周文博，褚志鵬，李羅新,，劉 偉，陳細(xì)華﹡，柴 毅，洪宇聰，孫凱輝

(1.長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北荊州 434025;2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所，武漢 430223;3.廣東越群海洋生物研究開(kāi)發(fā)有限公司，廣東揭陽(yáng) 522000)

磷是魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)所必需的重要常量礦物元素。魚(yú)類(lèi)雖然可以直接吸收自然水體中的磷，但水體中磷含量有限且吸收率低，無(wú)法滿足魚(yú)類(lèi)正常生長(zhǎng)需要，因而飼料是人工養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的主要磷源[1]。飼料中的磷來(lái)源于飼料原料中的磷及添加的無(wú)機(jī)磷，而飼料總磷中可被動(dòng)物利用的部分稱之為有效磷[2]。飼料中磷不足，會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)緩慢、飼料效率低，甚至造成魚(yú)體脂肪異常積累[3-4]。但磷含量過(guò)多時(shí)，魚(yú)體中磷的利用率不高會(huì)導(dǎo)致未被利用的磷和尿磷排泄到環(huán)境中引起水體富營(yíng)養(yǎng)化[5]。目前關(guān)于魚(yú)類(lèi)磷需要量已有一些研究，結(jié)果表明魚(yú)類(lèi)有效磷需求量在0.51%～0.96%[6-10]，這說(shuō)明不同魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料有效磷需求量差異較大。

鱘魚(yú)是鱘形目魚(yú)類(lèi)的俗稱，2019年我國(guó)鱘魚(yú)養(yǎng)殖年產(chǎn)量約為10萬(wàn)噸，但其配合飼料和營(yíng)養(yǎng)參數(shù)方面的研究仍較為薄弱[11-14]。市場(chǎng)上生產(chǎn)的商品飼料一般通過(guò)添加磷酸二氫鈣來(lái)滿足魚(yú)體對(duì)磷的需求且磷含量普遍較高，相關(guān)檢測(cè)報(bào)道鱘魚(yú)商品飼料總磷含量在1.55%～1.74%[15]，高于已知的施氏鱘(Acipenserschrenckii)(0.88%～1.00%)[16]、西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)(0.50%～0.87%)[17]和雜交鱘(Husohuso♀×A.schrenckii♂)(0.63%～1.15%)[18]的總磷需求量。不僅造成資源的浪費(fèi)同時(shí)也不利于鱘魚(yú)產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。雜交鱘(西伯利亞鱘♀×施氏鱘♂)俗稱西雜，是目前國(guó)內(nèi)商品鱘養(yǎng)殖市場(chǎng)中養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的品種[19]。鑒于此，本實(shí)驗(yàn)以西雜為研究對(duì)象探討飼料不同有效磷水平對(duì)其生長(zhǎng)性能、飼料利用、體成分和部分血清生化指標(biāo)的影響，旨在確定雜交鱘飼料有效磷的需要量，為優(yōu)化鱘魚(yú)飼料配方提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

以魚(yú)粉、明膠和干酪素為蛋白源，魚(yú)油和大豆油為脂肪源，糊精為糖源，磷酸二氫鈣為磷源配制有效磷水平(實(shí)測(cè)值)為0.37%(Diet1)、0.65%(Diet2)、0.96%(Diet3)、1.22%(Diet4)和1.48%(Diet5)的5組等氮等能飼料(表1)。原料經(jīng)粉碎后過(guò)60目篩，按表1比例精準(zhǔn)稱重(0.1 g)充分混勻，含量較低(<5%)的原料采用逐級(jí)預(yù)混法混勻,用飼料加工設(shè)備(浙江民益食品機(jī)械有限公司，32型制粒機(jī))制成直徑約為2.0 mm條狀飼料，并烘干(50℃)破碎后，將飼料密封放入-20 ℃冰柜中保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 實(shí)驗(yàn)飼料配方及成分含量Tab.1 Formulation and proximate composition of the experimental diets %

