唐金詰 鄧錦霞 黃靜 黃鷗飛 李文仕
摘要:目的 探討中藥枸杞提取液對糖尿病模型小鼠治療效果. 方法 用鏈佐霉素對小鼠腹腔注射,建立糖尿病模型. 鏈佐霉素, 劑量按55mg/kg體重腹腔注射, 連續(xù)5次(日)。待血糖升高后,將造模小鼠分為:模型組(不治療),治1組,治2組, 另設(shè)一組為正常組。治1組用舒糖寶口服液治療,治2組用枸杞提取液治療, 模型組和正常組為對照組。測定造模前、造模后和治療后血糖、尿糖含量。治療結(jié)束,從眼球取血,測定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素等生化指標(biāo). 結(jié)果 按模型組、治1組、治2組、正常組依次排列,造模前血糖, 4.45±0.82、5.02±1.37、5.28±1.33、5.58±1.44(mmol/L),P>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后(治療前)血糖,26.65±7.49★★、28.43±5.40★★、27.77±5.25★★、5.68±0.25(mmol/L),、★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后血糖,20.52±4.45★★、17.06±5.87★★、16.59±4.58★★、4.95±0.51★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療前尿糖,0.79±0.82★、40.00±53.17、12.92±11.80★ 、0,(mmol/L),★P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第2次尿糖,128.19 ±42.05、53.90 ±36.17★★△△、97.74 ±10.61★★、0,(mmol/L),★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 血清尿素 , 10.90±1.45▲▲、11.63±3.24▲▲、11.22±1.76▲▲、8.31±1.17 (mmol/L),▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力,36.50±22.90、30.33±14.06▲、47.38±16.71 、27.22±5.04▲▲(U/L),▲P<0.05,▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。血清總蛋白, 48.75±5.08▲50.98±3.83 49.90±5.28▲54.07±2.51(g/L)與正常組比較,▲ P<0.05;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;結(jié)論 造模后血糖、尿糖含量明顯升高, 提示造模是成功的, 治療后血糖有明顯降低, 尿糖治療組也明顯低于模型組(不治療),以治1組最低。綜合分析,說明二組均有一定療效,以治1組較顯著.
關(guān)鍵詞:糖尿病模型;血糖;枸杞;治療;
【中圖分類號】R587.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026(2021)08-060-01
1.試劑與方法
1.1試劑與材料 鏈佐霉素,分析鈍,國產(chǎn)產(chǎn)品(成都艾科化工試劑公司產(chǎn)品);檸檬酸、檸檬酸鈉,硫脲、飽和硼酸、鄰甲苯胺、冰乙酸、標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖,均為國產(chǎn)分析鈍??偰懝檀迹═C)、甘油三酯(TG)、尿素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定試劑盒,購自南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。
1.2藥品 舒糖寶,用酸荔枝、番石榴、沙田柚等果類提取制成,由本院海爾福研制中心提供。枸杞提取液,為本市中藥店購買的于品.水提取,制得提取液0.1g/ml.1.3動物 53只小白鼠,昆明種,雌雄各半,健康,鼠齡3個月,體重25-35克.由學(xué)院動物室提供(動物使用許可證:syxk桂2011-0010, 動物生產(chǎn)許可證號:scxk桂2012-0003)。
1.4動物實(shí)驗(yàn) 53只小白鼠, 42只造模,注射鏈佐霉素,劑量按55mg/kg體重/每天,用0.1mol/L檸檬酸緩沖液(pH4.2)溶解后進(jìn)行腹腔注射,每日一次,連續(xù)5日。測定造模后3日血糖。造模組分成3組:模型組10只、治1組(16只)、治2組16。另設(shè)正常組(11只)。按成人劑量折算,治1組用舒糖寶治療,每鼠取原液0.1ml加蒸餾水稀釋至0.4ml灌胃,每日一次,。治2組用枸杞提取液治療,每鼠取枸杞提取液原液0.1ml加蒸餾水稀釋至0.4ml灌胃,每日一次治療10天; 正常組、模型組用等體積蒸餾水代替,方法相同。測定造模前、后和治療后血糖。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,從眼球取血,分離血清, 測定血清TG、TC和尿素。
1.5測定方法 血糖,用鄰甲苯胺微量法測定,從小鼠尾巴取全血20ul,按文獻(xiàn)操作(5)。TC用COD-CE-PAP法測定;TG用GPO-PAP法測定;尿素,用脲酶波氏法測定;具體操作按試劑盒說明書。
1.6統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用軟件統(tǒng)計,方差分析,Q檢驗(yàn)。結(jié)果用()表示。
2.結(jié)果
2.1一般情況 模型組開始10只小鼠, 至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,無死亡; 治療1組16只小鼠, 死亡2只, 治療2組16只小鼠, 死亡1只, 正常組11只小鼠, ,無死亡.
