趙帥華 董衛(wèi)紅 楊敬

【摘要】 目的 探討苦參素型鋅指蛋白4（ZMAT4）、神經(jīng)細(xì)胞黏附因子（NCAM）水平在甲狀腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義，為指導(dǎo)臨床早期干預(yù)提供依據(jù)。

方法 選取2018年1月～2019年12月收治的30例甲狀腺癌患者作為甲狀腺癌組，并選擇同期甲狀腺腺瘤患者30例作為甲狀腺腺瘤組，兩組均進(jìn)行甲狀腺手術(shù)治療，術(shù)后病理組織均采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)組織中ZMAT4、NCAM表達(dá)，分析ZMAT4、NCAM水平在甲狀腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義。

結(jié)果 ZMAT4、NCAM在甲狀腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率均低于甲狀腺腺瘤組織（P<0.001）;甲狀腺癌組不同分期下ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;經(jīng)logistic回歸分析結(jié)果顯示，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低是甲狀腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素（OR>1，P<0.001）;繪制受試者工作曲線（ROC）發(fā)現(xiàn)，組織中ZMAT4、NCAM表達(dá)預(yù)測(cè)甲狀腺癌的曲線下面積（AUC）分別為：0.800、0.783，均有一定預(yù)測(cè)價(jià)值;采用雙變量Spearman直線相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者ZMAT4與NCAM之間呈正相關(guān)（r=0.811，P<0.001）。

結(jié)論 ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低可成為判斷甲狀腺癌發(fā)生的指標(biāo)，臨床可通過(guò)檢測(cè)組織中ZMAT4、NCAM表達(dá)預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展情況，及時(shí)采取干預(yù)措施。

【關(guān)鍵詞】 甲狀腺癌;甲狀腺腺瘤;苦參素型鋅指蛋白4;神經(jīng)細(xì)胞黏附因子;危險(xiǎn)因素;受試者工作曲線

中圖分類號(hào)：R736.1 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.05.008

【Abstract】 Objective To investigate the expression and clinical significance of the levels of zinc finger matrin-type protein 4 （ZMAT4） and neural cell adhesion molecule （NCAM） in thyroid cancer tissues， so as to provide basis for guiding clinical early intervention.

Methods 30 patients with thyroid cancer admitted to ?hospital from January 2018 to December 2019 were selected as thyroid cancer group， and 30 patients with thyroid adenoma during the same period were selected as thyroid adenoma group. Both groups were received thyroid surgery for treatment， and the expressions of ZMAT4 and NCAM in postoperative pathological tissues were all detected by immunohistochemical staining. In addition， the expression and clinical significance of ZMAT4 and NCAM levels in thyroid cancer tissues were analyzed.

Results The positive expression rates of ZMAT4 and NCAM in thyroid cancer tissues were lower than those in thyroid adenoma tissues （P < 0.001）. There was a statistically significant difference in the comparison of the positive expression rates of ZMAT4 and NCAM in different stages （P < 0.05）. Logistic regression analysis showed that the low positive expression rates of ZMAT4 and NCAM were the risk factors of thyroid cancer （OR > 1， P < 0.001）. Receiver operating curve （ROC） was drawn and found that the area under the curve （AUC） of thyroid cancer predicted by ZMAT4 and NCAM expressions in tissues were 0.800 and 0.783， respectively， ?which had certain predictive value. Spearman linear correlation analysis was used， and the results of which showed that there was a positive correlation between ZMAT4 and NCAM in patients with thyroid cancer （r = 0.811， P < 0.001）.

Conclusion Low positive expression rates of ZMAT4 and NCAM can be used as indicators to judge the occurrence of thyroid cancer. The occurrence and development of thyroid cancer can be predicted by detecting the expressions of ZMAT4 and NCAM in clinic， and ?timely intervention measures should be taken.

