乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少的原因及處理

張修楠

【摘 要】目的：探討乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少原因以及糾正方法。方法：回顧性分析2018年3月-2019年4月收治的16例乙二胺四乙酸所致的血小板減少患者的臨床資料，采集靜脈血后給予抗凝劑乙二胺四乙酸二鉀（觀察組）與枸櫞酸鈉（對照組）處理，并實施血小板計數(shù)。結果：觀察組血小板計數(shù)明顯低于對照組（P<0.05），且對照組結果與手工計數(shù)結果差異不顯著（P>0.05）。結論：枸櫞酸鈉抗凝劑不會造成血小板聚集，當出現(xiàn)乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少時，可選擇其作為抗凝劑給予血小板計數(shù)。

【關鍵詞】乙二胺四乙酸;枸櫞酸鈉;假性血小板減少;原因;糾正

【中圖分類號】R558.2【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）13--01

血常規(guī)檢查是臨床上最為常見的檢查項目之一，采用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）作為抗凝劑，其可導致假性血小板減少，此現(xiàn)象稱為乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少癥（EDTA-PTCP），是由于抗凝劑EDTA誘導血小板中的特殊蛋白使血小板發(fā)生凝集，且在全自動血液分析儀上檢測時，血小板計數(shù)出現(xiàn)假性減少的現(xiàn)象，引起國內(nèi)外的高度關注。目前國內(nèi)外有與其相關的文獻報道和病例報道，EDTA抗凝劑可以誘導0.09-0.21%[1]的患者發(fā)生EDTA-PTCP的情況。由于這種假性血小板計數(shù)減低會導致臨床增加不必要的輔助檢查，甚至誤診、誤治，及醫(yī)療資源的浪費。如何發(fā)現(xiàn)并糾正其影響，對于保證檢測結果的準確性以及患者的身體健康具有重要的作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年3月-2019年4月收治的16例乙二胺四乙酸所致的血小板減少患者的臨床資料，其中男6例，女10例，年齡16-74歲，平均年齡（46.42±6.32）歲。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 邁瑞 BC-6800 五分類血細胞分析儀，所用溶血劑、稀釋液及清洗液均為邁瑞公司生產(chǎn)，全血質(zhì)量控制品由邁瑞公司提供，Olympus CX21 雙目顯微鏡，江蘇康健邁瑞公司乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）真空抗凝管，血小板草酸銨稀釋液。

1.2.2 檢測方法 ①儀器分析：嚴格遵守相關操作規(guī)范，利用全自動血液流水線分析儀分別對加入枸櫞酸鈉與EDTA-K2的血液標本進行血小板數(shù)量測定。②血小板手工計數(shù)：至少由兩名資深檢驗人員實施血小板顯微鏡計數(shù)，每例計數(shù)兩次，取平均值。另外將含有EDTA-K2與枸櫞酸鈉的抗凝血給予推片操作，將血涂片通過瑞氏染液染色后給予顯微鏡鏡檢。

1.3 統(tǒng)計學分析 將所有數(shù)據(jù)錄入SPSS 20.0軟件并分析，檢測值以均數(shù)±標準差（）表示，組間差異性比較采用配對t檢驗處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

觀察組血小板計數(shù)（54.4±14.6）109/L，明顯低于對照組（149.6±45.4）109/L，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;且對照組結果與手工計數(shù)結果（151.5±47.3）109/L，比較差異不顯著（P>0.05）。在顯微鏡下，觀察組血涂片存在大小各異以及數(shù)目不等的血小板聚集;對照組血小板則分布均勻。

3 討論

隨著科技的發(fā)展，全自動血細胞分析儀已廣泛應用于臨床實驗室大批量標本的全血細胞分析，國際血液標準化委員會（ICSH）認可首選EDTA作為全血細胞分析的抗凝劑[2]。然而，EDTA偶爾可引起血液中的血小板聚集，使血小板發(fā)生假性減少。EDTA-PTCP是由于EDTA在抗凝血中可誘導血小板中的特殊蛋白，使血小板發(fā)生聚集，因而在全自動血細胞計數(shù)儀上檢測時，血小板計數(shù)發(fā)生了假性減少的現(xiàn)象。

