦分別在不同的二級及以上醫(yī)院根據出生后癥狀對因對癥處理的均母子健康。

母胎血型不合溶血性疾病是一種與血型有關的同種免疫性疾病，主要影響胎兒，病變也可延續(xù)至早期新生兒。母胎血型不合時，進入母體血液循環(huán)的胎兒紅細胞可誘導母體的免疫系統(tǒng)產生抗體，抗體通過胎盤進入胎兒血液循環(huán)系統(tǒng)，結合、破壞胎兒紅細胞，導致胎兒和新生兒溶血性疾病。本研究中2015年～2018年先后接受了血型檢測和血型知識的普及、健康教育及個體化細心指導后的孕婦在分娩后無1例新生兒溶血性疾病發(fā)生死亡，說明基層婦幼保健衛(wèi)生機構做好一級預防工作非常重要，在妊娠期對母子血型不合孕婦進行指導干預，能夠有效減少新生兒溶血癥的發(fā)生率，保證母嬰安全。

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