胡汝曉，王春暉，周 宇，黃民勇，胡素如，彭運祥，王小艷

（湖南省食用菌研究所，湖南 長沙 410013）

灰樹花 [Grifola frondosa(Dicks.)Gray]，又名舞茸，屬擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱（Hymenomycetes） 多孔菌目 （Polyporales） 皺孔菌科（Meruliaceae） 樹花菌屬（Grifola），是一種珍稀食（藥）用菌[1-2]。近幾年，灰樹栽培技術(shù)研究在多層次展開，探索性栽培[3]在食用菌欠發(fā)展省份仍然很有必要，木屑替代料栽培[4-7]可有效緩解菇木緊缺，精細(xì)化配方研究[8-9]不斷推進優(yōu)質(zhì)高效栽培，工廠化栽培研究[10-11]是栽培研究的新起點，專用品種篩選[12-13]進一步突顯優(yōu)勢栽培模式，關(guān)鍵生育期研究[14]是研究精細(xì)化的標(biāo)志，生理研究[15]是栽培創(chuàng)新的基礎(chǔ)積累。研究灰樹花出菇期菌包營養(yǎng)對子實體生長的影響，既具有較強的栽培實踐意義，又是栽培基礎(chǔ)生理研究，旨在為栽培創(chuàng)新提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與培養(yǎng)基

1.1.1 供試菌株

供試菌株為灰樹花5號，湖南省食用菌研究所保藏菌株。原種作栽培種用。

1.1.2 培養(yǎng)基配方

母種采用PDA培養(yǎng)基，原種培養(yǎng)基配方：棉籽殼35%、木屑35%、麩皮14%、玉米粉14%、白糖1%、石膏粉1%，含水量60%。

生產(chǎn)配方：棉籽殼34%、木屑34%、麩皮10%、玉米粉10%、白糖1%、石膏粉1%、山表土10%，含水量60%。

1.2 試驗方法

1.2.1 制棒

棉籽殼和木屑于制棒前1 d預(yù)濕，先將除山表土外的其他原料按配方拌勻，再加入山表土拌勻，菌棒采用15 cm×48 cm聚乙烯塑料袋，菌棒長30 cm～32 cm，常壓滅菌，冷卻至30℃以下接種箱接種，每個菌棒單面接種2穴，20℃～30℃培養(yǎng)至菌絲滿棒。

1.2.2 并棒

挑選長勢一致的菌棒進行并棒出菇試驗。對照組：單根菌棒出菇。處理1：在每根菌棒的一側(cè)割出長10 cm、寬1 cm的長縫，然后將2根菌棒的割縫對準(zhǔn)并用膠帶捆綁在一起出菇。處理2：先將1根菌棒的兩側(cè)分別割出長10 cm、寬1 cm的長縫，然后將另外2根菌棒的一側(cè)也割出長10 cm、寬1 cm的長縫，再將后面2根菌棒的割縫與前一根菌棒的兩側(cè)割縫分別對準(zhǔn)并用膠帶捆綁在一起出菇。割縫及并棒操作參見圖1。

圖1 灰樹花菌棒處理Fig.1 Treating of artificial bed-log of Grifola frondosa

1.2.3 出菇管理

并棒當(dāng)天即進行割口出菇管理，詳細(xì)操作參見專利“一種灰樹花袋栽割口覆瓦式催蕾方法”（專利號CN201110440050.8）[16]，其中對照處理在菌棒2個接種孔中間割口出菇，處理1在2個菌棒中的任意1個菌棒2個接種孔中間割口出菇，處理2在中間菌棒2個接種孔中間割口出菇。

1.2.4 取樣、模型假設(shè)與結(jié)果觀察

分別于割口當(dāng)天，割口后第8天、第16天及第24天，取割口處培養(yǎng)物測定培養(yǎng)物全氮、pH及水分含量。采收期為從割口出菇至菇蓋邊緣深色生長帶消失的時間。于割口后第22天，測定幼菇直徑（d） 和高（h），假設(shè)幼菇為錐體，其體積計算公式（V體積，cm3）為：