表2 飼料中的有效磷含量Tab.2 Dietary available phosphorus levels %

1.2 實(shí)驗(yàn)魚(yú)來(lái)源與飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)魚(yú)購(gòu)自荊州市漁都特種水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，并在該公司基地室內(nèi)流水養(yǎng)殖系統(tǒng)進(jìn)行養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前飼喂對(duì)照組飼料馴化實(shí)驗(yàn)魚(yú)2周，使其適應(yīng)飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。2周后，挑選規(guī)格齊整、健康的實(shí)驗(yàn)魚(yú)330尾，平均體質(zhì)量為(10.06±0.39)g，隨機(jī)平均分配到15個(gè)直徑0.78 m，高0.3 m，容量為140 L的圓柱形聚乙烯養(yǎng)殖桶，每桶放魚(yú)22尾。實(shí)驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。實(shí)驗(yàn)期間每天表觀飽食投喂3次(7:00，12:00，18:00)，每次投喂結(jié)束0.5 h后用虹吸法收集成型的糞便并進(jìn)行換水。養(yǎng)殖周期為8周。每天記錄實(shí)驗(yàn)魚(yú)攝食和死亡情況，每2周對(duì)魚(yú)體重進(jìn)行稱量。養(yǎng)殖用水為充分曝氣的地下水，養(yǎng)殖期間水溫19.2～20.9 ℃，溶氧質(zhì)量濃度6.90～7.69 mg/L，pH 7.6～8.0，氨氮質(zhì)量濃度<0.10 mg/L。

1.3 樣品的采集與測(cè)定方法

養(yǎng)殖結(jié)束時(shí)，將每個(gè)養(yǎng)殖桶的實(shí)驗(yàn)魚(yú)稱重、計(jì)數(shù)，用以計(jì)算增重率、特定生長(zhǎng)率和成活率。每桶隨機(jī)取3尾魚(yú)用MS-222(120 mg/L)麻醉后，測(cè)量體重與體長(zhǎng)，用以計(jì)算肥滿度，隨后將實(shí)驗(yàn)魚(yú)解剖取肝臟和內(nèi)臟稱重，用以計(jì)算肝體比和臟體比。統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)飼料的飼料攝入量，用以計(jì)算飼料效率和蛋白質(zhì)效率。將每個(gè)重復(fù)的糞便收集于樣品袋中放-20 ℃冰柜保存，經(jīng)冷凍干燥及粉碎后測(cè)定飼料磷表觀消化率(ADCP)。指標(biāo)的計(jì)算公式如下：

增重率(WGR)=(Wt-W0)/W0×100%；

特定生長(zhǎng)率(SGR)=(lnWt-lnW0)/t×100%；

存活率(SR)=Nt/N0×100%；

飼料效率(FE)=(Wt-W0+Md)/f×100%；

蛋白質(zhì)效率(PER)=(Wt-W0)/Pt×100%；

臟體比(VSI)=Wv/W×100%；

肝體比(HSI)=Wh/W×100%；

肥滿度(CF)=W/(BL)3×100；

磷表觀消化率(ADCP)=[1-(Tid×Pf)/(Pd×Tif)]×100%

式中，Nt為終末尾數(shù)；N0為初始尾數(shù)；Wt為終末體質(zhì)量(g)；W0為初始體質(zhì)量(g)；W為魚(yú)體重；t為實(shí)驗(yàn)天數(shù)(d)；Wh為肝臟重(g)；Wv為內(nèi)臟重(g)；f為總攝食飼料干重(g)；Md為終末每個(gè)養(yǎng)殖箱的總死亡質(zhì)量(g)；BL為終末體長(zhǎng)；Tid為飼料中TiO2含量；Pf為糞便含磷量；Tif為糞便TiO2含量；Pd為飼料含磷量。

將實(shí)驗(yàn)魚(yú)饑餓24 h處理后，每個(gè)養(yǎng)殖桶隨機(jī)取3尾魚(yú)，用MS-222(120 mg/L)麻醉后，取背部肌肉和背、側(cè)、腹骨板；再用微波爐處理加熱至魚(yú)體熟化后，分離脊柱，干燥，搗碎后去脂制備脫脂干骨[20]。另外從每個(gè)養(yǎng)殖桶中再取3尾魚(yú)，麻醉后，放-20 ℃冰柜保存用以測(cè)定全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。全魚(yú)、肌肉和飼料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定時(shí)，水分采用105 ℃干燥法測(cè)定(GB/T 5009.3-2003)。粗蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法測(cè)定(GB/T 5009.3-2003)。粗脂肪采用索氏抽提法測(cè)定(GB/T 5009.6-2003)。粗灰分采用550 ℃灼燒法測(cè)定(GB/T 5009.4-2003)。飼料、骨板和脊椎磷含量采用分光光度法(GB/T 6437-2018)。飼料鈣含量采用原子吸收光譜法(GBT 13885-2017)測(cè)定。血清生化指標(biāo)采用全自動(dòng)生化分析儀(BS-460，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測(cè)定。飼料和糞便中的二氧化鈦(TiO2)含量采用酸消化法、原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果

