屈信成 李文琪 蔣珍藕 韋貴元 胡琦敏*
1.廣西中醫(yī)藥研究院,廣西 南寧 530022;2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西 南寧 530022
瑤藥發(fā)痧藤為菊科植物毒根斑鳩菊VernoniacumingianaBenth.的干燥根。又名過山龍、驚鳳紅、虎三頭、大木菊、藤牛七、蔓斑鳩菊、細(xì)脈斑鳩菊等[1],在我國(guó)主要產(chǎn)于廣西、廣東、云南、福建、臺(tái)灣等地,常攀于木本植物或石頭上。其根具有祛風(fēng)解表,舒筋活絡(luò),截瘧之功效,常用于風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛,腰腿痛,跌打損傷,瘧疾,外用治眼結(jié)膜炎等[2-5]。原植物在中國(guó)植物志等文獻(xiàn)已有記載[6],但未見發(fā)痧藤在生藥學(xué)方面的研究報(bào)道。為了掌握發(fā)痧藤在性狀、顯微結(jié)構(gòu)及薄層色譜方面的特征,本文為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定及應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
1.1 材料 硅膠G薄層板(批號(hào):20121108,青島海洋化工廠),實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。8種批號(hào)的發(fā)痧藤于2018年5~11月分別采于廣西金秀縣、藤縣和蒙山縣,經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥教授鑒定為菊科斑鳩菊屬植物毒根斑鳩菊VernoniacumingianaBenth。8批樣品的詳細(xì)信息見下表1。
表1 發(fā)痧藤樣品信息一覽表
續(xù)表1 表1 發(fā)痧藤樣品信息一覽表
1.2 儀器 徠卡RM2245切片機(jī)(德國(guó)),AK-400A搖擺式粉碎機(jī)(浙江),Ni-U尼康高級(jí)生物顯微鏡及視頻成像裝置(日本)。
根據(jù)中國(guó)藥典(2015版)的方法對(duì)藥材性狀、顯微和薄層色譜進(jìn)行鑒定。顯微方面取藥材的根按石蠟切片法制作橫切面片,取以上藥材適量粉碎過五號(hào)篩后按粉末制片法制作粉末片。切片在顯微鏡下觀察和照相。
3.1 性狀鑒別 根呈不規(guī)則圓柱形,有的呈節(jié)狀膨大,表面灰白色或灰褐色,具縱溝紋,直徑0.5~3 cm。質(zhì)堅(jiān)硬,不易折斷,斷面皮部易與木部分離,皮部白色,厚約0.2~1.5 cm;木部灰白色,有細(xì)密的放射狀“菊花紋”。商品常切成斜片,厚約0.5 cm。氣微,味淡,略辛。
3.2 顯微鑒別
3.2.1 根橫切面 表皮細(xì)胞1列,方圓形,有的細(xì)胞木栓化或已脫落。皮層細(xì)胞10~20余列,類圓形或不規(guī)則形,細(xì)胞壁較薄;老莖有石細(xì)胞單個(gè)或數(shù)個(gè)一群沿切線方向散在分布,細(xì)胞壁厚,孔溝明顯。維管束外韌型,環(huán)列;韌皮部篩管群細(xì)胞類圓形;木質(zhì)部導(dǎo)管單個(gè)或幾個(gè)相連放射狀分布,徑約26~120 μm,木射線細(xì)胞3~8列,長(zhǎng)方形。本品薄壁細(xì)胞中有的有菊糖和淀粉粒。見圖1。
1.表皮;2.皮層;3.石細(xì)胞;4.韌皮部;5.導(dǎo)管;6.木質(zhì)部;7.木射線 圖1 發(fā)痧藤根橫切面顯微構(gòu)造圖
3.2.2 粉末 淡黃色。纖維成束或單個(gè)散在,淡黃色,壁厚,末端鈍圓或平截,直徑16~28 μm。石細(xì)胞散在或幾個(gè)相連,呈多角形、類方形或不規(guī)則形,細(xì)胞壁較厚,胞腔大小不一,孔溝明顯,長(zhǎng)徑36~81 μm,寬25~62 μm。淀粉粒單粒或復(fù)粒,圓形、半圓形或雞嘴形,臍點(diǎn)點(diǎn)狀或裂縫狀,直徑6~12 μm。菊糖不規(guī)則塊狀,有放射狀紋理,長(zhǎng)徑35~98 μm,寬31~46 μm。導(dǎo)管為具緣紋孔導(dǎo)管,直徑22~68 μm。見圖2。
圖2 發(fā)痧藤根粉末顯微圖
3.3 薄層鑒別 取樣品粉末(過三號(hào)篩)1 g,加甲醇40 mL,超聲處理60 min,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)蛹状? mL使溶解,作為供試品溶液。另取發(fā)痧藤對(duì)照藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液。按照《中國(guó)藥典》2015年版四部通則0502薄層色譜法試驗(yàn),吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10~15 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以石油醚-
乙酸乙酯(8∶2)為展開系統(tǒng),展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105 ℃加熱至斑點(diǎn)清晰。日光下檢視,供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上,有清晰且顏色相同的斑點(diǎn)。7批樣品按本法檢驗(yàn),均符合規(guī)定,且薄層色譜分離效果好,斑點(diǎn)圓整清晰,比移值適中,重現(xiàn)性好。見圖3。
1.FST-1(對(duì)照藥材);2.FST-2;3.FST-3;4.FST-4;5.FST-5;6.FST-6;7.FST-7;8.FST-8圖3 樣品薄層譜圖(日光下)
研究表明發(fā)痧藤在性狀、顯微及薄層色譜方面有明顯的特征,性狀方面根有的呈節(jié)狀膨大,斷面皮部易與木部分離,木部有細(xì)密的放射狀“菊花紋”。顯微特征方面老莖皮層有石細(xì)胞散在分布,薄壁細(xì)胞中有的有菊糖和淀粉粒。粉末方面石細(xì)胞較多;淀粉粒單?;驈?fù)粒;菊糖有放射狀紋理。薄層色譜方面發(fā)痧藤藥材供試品色譜與對(duì)照藥材色譜在相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。這些特征為發(fā)痧藤的鑒別及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供了一定的依據(jù)。