T淋巴細胞亞群在AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病診斷中的應用價值▲

陳善昌 劉夢芝 彭 凌 龍麗娜 胡靜云 黃樹庭 李 繁 李 奇

(廣西賀州市人民醫(yī)院檢驗科，賀州市 542899，電子郵箱：gxhzcsc@126.com)

馬爾尼菲籃狀菌病是由致病真菌馬爾尼菲籃狀菌感染所引起的一種深部真菌病，是AIDS患者晚期常見的機會性感染性疾病之一[1]，在艾滋病患者人群中發(fā)病率為4%～15.6%，病死率為10%～30%[2-4]。該病臨床癥狀復雜多樣，典型的臍凹樣皮疹僅占26%左右[5]，影像學表現(xiàn)亦無特異性，很容易與肺結(jié)核以及血液系統(tǒng)疾病相混淆，從而引起漏診、誤診。此外，馬爾尼菲籃狀菌病患者病情進展迅速，病情嚴重，若得不到及時采取針對性治療，病變可波及多個臟器，最終造成多器官功能衰竭而死亡。病原學檢查是診斷馬爾尼菲籃狀菌病的金標準，但其陽性結(jié)果要數(shù)天后才可以獲得，導致患者錯過最佳的治療搶救時機。本研究采用回顧性分析方法，比較合并和不合并馬爾尼菲籃狀菌病的AIDS患者之間T淋巴細胞亞群水平差異，評價T淋巴細胞亞群對AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的早期診斷價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 納入2016年1月至2020年5月在賀州市人民醫(yī)院就診的AIDS合并馬爾尼菲籃狀菌病的103例患者為觀察組，其中男性80例、女性23例，年齡25～77(48.4±13.9)歲。納入標準：符合《艾滋病診療指南(第三版)》[6]中艾滋病的診斷標準，且骨髓、血等體液或者各組織中檢出馬爾尼菲籃狀菌；排除標準：有其他明確機會性感染并發(fā)癥。并選取同期未合并馬爾尼菲籃狀菌病的103例AIDS患者作為對照組，其中男性76例、女性27例，年齡 24～79(50.2±12.5)歲。納入標準：符合《艾滋病診療指南(第三版)》[6]中艾滋病的診斷標準。排除標準：存在其他明確機會性感染和皮疹的表現(xiàn)。兩組患者性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(χ2=0.423，P=0.516；t=-0.991，P=0.323)。

1.2 數(shù)據(jù)采集 于患者首次入院時收集患者T淋巴細胞亞群等實驗室檢查結(jié)果。應用美國BD公司FACSCanto Ⅱ流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計學分析。符合正態(tài)分布的計量資料以(x±s)表示，組間比較采用t檢驗，不符合正態(tài)分布的資料以M(P25，P75)表示，組間比較采用Mann-Whitneyu檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；采用受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線分析淋巴細胞亞群對AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的診斷效能，根據(jù)Youden指標最大時為最佳篩選臨界值選擇靈敏度和特異度，采用z檢驗比較曲線下面積(area under the curve,AUC)。所有統(tǒng)計資料均為雙側(cè)概率檢驗，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組T淋巴細胞亞群水平的比較 觀察組的CD3+T淋巴細胞、CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞水平及CD4+/CD8+比值均低于對照組(均P<0.05)，見表1。

表1 兩組T淋巴細胞亞群水平的比較[M(P25,P75)，個/μL]

2.2 T淋巴細胞亞群對AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的診斷效能 CD4+T淋巴細胞、CD3+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞及CD4+/CD8+比值診斷AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的AUC均大于0.8(均P<0.001)，且依次減小，但CD4+T淋巴細胞和CD3+T淋巴細胞之間的AUC差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。CD4+T淋巴細胞診斷的敏感度和特異度最高。見表2和表3。