2.1 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

由表3可知，在本實(shí)驗(yàn)中，各組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的成活率均較高且無(wú)顯著差異。隨飼料中有效磷水平由0.37%增加至0.96%，實(shí)驗(yàn)魚(yú)的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著升高，但當(dāng)飼料有效磷水平達(dá)到0.96%后實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)速度減緩，0.96%、1.22%和1.48%組的實(shí)驗(yàn)魚(yú)的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于0.37%組和0.65%組。各實(shí)驗(yàn)組飼料效率和蛋白質(zhì)效率隨著飼料有效磷水平的增加均呈先升高后降低趨勢(shì)，對(duì)照組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的飼料效率和蛋白質(zhì)效率顯著低于其他各組，且飼料有效磷水平0.96%組的飼料效率和蛋白質(zhì)效率最高。飼料中不同有效磷水平對(duì)各實(shí)驗(yàn)組魚(yú)肝體比、臟體比和肥滿度均無(wú)顯著影響。以雜交鱘幼魚(yú)增重率為因變量(Y)，以飼料有效磷水平為自變量(X)，進(jìn)行折線回歸分析得出Y=368.46-385.53 (0.93-X) (R2=0.995 2)，當(dāng)X=0.93%時(shí)，增重率達(dá)到最大值(圖1)。

表3 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)生長(zhǎng)的影響Tab.3 Effect of dietary available phosphorus levels on growth performance of juvenile hybrid sturgeon

圖1 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)增重率的影響Fig.1 Effect of dietary available phosphorus levels on weight gain rate of juvenile hybrid sturgeon

2.2 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)體成分的影響

由表4可知，各實(shí)驗(yàn)組全魚(yú)水分和粗蛋白含量無(wú)顯著差異。隨飼料中有效磷水平增加，全魚(yú)粗脂肪含量顯著降低，對(duì)照組的全魚(yú)粗脂肪含量顯著高于其他組。全魚(yú)粗灰分和磷含量隨飼料有效磷水平增加均呈現(xiàn)先升高后趨于平穩(wěn)趨勢(shì)，0.96%、1.22%和1.48%實(shí)驗(yàn)組全魚(yú)粗灰分和磷含量顯著高于0.37%組和0.65%組。當(dāng)飼料中有效磷水平為0.96%時(shí)，全魚(yú)粗灰分含量最高，而全魚(yú)磷含量在飼料有效磷水平1.22%組達(dá)到最大值。飼料中添加不同有效磷水平對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)肌肉水分、粗蛋白、粗灰分和磷含量均無(wú)顯著影響，肌肉粗脂肪含量隨飼料有效磷水平增加呈降低趨勢(shì)但無(wú)顯著性差異。以雜交鱘幼魚(yú)全魚(yú)磷含量為因變量(Y)，以飼料有效磷水平為自變量(X)，進(jìn)行折線回歸分析得出Y=0.392 6-0.220 3(1.02-X) (R2=0.999 8)，當(dāng)X=1.02%，魚(yú)體磷含量最高(圖2)。

表4 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)體組成的影響Tab.4 Effects of dietary available phosphorus levels on body content of juvenile hybrid sturgeon %

圖2 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)全魚(yú)磷含量的影響Fig.2 Effect of dietary available phosphorus levels on whole-body phosphorus content of juvenile hybrid sturgeon

隨飼料有效磷水平的增加，脊椎粗灰分和磷含量呈先升高后趨于平穩(wěn)趨勢(shì)。飼料有效磷水平由0.37%增加至0.96%，脊椎粗灰分和磷含量顯著增加，當(dāng)飼料有效磷水平達(dá)到0.96%后實(shí)驗(yàn)魚(yú)的脊椎粗灰分和磷含量趨于平穩(wěn)。0.96%、1.22%和1.48%組脊椎粗灰分和磷含量均顯著高于0.37%組和0.65%組。以雜交鱘幼魚(yú)脊椎磷含量為因變量(Y)，以飼料有效磷水平為自變量(X)，進(jìn)行折線回歸分析得出Y=2.096 6-0.801 9(0.95-X) (R2=0.977)，當(dāng)X=0.95%，脊椎磷含量最高(圖3)。

圖3 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)脊椎磷含量的影響Fig.3 Effect of dietary available phosphorus levels on vertebrae phosphorus content of juvenile hybrid sturgeon