【Key words】 thyroid cancer; thyroid adenoma; ZMAT4; NCAM; risk factors; ROC

甲狀腺癌為常見(jiàn)的甲狀腺惡性腫瘤，絕大部分起源于濾泡上皮細(xì)胞，臨床以甲狀腺腫大為主要表現(xiàn)，且隨病情進(jìn)展，腫瘤生長(zhǎng)可壓迫食管，引發(fā)呼吸困難、吞咽障礙等并發(fā)癥，甚至迅速發(fā)生轉(zhuǎn)移，影響患者預(yù)后[1～2]。苦參素型鋅指蛋白4（ZMAT4）廣泛存在于真核生物中，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖和凋亡等過(guò)程，且在細(xì)胞識(shí)別與轉(zhuǎn)移等方面具有一定作用。而神經(jīng)細(xì)胞黏附因子（NCAM）為免疫球蛋白超家族中的一種糖蛋白，可參與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、神經(jīng)再生信號(hào)的傳導(dǎo)，在腫瘤抑制方面有一定的作用[3～4]。但目前ZMAT4、NCAM在甲狀腺癌組織中表達(dá)意義的相關(guān)研究較少，故本次研究重點(diǎn)觀察ZMAT4、NCAM在甲狀腺癌和甲狀腺腺瘤組織中的陽(yáng)性表達(dá)情況，旨在探討ZMAT4、NCAM在預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生的價(jià)值。具示如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選取2018年1月～2019年12月我院收治的30例甲狀腺癌患者作為研究對(duì)象，將其歸為甲狀腺癌組;并選擇同期甲狀腺腺瘤患者30例歸為甲狀腺腺瘤組。甲狀腺癌組中男7例，女23例;年齡30～55歲，平均（38.52±5.26）歲;TNM分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期15例，Ⅲ期7例;病理分型：乳頭狀癌25例，髓樣癌3例，未分化癥2例。甲狀腺腺瘤組男9例，女21例;年齡30～57歲，平均（39.26±5.42）歲。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），有可對(duì)比性。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《臨床疾病診斷與療效判斷標(biāo)準(zhǔn)》[5]中甲狀腺癌與甲狀腺腺瘤診斷標(biāo)準(zhǔn);②患者及其家屬均知情并簽署同意書;③無(wú)精神疾病，可正常溝通。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤;②既往有甲狀腺手術(shù)史;③既往有內(nèi)分泌治療史。

1.3 方法

1.3.1 ZMAT4、NCAM檢測(cè)

取兩組術(shù)后病理組織，常規(guī)固定標(biāo)本，進(jìn)行脫水、石蠟包埋，連續(xù)切片后依次進(jìn)行脫蠟、修復(fù)，并用過(guò)氧化氫行封閉處理。2次漂洗后進(jìn)行顯色、復(fù)染、脫水、透明、封片處理，培養(yǎng)結(jié)束后采用高倍顯微鏡觀察染色體表達(dá)情況。

1.3.2 ZMAT4、NCAM陽(yáng)性判定

篩選10個(gè)高倍顯微鏡視野共計(jì)1000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色則提示ZMAT4、NCAM表達(dá)為陽(yáng)性;按細(xì)胞陽(yáng)性比率≤1%、>1%～10%、>10%～50%、>50%分別計(jì)0、1、2、3分。按細(xì)胞染色程度無(wú)、弱、中、強(qiáng)分別計(jì) 0、1、2、3 分。兩項(xiàng)得分乘積為0分則表達(dá)為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)和例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料均行正態(tài)分布檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布采用（±s）表示;組織中ZMAT4、NCAM表達(dá)與甲狀腺癌的關(guān)系分析采用logistic回歸分析;繪制受試者工作曲線（ROC）得到曲線下面積（AUC），檢驗(yàn)ZMAT4、NCAM表達(dá)預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生的價(jià)值，AUC≤0.50：無(wú)預(yù)測(cè)價(jià)值，0.500.90：預(yù)測(cè)價(jià)值較高;采用雙變量Spearman直線相關(guān)性分析血清ZMAT4與NCAM間的相關(guān)性;檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié) ?果

2.1 兩組ZMAT4、NCAM陽(yáng)性率比較

甲狀腺癌組ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低于甲狀腺腺瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。見(jiàn)表1。

2.2 甲狀腺癌組不同分期下ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)情況

甲狀腺癌組不同分期下ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 ZMAT4、NCAM表達(dá)與甲狀腺癌發(fā)生的關(guān)系

將ZMAT4、NCAM表達(dá)作為協(xié)變量（1=陰性，0=陽(yáng)性），將甲狀腺癌的發(fā)生作為因變量（1=甲狀腺癌，0=甲狀腺腺瘤），經(jīng)logistic回歸分析結(jié)果顯示，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低是甲狀腺癌的發(fā)生的危險(xiǎn)因素（OR>1，P<0.001）。見(jiàn)表3。