表2 ROC曲線分析結(jié)果

表3 各指標之間AUC的比較

3 討 論

近年來，隨著AIDS的流行，各地報告的馬爾尼菲籃狀菌病病例亦呈上升趨勢[7]。馬爾尼菲籃狀菌病患者的病情進展迅速，病死率較高，但其生存率與早期是否得到診斷密切相關(guān)[8]。馬爾尼菲籃狀菌病的傳統(tǒng)病原學診斷方法是通過血液等其他臨床標本中培養(yǎng)出該菌，或者在組織病理中發(fā)現(xiàn)該菌。但血液病原培養(yǎng)周期較長，常致病情延誤；組織活檢為有創(chuàng)性操作，病理組織不易獲得，臨床操作有一定難度。馬爾尼菲籃狀菌的血清學和分子生物學診斷發(fā)展迅速，但檢測方法尚不成熟，特異性和靈敏度還有待提高，也缺乏大樣本前瞻性臨床研究。因此，有必要尋找一種簡單快速的常規(guī)實驗室檢測指標用于馬爾尼菲籃狀菌病的早期診斷。

馬爾尼菲籃狀菌進入機體后主要侵犯人體單核-吞噬細胞系統(tǒng)。正常免疫狀態(tài)下，馬爾尼菲籃狀菌侵犯人體后，T淋巴細胞通過與巨噬細胞的相互作用，活化巨噬細胞，進而發(fā)揮吞噬作用，達到殺滅馬爾尼菲籃狀菌的目的。但在免疫功能受損的AIDS患者體內(nèi)，巨噬細胞不但不能及時殺滅入侵的馬爾尼菲籃狀菌，反而成為其良好的繁殖場所，導致病情惡化[9]。T淋巴細胞亞群的情況與AIDS機會性感染的發(fā)生密切相關(guān)[10]，因此本研究通過比較合并與未合并馬爾尼菲籃狀菌病的AIDS患者之間T淋巴細胞亞群的差異，分析T淋巴細胞亞群診斷AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的價值，從而為盡早發(fā)現(xiàn)馬爾尼菲籃狀菌感染提供科學依據(jù)。結(jié)果顯示，觀察組的CD3+T淋巴細胞、CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞水平及CD4+/CD8+比值均低于對照組(P<0.05)，且各指標診斷馬爾尼菲籃狀菌病的AUC均大于0.8(P<0.05)，提示T淋巴細胞亞群在診斷AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病中具有一定的臨床價值。當Youden指數(shù)最大時，對各指標對應的最佳預測值進行分析發(fā)現(xiàn)，CD8+T淋巴細胞的最佳預測值為558.9 個/μL，落在了正常范圍值之內(nèi)，雖然兩組CD8+T淋巴細胞計數(shù)差異有統(tǒng)計學意義，但對臨床的指導意義有限；而CD4+T淋巴細胞和CD3+T淋巴細胞的最佳預測值明顯偏低，且AUC均大于CD8+T淋巴細胞，故這兩個指標的診斷價值或更高。雖然CD3+T淋巴細胞和CD4+T淋巴細胞的AUC差異并無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但CD4+T淋巴細胞屬于CD3+T淋巴細胞的一部分，CD4+T淋巴細胞降低會導致CD3+T淋巴細胞降低；此外，觀察組中有9例患者CD3+T淋巴細胞水平尚在正常區(qū)間，而所有患者的CD4+T淋巴細胞水平均低于正常范圍下限；當CD4+的最佳預測值為59.8個/μL 時，敏感度(94.2%)和特異度(93.2%)也高于其他3個指標。因此，對于AIDS患者，將CD4+T淋巴細胞作為是否合并馬爾尼菲籃狀菌病早期診斷的指標可能更具優(yōu)勢。

綜上所述，合并馬爾尼菲籃狀菌病的AIDS患者T淋巴細胞亞群水平明顯降低，檢測其水平可作為AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病的輔助診斷方法之一，其中CD4+T淋巴細胞的診斷效能較高，可為臨床早期診斷AIDS患者合并馬爾尼菲籃狀菌病提供重要依據(jù)。