2.2造模前,后和治療后血糖含量測定結(jié)果。結(jié)果顯示, 造模前,各組血糖在正常范圍內(nèi),組間無明顯差異; 造模后造模各組血糖明顯升高; 治療后乃然在高水平,未到正常.見表1.
方差分析:組間比較:造模前,各組比較,F(xiàn)=1.459,P=0.237,P>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后(治療前),F(xiàn)=46.379,P=0.000,與正常組比較,★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 與正常組比較,△△P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后,F(xiàn)=21.082,P=0.000, 與正常組比較, ★★P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義;
2.3各組治療后血清甘油三酯、尿素、總蛋白含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定結(jié)果。結(jié)果顯示, 甘油三脂, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義;正常組尿素明顯低于其他各組; 正常組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶明顯低于其他各組,治1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶接近正常組;血清總蛋白差異有統(tǒng)計學(xué)意義, 正常組明顯高于模型組和治2組, 模型組最低; 見表2。
甘油三脂, F=1.186,P=0.316, P>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。尿素, F=5.798,P=0.002,與正常組比較,▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;谷丙轉(zhuǎn)氨酶, F=3.768,P=0.020,,與治療2組比較, ▲P<0.05,▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。血清總蛋白, F=2.721,P=0.057,,與正常組比較,▲ P<0.05;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.4治療前、后尿糖含量測定結(jié)果。結(jié)果顯示, 正常組治療前、后尿糖均為0。 治療前、 治療后第1次尿糖, 均為治療1組最高; 治療后第2次, 模型組最高。 見表3。
方差分析:尿糖, 組間比較:造模后,各組比較,F(xiàn)=3.069,P=0.040, P<0.05,與治1組比較, ★P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第1次尿糖,F(xiàn)=15.166,P=0.000, 與治1組比較,★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第2次尿糖, F=46.831,P=0.000, 與模型組比較,★★P<0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 與治2組比較,△△P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義;
2.5治療后二種方法測定血糖含量比較, 結(jié)果顯示, 二種方法有較大誤差, 酶法測定明顯高于鄰甲苯胺法. 見表4.
方差分析:;治療后,組間比較,鄰甲苯胺法,F(xiàn)=14.444,P=0.000, 與正常組比較, ★★P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 酶法, F=89.956,,P=0.000,與正常組比較, ★★ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與治療1組比較, ▲ P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3討論
3.1造模后血糖、尿糖含量明顯升高, 提示造模是成功的。造模前各組血糖均在正常范圍內(nèi),組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后各組血糖升至11.1mmol/l以上[4], 明顯高于造模前, 而且明顯高于正棠組。同時各組出現(xiàn)了尿糖,以模型組較低, 正常組沒有尿糖。
3.2治療后血糖有明顯降低,但可能由于血糖太高,無法降至正常,仍處于較高水平上, 尿糖治療1,2組也明顯低于模型組(不治療),以治療1組尿糖最低, 明顯低于其他二組,效果較好.結(jié)果說明二組均有一定療效。
3.3糖尿病從臨床上可見,常出現(xiàn)各種并發(fā)癥,如脂類代謝異常、腎病、心血管病、眼病等。本實(shí)驗(yàn),從血清其他指標(biāo)看, 甘油三酯各組間無明顯差異.說明脂類代謝可能尚未出現(xiàn)異常[4],但糖尿病患者并非都有脂類代謝異常,文獻(xiàn)報道僅有部分患者出現(xiàn);糖尿病引起的腎功能障礙是糖尿病常見的并發(fā)癥,使血清尿素等排泄障礙而升高,本實(shí)驗(yàn)血清尿素正常組明顯低于其他三組,說明可能糖尿病高血糖已影到腎功能,使尿素排泄障礙。 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和總蛋白,與肝功能密功相關(guān),是肝功能常測的指標(biāo)之一, 肝功能異常常引起轉(zhuǎn)氨酶升高, 總蛋白下降;實(shí)驗(yàn)提示,正常組和治1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶低而總蛋白高,說明肝功能良好,而模型組和治療2組正好相反, 說明肝功能受到一定程度損害。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并非十全十美,有些結(jié)果還需進(jìn)一步探討,尋找原因,如血糖測定, 鄰甲苯胺法測全血與酶法測血清,結(jié)果血糖含量酶法高了很多,前面測定的都是用鄰甲苯胺法測尾巴全血的,按道理推算,還要更高?還需進(jìn)一步探討。
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作者簡介:第一作者:唐金詰,出生年月:1998年10月。右江民族醫(yī)學(xué)院2017級中藥學(xué)本科班學(xué)生。通訊作者:李文仕3,副主任藥師,E-mail: sqzhang224@163.com