2.4 ZMAT4、NCAM表達(dá)預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)價(jià)值分析結(jié)果

繪制ROC曲線（見(jiàn)圖1～2）發(fā)現(xiàn)，ZMAT4、NCAM表達(dá)用于預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生的AUC分別為：0.800、0.783，均有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。各檢驗(yàn)變量對(duì)應(yīng)的最佳閥值、特異度、靈敏度等相關(guān)參數(shù)詳見(jiàn)表4。

2.5 甲狀腺癌患者ZMAT4、NCAM間的相關(guān)性分析

采用雙變量Spearman直線相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者ZMAT4與NCAM之間呈正相關(guān)（r=0.811，P<0.001）。

3 討 ?論

甲狀腺癌的發(fā)病機(jī)制臨床尚未完全闡明，其生長(zhǎng)迅速、轉(zhuǎn)移早、易復(fù)發(fā)，若病情進(jìn)展可導(dǎo)致預(yù)后不良，對(duì)患者生命安全有較大威脅[6～7]。因此，深入探討甲狀腺癌發(fā)生的預(yù)測(cè)指標(biāo)，為臨床較好地診斷、治療甲狀腺癌提供新方案具有重要臨床意義[8～9]。

本研究結(jié)果顯示，ZMAT4、NCAM在甲狀腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率均低于甲狀腺腺瘤組織，且甲狀腺癌組不同分期下ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率比較有明顯差異，提示ZMAT4、NCAM可能與甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展存在一定關(guān)系。后經(jīng)logistic回歸進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)低是甲狀腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素;且經(jīng)繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，ZMAT4、NCAM表達(dá)用于預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生的AUC分別為：0.800、0.783，均有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。上述研究結(jié)果均驗(yàn)證，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低用于鑒別診斷甲狀腺癌發(fā)生及分期中具有一定價(jià)值。分析原因在于，ZMAT4具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)基因調(diào)控起重要的作用，能與某些RNA/DNA結(jié)合，且由于其自身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以選擇性結(jié)合特異的靶結(jié)構(gòu)，在基因的表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育等生命過(guò)程中發(fā)揮重要作用。陳翔等人[10]研究表明，ZMAT4為一個(gè)潛在的腫瘤基因，無(wú)論是單獨(dú)還是結(jié)合其他標(biāo)志物，在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中均具有作為診斷指標(biāo)的潛力，其陰性表達(dá)與甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移相關(guān)，故ZMAT4陽(yáng)性表達(dá)低用于甲狀腺癌發(fā)生的鑒別診斷中具有較高的價(jià)值，且在其分期診斷中也具有一定價(jià)值。而NCAM為免疫球蛋白超家族中的一員，廣泛存在于神經(jīng)外胚層的組織及細(xì)胞中，對(duì)腫瘤細(xì)胞的遷移及相關(guān)淋巴管的形成有一定的信號(hào)傳導(dǎo)作用[11～13]。相關(guān)研究指出，NCAM在大多數(shù)甲狀腺癌組織中為陰性表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)低，而在甲狀腺腺瘤中陽(yáng)性表達(dá)率較高，認(rèn)為NCAM可用于輔助鑒別甲狀腺的惡性病變[14]。同時(shí)，彭焱等人[15]研究證實(shí)，NCAM在甲狀腺癌中存在缺失現(xiàn)象，故陽(yáng)性表達(dá)率較低。因此，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低可成為判斷甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展的指標(biāo)。為進(jìn)一步探討ZMAT4、NCAM兩者之間是否存在關(guān)系，本研究采用雙變量Spearman直線相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者ZMAT4與NCAM之間呈正相關(guān)，表明兩者間存在一定關(guān)系，同時(shí)檢測(cè)兩者陽(yáng)性表達(dá)可提高對(duì)甲狀腺癌發(fā)生的診斷價(jià)值，但尚不能依據(jù)此結(jié)果推斷兩者在疾病中相互影響。

綜上所述，ZMAT4、NCAM陽(yáng)性表達(dá)率低用于預(yù)測(cè)甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展中的價(jià)值較高，故臨床可通過(guò)檢測(cè)組織中ZMAT4、NCAM表達(dá)，明確甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)，有助于早期采取干預(yù)措施。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2020-10-16 修回日期：2021-02-26）

（編輯：王琳葵 潘明志）