王麗平 朱以良 劉 琴 陳 芳 刁 波 張 宜
(解放軍中部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)科,武漢 430070)
大鼠頸部靜脈采血是大鼠重復(fù)多次采血的常用方式之一[1],目前大鼠進(jìn)行頸部靜脈采血過程中多使用藥物麻醉[2]或手法固定[3]的方式對(duì)大鼠進(jìn)行固定。但是在麻醉過程中麻藥劑量的把握一直是個(gè)難題,稍有不慎就會(huì)出現(xiàn)過量致死或劑量不夠需要多次麻醉的情況;而使用手法固定也存在一定的風(fēng)險(xiǎn),尤其對(duì)于初做實(shí)驗(yàn)的操作人員,被大鼠咬傷的事件時(shí)有發(fā)生。本文主要介紹一種新的固定方法,不同于傳統(tǒng)的手法固定也不需要進(jìn)行麻醉就可以進(jìn)行大鼠頸部靜脈采血,能有效避免操作人員被大鼠咬傷,保證安全地重復(fù)多次采血。
使用超市購買的酸奶瓶(塑膠瓶),剪去瓶子頭部的1/3部分,保留底部2/3的部分,將其側(cè)面剪開一條線,并在瓶子底部用剪刀戳幾個(gè)小洞,供老鼠呼吸用,見圖1。
兩人協(xié)作,先由實(shí)驗(yàn)輔助人員抓取實(shí)驗(yàn)大鼠,實(shí)驗(yàn)操作人員迅速用尼龍繩打活結(jié)綁住大鼠的前肢,然后將實(shí)驗(yàn)大鼠仰臥位放置在自制固定臺(tái)上,并由實(shí)驗(yàn)輔助人員輕按住大鼠的后腹部。實(shí)驗(yàn)操作人員再將自制大鼠頭罩快速罩住大鼠頭部,沿頭罩側(cè)面剪開的側(cè)線收緊頭罩,見圖2。
圖1 自制大鼠頭罩
圖2 大鼠的固定及頸部靜脈采血
實(shí)驗(yàn)操作人員左手收緊大鼠頭罩,將大鼠的頭按順時(shí)針旋轉(zhuǎn)90度,使肩頸部出現(xiàn)一個(gè)三角區(qū)域,右手持1 mL注射器,與大鼠身體長軸平行進(jìn)針扎入上述三角區(qū)域中心點(diǎn),抽取血液,見圖2。
大鼠的采血方法很多,按采血部位不同可分為尾部采血、眼部采血、心臟采血、大血管采血等[4-5],但是這些采血方法在采血前多使用麻醉手術(shù)或手法固定。本實(shí)驗(yàn)通過使用自制大鼠頭罩對(duì)大鼠頭部進(jìn)行固定,則可以避免因使用麻藥過量而造成的大鼠死亡,符合 “3R”原則,極大地減少了大鼠的意外死亡率;還可以避免在進(jìn)行采血過程中可能發(fā)生的因大鼠不安躁動(dòng)引起的咬人事件,提高了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程的安全性。另外用此固定方法進(jìn)行頸部靜脈采血可以做到快速多次的重復(fù)采血,注射器采好的血液需要沿著促凝管壁慢慢流出,使采好的血液沿著促凝管壁流至底部,以減少溶血。