微藻是地球上代謝功能最為多樣化的生物類群之一,在全球碳循環(huán)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用,也是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中重要的一類光合細(xì)胞工廠?!拔⒃寮?xì)胞工廠”有望成為服務(wù)“碳中和”和“碳達(dá)峰”的低碳制造解決方案之一。然而,微藻的種質(zhì)鑒定和代謝功能檢測(cè)通常十分繁瑣,目前,自然界大部分微藻難以培養(yǎng)。
近日,中科院青島生物能源與過(guò)程研究所單細(xì)胞中心發(fā)表了首個(gè)微藻拉曼組數(shù)據(jù)庫(kù),并結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí),示范了單細(xì)胞精度、快速的微藻種類鑒定和代謝功能表征。這一新技術(shù)為微藻細(xì)胞工廠的高效挖掘和篩選提供了1個(gè)免培養(yǎng)、高通量的強(qiáng)有力手段,相關(guān)工作發(fā)表于《分析化學(xué)》。
單細(xì)胞中心Mohammadhadi Heidari Baladehi等人開發(fā)了1種基于拉曼組的藻類細(xì)胞快速辨別與代謝功能快檢技術(shù)。拉曼組是1個(gè)細(xì)胞群體的單細(xì)胞拉曼光譜的總稱,代表著可以在單細(xì)胞精度快速、低成本、高通量獲取的細(xì)胞群體實(shí)時(shí)代謝狀態(tài)。
單細(xì)胞中心主任徐健告訴記者,首先,針對(duì)已獲純培養(yǎng)的藻種,研究人員采集了色素分子拉曼光譜(PS)和微藻細(xì)胞自身拉曼光譜(WS)這兩張譜圖,構(gòu)建了首個(gè)藻類拉曼組數(shù)據(jù)庫(kù)。該數(shù)據(jù)庫(kù)包含了在不同生長(zhǎng)期(穩(wěn)定期和指數(shù)期)、分屬27個(gè)微藻種屬的超過(guò)9 000個(gè)單細(xì)胞的拉曼光譜。該團(tuán)隊(duì)開發(fā)的機(jī)器學(xué)習(xí)算法,通過(guò)PS和WS的聯(lián)用,來(lái)辨別待測(cè)單細(xì)胞的藻種和生長(zhǎng)狀態(tài),準(zhǔn)確率可達(dá)97%。
其次,針對(duì)環(huán)境中的尚難培養(yǎng)的藻類細(xì)胞,研究人員借助前期發(fā)明的單細(xì)胞拉曼分選技術(shù)來(lái)捕獲活性藻類單細(xì)胞,從而采集其PS和WS這兩張拉曼譜圖,進(jìn)而結(jié)合下游單細(xì)胞測(cè)序,建立了環(huán)境中微藻單細(xì)胞代謝表型組和基因型的關(guān)聯(lián)。這種方法不需分離培養(yǎng),即可構(gòu)建環(huán)境中任何微藻細(xì)胞的拉曼光譜數(shù)據(jù)庫(kù),進(jìn)而基于機(jī)器學(xué)習(xí),支撐尚難培養(yǎng)藻種的快速鑒定和代謝功能檢測(cè)。
此外,除了種質(zhì)辨別,單細(xì)胞拉曼光譜還能揭示微藻利用二氧化碳后的碳源存儲(chǔ)形式,如油脂、淀粉、蛋白、色素等,以及它們的含量和油脂的不飽和度等化學(xué)性質(zhì)。
“這些代謝表型信息對(duì)于快速評(píng)估微藻種質(zhì)的培養(yǎng)工藝、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和應(yīng)用潛力至關(guān)重要。”徐健表示,“與傳統(tǒng)上依賴于培養(yǎng)的‘先養(yǎng)后篩’的策略不同,這一基于拉曼組的種質(zhì)篩選策略無(wú)需培養(yǎng)與擴(kuò)繁細(xì)胞,既節(jié)約了大量時(shí)間和人工,也能夠挖掘和篩選尚難培養(yǎng)的微藻細(xì)胞。”同時(shí),針對(duì)每個(gè)微藻細(xì)胞,拉曼光譜的采集通常僅需數(shù)秒的時(shí)間,且無(wú)需破壞細(xì)胞,故而步驟簡(jiǎn)潔、分析通量高、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,還能在單細(xì)胞精度同時(shí)探測(cè)從代謝表型組到基因組的全面信息。因此,這一新技術(shù)可大大加速微藻細(xì)胞工廠及其代謝產(chǎn)物的挖掘與利用。
“此次首個(gè)微藻拉曼組數(shù)據(jù)庫(kù)及其機(jī)器學(xué)習(xí)手段的發(fā)表,將加速新一代微藻資源信息平臺(tái)的構(gòu)建和共享,我們希望促進(jìn)藻類為‘雙碳行動(dòng)’做出特色貢獻(xiàn)。”徐健表示。該工作由徐健主持完成,得到了單細(xì)胞中心研究員馬波、深圳大學(xué)教授胡強(qiáng)和上海師范大學(xué)教授王全喜的幫助,并獲得了中國(guó)科學(xué)技術(shù)部、國(guó)家自然科學(xué)基金委、中國(guó)科學(xué)院、山東能源研究院、青島海洋科學(xué)與技術(shù)試點(diǎn)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室等的支持。