2.3 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，隨著飼料中有效磷水平的增加，實(shí)驗(yàn)魚(yú)血清中磷含量顯著升高，當(dāng)有效磷水平達(dá)到0.96%后趨于平穩(wěn)，且對(duì)照組的血清磷含量顯著低于其他各組；血清中鈣含量呈先升后降的趨勢(shì)，但差異不顯著。堿性磷酸酶活性隨飼料有效磷水平的增加呈先升高后趨于平穩(wěn)趨勢(shì)，對(duì)照組的堿性磷酸酶活性顯著低于其他組。

3 討論

3.1 飼料有效磷水平對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

已有研究表明低磷水平飼料會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)緩慢以及飼料效率降低[1,4]。本實(shí)驗(yàn)中飼料有效磷水平較低的組(0.37%)雜交鱘也出現(xiàn)了生長(zhǎng)緩慢及飼料效率低等癥狀。Yu等[8]和Schamber等[21]研究認(rèn)為飼料中有效磷水平較低時(shí)，磷主要被用于魚(yú)體生理代謝過(guò)程，故生長(zhǎng)所需的磷不足導(dǎo)致魚(yú)體從飼料蛋白中攝取的氨基酸未被充分利用形成體蛋白，而是通過(guò)聯(lián)合脫氨作用被代謝，從而使得魚(yú)體生長(zhǎng)受阻。Wang等[22]研究發(fā)現(xiàn)牙鲆(Paralichthysolivaceus)缺磷會(huì)出現(xiàn)食欲差和頭部畸形等癥狀。

表5 飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響Tab.5 Effect of dietary available phosphorus levels on some serum biochemical indexes of juvenile hybrid sturgeon

Roy等[23]研究也表明低磷水平飼料組黑線鱈(MelanogrammusaeglefinusL.)食欲和活力極差且出現(xiàn)脊椎彎曲癥狀。但本實(shí)驗(yàn)中并未發(fā)現(xiàn)類(lèi)似的問(wèn)題，這可能與本實(shí)驗(yàn)對(duì)照組飼料中含有少量磷有關(guān)[16]。同樣，有研究表明飼料中過(guò)量的磷會(huì)與其他礦物質(zhì)形成復(fù)合物抑制魚(yú)體對(duì)微量元素吸收并導(dǎo)致生長(zhǎng)速度的減緩[3]。在本實(shí)驗(yàn)中飼料有效磷水平最高的實(shí)驗(yàn)組并未發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的生長(zhǎng)受到明顯抑制，這表明本實(shí)驗(yàn)中雜交鱘可以耐受1.48%的有效磷水平。以增重率為指標(biāo)，通過(guò)折線回歸分析得出實(shí)驗(yàn)魚(yú)對(duì)飼料有效磷需要量為0.93%，這與施氏鱘[16]的總磷需求量(1.00%)相近。但低于雜交鱘[(歐洲鰉(Husohuso)♀×施氏鱘♂)[18](494.21±18.63) g]飼料中總磷需求量(1.15%)，分析原因可能是魚(yú)種規(guī)格的不同所造成的。然而，Xu等[17]研究發(fā)現(xiàn)以磷酸二氫鈉為磷源在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)條件下得出西伯利亞鱘的飼料總磷需求量為0.50%，低于本實(shí)驗(yàn)結(jié)果0.93%。這可能是由于魚(yú)體對(duì)飼料不同磷源利用率及養(yǎng)殖環(huán)境的不同從而造成了魚(yú)體對(duì)飼料磷的需求量有所差異[3,8]。

飼料效率和蛋白質(zhì)效率可有效反映魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料及其中蛋白質(zhì)利用情況[24]。本實(shí)驗(yàn)中，飼料有效磷水平由0.37%增加至0.96%時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組飼料效率和蛋白質(zhì)效率顯著升高。這可能是飼料有效磷水平的增加升高了羧肽酶的活性從而改善了魚(yú)體對(duì)飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收能力[25]。而當(dāng)飼料有效磷水平繼續(xù)增加至1.48%時(shí)，飼料效率和蛋白質(zhì)效率出現(xiàn)下降趨勢(shì)。這與黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)[26]和印度囊鰓鯰(Heteropneustesfossilis)[27]的研究結(jié)果類(lèi)似，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)魚(yú)在對(duì)飼料的攝食及消化吸收存在著上限，即存在一個(gè)最適磷水平能顯著提高魚(yú)體對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用[8]。因此，過(guò)高的飼料磷水平不但難以使魚(yú)體獲得最佳的生長(zhǎng)速度和飼料利用率，而且會(huì)造成飼料的浪費(fèi)，增加養(yǎng)殖成本[28]。