偶爾發(fā)生的EDTA-PTCP可能主要與以下方面有關：EDTA-K2會引起血小板活化，從而使其正常形態(tài)出現(xiàn)較大的變化，進而導致血小板膜表面的抗原的表位構象出現(xiàn)明顯變化，并與血液中部分自身抗體產(chǎn)生免疫反應而形成多種活性因子，最終引起血小板的聚集。若該類計數(shù)減少的情況未被及時發(fā)現(xiàn)，則會造成誤診誤治，不僅提高了患者心理以及經(jīng)濟壓力，另外還可能引發(fā)醫(yī)療事故，所以積極有效的措施進行糾正具有重要的意義。EDTA-PTCP多見腫瘤患者、自身免疫性疾病、干燥綜合征、肝病、一些不明原因過敏的患者等[3]，因為發(fā)生率很低，容易漏診誤診。

在臨床工作中，若出現(xiàn)血小板計數(shù)顯著降低時，可按照以下處理措施：①仔細檢查標本是否存在凝塊情況，排除抽血或其它因素引起的微小凝塊現(xiàn)象，并檢查儀器圖形、警示信息等方面，一般來說，當出現(xiàn)PTCP時，雖然血小板直方圖的峰高部位無異常，但峰高顯著減小或無顯著峰高，且曲線表現(xiàn)為鋸齒樣，甚至出現(xiàn)多個峰呈波浪形漂移狀等情況。②遵守血小板減少的復片規(guī)則實施血涂片染色鏡檢，檢查血小板體積、形態(tài)以及分布等信息，觀察是否存在大血小板或聚集情況。③積極與臨床醫(yī)師交流，詢問患者是否伴有皮膚黏膜出血點以及紫癜等癥狀。④必要條件下，將草酸銨抗凝按1∶19的比例進行稀釋，采集20μL末梢血，利用手工法計數(shù)血小板。⑤若條件允許，可使用不加抗凝劑的血液標本進行血小板計數(shù)檢測。⑥再次進行抽血復檢，選擇放有枸櫞酸鈉的血液標本進行檢驗。此外，對確診為EDTA-PTCP的病例，醫(yī)師應明確告知其后續(xù)進行血常規(guī)檢測時，切忌選擇EDTA進行抗凝處理。目前，細胞形態(tài)學鏡檢是檢驗細胞形態(tài)的重要指標。

總之，在檢驗的日常工作中，遇到血小板減少時，尤其是與臨床癥狀和診斷不符時，應該想到可能是血小板假性減少，可通過重新采血、血涂片染色鏡檢、末梢指血顯微鏡下手工血小板計數(shù)，改用枸櫞酸鈉或氟化鈉抗凝劑，37℃水浴，標本放置時間延長等進行復檢，來避免以上干擾因素所造成的假性血小板減少。血細胞分析儀計數(shù)血小板時，當直方圖、散點圖有異常或有報警提示時，一定要分析原因，同時做血涂片鏡檢，必要時手工血小板計數(shù)進行確認，以保證檢驗數(shù)據(jù)的準確性，準確的報告單不僅為臨床提供可靠的診斷依據(jù)，還可減少患者不必要的精神負擔和經(jīng)濟負擔。

參考文獻

梁樹芬，薛趙群，韓曉莉，等. 乙二胺四乙酸依賴的假性血小板減少的糾正研究[J]. 中國藥物與臨床，2017，17（6）：913-914.

胡冰紅. 假性血小板減少的原因分析及對策探討[J]. 實用檢驗醫(yī)師雜志，2018，10（1）：50-52.

王 洋，王 歡，徐 蘭. 腫瘤患者EDTA依賴性血小板假性減少檢測方法的分析[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2019，27（19）：3508-3510.