3.2 飼料有效磷水平對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)體成分的影響

飼料磷水平是影響魚(yú)體脂肪含量的重要因素，飼料磷水平較低時(shí)會(huì)造成魚(yú)體脂肪的大量沉積[4]。Zafar等[27]研究也發(fā)現(xiàn)飼料中有效磷水平增加會(huì)引起印度囊鰓鯰魚(yú)體脂肪含量降低。同樣的，在本實(shí)驗(yàn)中全魚(yú)粗脂肪含量與飼料有效磷水平呈負(fù)相關(guān)，對(duì)照組的魚(yú)體脂肪含量顯著高于0.65%～1.48%組，這與對(duì)鯽[9]的研究結(jié)果一致，說(shuō)明有效磷水平增加可促進(jìn)魚(yú)體脂肪的氧化代謝、保障其能量的需求，從而減少魚(yú)體脂肪的沉積[29]。Liang等[1]對(duì)草魚(yú)(Ctenopharyngodonidella)的研究認(rèn)為飼料中有效磷的缺乏會(huì)降低魚(yú)體的氧化磷酸化作用從而阻礙了機(jī)體的三羧酸循環(huán)(TCA)和體內(nèi)乙酰CoA的堆積，抑制脂肪酸的β氧化，阻礙脂肪的供能，導(dǎo)致脂肪的沉積；當(dāng)飼料有效磷水平增加后，魚(yú)體內(nèi)脂肪酸的β氧化增強(qiáng)，脂肪的供能作用加強(qiáng)，進(jìn)而使魚(yú)體脂肪沉積降低。

水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體組織中粗灰分和磷含量的變化常用作其營(yíng)養(yǎng)研究的評(píng)價(jià)指標(biāo)[30]。飼料有效磷水平由0.37%增加至1.48%，全魚(yú)粗灰分和磷含量均呈先升高后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)。這與團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)[3]和吉富羅非魚(yú)(GIFTOreochromisniloticus)[29]的研究結(jié)果一致，說(shuō)明飼料中高水平的有效磷促進(jìn)了魚(yú)體礦物質(zhì)的積累[31]?；曳值脑黾涌赡苁枪趋老到y(tǒng)、鱗片快速生長(zhǎng)發(fā)育的結(jié)果[32]。魚(yú)體內(nèi)約85%的磷儲(chǔ)存于骨骼中，而骨骼參與磷代謝，脊椎骨中磷含量可作為確定飼料中適宜的磷水平的指標(biāo)[33]。在本實(shí)驗(yàn)中，飼料有效磷水平顯著影響了實(shí)驗(yàn)魚(yú)脊椎粗灰分和磷含量，并與之呈一定的正相關(guān)。在哲羅魚(yú)(Huchotaimen)[5]的研究中也有相似結(jié)果，這表明增加飼料中的有效磷可促進(jìn)魚(yú)體骨骼中磷代謝和沉積[17]。通過(guò)折線回歸分析全魚(yú)磷含量得出實(shí)驗(yàn)魚(yú)飼料有效磷的需求量為1.02%，略高于最佳生長(zhǎng)的有效磷需求量。這可能是由于以生長(zhǎng)作為變量來(lái)評(píng)估營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求依賴于實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，基于生長(zhǎng)指標(biāo)評(píng)估所得的磷需求量將趨近于以機(jī)體組織磷沉積為評(píng)估指標(biāo)所得的磷需求量[34]。而本實(shí)驗(yàn)中以實(shí)驗(yàn)魚(yú)脊椎磷含量為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)得到的有效磷需求量幾乎與最佳生長(zhǎng)的有效磷需求量相等，這與印度囊鰓鯰[27]和黃鱔[4]等硬骨魚(yú)類(lèi)研究結(jié)果不同。有研究者推測(cè)鱘魚(yú)是軟骨魚(yú)類(lèi)，其脊椎磷含量本來(lái)就比硬骨魚(yú)類(lèi)要低[17,35]。

在本實(shí)驗(yàn)中并未發(fā)現(xiàn)飼料有效磷水平對(duì)雜交鱘幼魚(yú)的肌肉粗蛋白、粗脂肪、水分、粗灰分和磷含量有顯著影響，同樣的結(jié)果也出現(xiàn)在施氏鱘[16]的研究中，這可能與魚(yú)體肌肉對(duì)磷缺乏或富余的敏感性較低有關(guān)[36]。

3.3 飼料有效磷水平對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)能反映機(jī)體血液中營(yíng)養(yǎng)成分和生理代謝狀況的變化，血清中磷含量可以大致了解機(jī)體內(nèi)的磷吸收和利用的情況，也是評(píng)價(jià)魚(yú)體磷水平的指標(biāo)[27,37]。在本實(shí)驗(yàn)中，飼料有效磷水平由0.37%增加至0.96%，血清中的磷含量顯著升高，在鯽魚(yú)[9]的研究中也有類(lèi)似的結(jié)果，這表明增加飼料中有效磷水平有利于魚(yú)體磷的吸收和利用[1]。當(dāng)飼料有效磷水平達(dá)到0.96%后繼續(xù)增加有效磷水平，血清磷含量無(wú)顯著差異，說(shuō)明0.96%的有效磷水平促使魚(yú)體腸道和腎臟對(duì)磷的吸收機(jī)制達(dá)到飽和，此時(shí)進(jìn)一步增加有效磷水平導(dǎo)致魚(yú)體內(nèi)的可溶性磷以尿磷的方式進(jìn)行排泄以維持血清中磷含量的穩(wěn)定[4]。也有研究認(rèn)為魚(yú)體內(nèi)存在著磷的穩(wěn)態(tài)機(jī)制且血清磷含量達(dá)到一定水平即可激活此機(jī)制，并通過(guò)調(diào)節(jié)腎臟合成1,25-二羥維生素D3的速度從而調(diào)控魚(yú)體磷的吸收和骨骼的礦化速率[38]。因此有必要對(duì)磷的穩(wěn)態(tài)機(jī)制進(jìn)一步的研究。本實(shí)驗(yàn)中飼料有效磷水平的增加未顯著影響各組血清鈣含量，與澳洲銀鱸(Bidyanusbidyanus)[39]的研究結(jié)果一致。Song等[40]研究發(fā)現(xiàn)魚(yú)類(lèi)可以通過(guò)鰓上皮細(xì)胞和皮膚直接吸收周?chē)w中的鈣，同時(shí)攝食的飼料含有充足的鈣使得血清鈣含量穩(wěn)定，這可能是本實(shí)驗(yàn)中血清鈣含量無(wú)顯著差異的原因。

堿性磷酸酶主要由成骨細(xì)胞和肝臟合成分泌，參與魚(yú)體骨骼的礦物質(zhì)代謝并控制細(xì)胞膜的運(yùn)輸活性，其活性與機(jī)體鈣磷代謝強(qiáng)度緊密相關(guān)，可作為衡量肝臟和骨骼代謝狀況指標(biāo)[41]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，飼料有效磷水平由0.37%增加至0.96%，魚(yú)體血液中的堿性磷酸酶活性顯著升高。這表明飼料中有效磷水平的增加可以提高魚(yú)體堿性磷酸酶活性，促進(jìn)磷代謝及利用[3]。但飼料有效磷水平繼續(xù)增加并未提高1.22%組和1.48%組魚(yú)體血液中堿性磷酸酶的活性。Zhang等[42]研究發(fā)現(xiàn)過(guò)高的飼料有效磷水平減緩了花鱸(Lateolabraxjaponicus)骨骼的礦化和鈣磷代謝，這也可能是1.22%組和1.48%組實(shí)驗(yàn)魚(yú)血清堿性磷酸酶活性不再升高的原因。這與實(shí)驗(yàn)魚(yú)脊椎骨粗灰分和磷含量的結(jié)果相對(duì)應(yīng)。此外，血液中的堿性磷酸酶活性易受多種因素影響，如溫度、攝食量、生長(zhǎng)階段等[43]。也有研究表明飼料磷水平的增加會(huì)降低黑鯛(Sparusmacrocephalus)[30]和澳洲銀鱸[39]的堿性磷酸酶的活性。有關(guān)飼料磷水平對(duì)魚(yú)體血液堿性磷酸酶活性影響的原因有待于進(jìn)一步研究探討。

4 結(jié)論

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，綜合考慮雜交鱘幼魚(yú)的生長(zhǎng)、魚(yú)體營(yíng)養(yǎng)成分、脊椎骨磷含量及血清生化指標(biāo)，建議雜交鱘幼魚(yú)飼料有效磷水平在0.93%～1.02%。