式中：d表示幼菇直徑（cm）；h表示幼菇高（cm）。

碎菇為采菇時菇蓋小于1 cm且菇柄明顯短于正常菇柄的菇，碎菇率為每個處理隨機取5朵菇計算碎菇率再取平均值。

1.2.5 全氮、pH、水分含量測定方法及統(tǒng)計分析方法

全氮采用NY/T 53-1987測定[17]，pH采用三愛思精密試紙（pH為3.8～5.4） 直接測定，水分采用烘箱100℃烘干至恒重并計算水分含量。試驗對照組及每個處理25個重復(fù)，每次取樣消耗1個重復(fù)，最后幼菇體積及計產(chǎn)每個處理20個重復(fù)。數(shù)據(jù)處理、繪圖及統(tǒng)計分析在IBM SPSS Statistics 19上完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 出菇期培養(yǎng)物中全氮、pH及水分變化趨勢

出菇期不同處理培養(yǎng)物全氮變化情況見圖2。

圖2 出菇期不同處理培養(yǎng)物全氮變化趨勢曲線Fig.2 Variation trend curves of total nitrogen content of culture of different treatments in fruiting period

從圖2可以看出，出菇過程中，菌棒培養(yǎng)物中的全氮含量總體呈下降趨勢。其中，開口后0～8 d下降幅度最大，這一時期為灰樹花原基形成期，說明原基形成需要從培養(yǎng)物中吸收大量氮營養(yǎng)；開口后8 d～16 d菌棒培養(yǎng)物中全氮含量變化較小，其中對照組和處理2中氮含量甚至有所回升，這一時期是灰樹花原基分化期，說明原基分化不需要從培養(yǎng)物中吸收大量氮營養(yǎng)，而對照組和處理2的氮含量回升，可能是菌棒培養(yǎng)物氮營養(yǎng)轉(zhuǎn)運所致；開口后16 d～24 d全氮含量變化在處理間出現(xiàn)較大差異，其中處理1和處理2變化較為一致，且為明顯下降趨勢，而對照組全氮含量變化不明顯，這一時期是灰樹花菇片展開期，對照組菇體比處理1和處理2要小得多，這里出現(xiàn)了一個矛盾，即菌棒培養(yǎng)物全氮含量低的菇體反而長的較大，但如果結(jié)合0～16 d全氮含量情況，也可能是對照前期氮營養(yǎng)較低，限菌了灰樹花原基的發(fā)育，從而導(dǎo)致其子實體后期對菌包營養(yǎng)的吸收能力較弱。出菇期不同處理培養(yǎng)物pH變化見圖3。

圖3 出菇期不同處理培養(yǎng)物pH變化趨勢曲線Fig.3 Variation trend curves of pH of culture of different treatments in fruiting period

從圖3可以看出，出菇過程中，菌棒培養(yǎng)物的pH整體呈下降趨勢。其中，開口后0～8 d的對照組及2個處理均呈現(xiàn)下降趨勢，且處理1及處理2小于對照組，其中處理1下降最顯著；開口后8 d～16 d，對照組與處理變化趨勢出現(xiàn)明顯不同，對照組仍呈明顯下降趨勢，處理1則出現(xiàn)明顯的回升，處理2則幾乎沒有變化。開口后16 d～24 d，對照組與2個處理變化趨勢幾乎一致，最終對照組pH要明顯低于處理1和處理2，處理1與處理2相比pH則沒有明顯差異。出菇期不同處理培養(yǎng)物含水量變化情況見圖4。

圖4 出菇期不同處理培養(yǎng)物含水量變化趨勢曲線Fig.4 Variation trend curves of water content of culture of different treatments in fruiting period

從圖4可以看出，出菇過程中，菌棒培養(yǎng)物含水量總體變化不大，波動范圍在初始含水量上下5%以內(nèi)。其中，開口后0～8 d，對照組與處理1及處理2菌棒培養(yǎng)物含水量變化趨勢差異較大，對照組呈明顯的下降趨勢，處理1變化最小，處理2呈明顯的上升趨勢；開口后8 d～16 d，對照組及2個處理均呈現(xiàn)明顯上升趨勢；開口后16 d～24 d，對照組、處理1及處理2菌棒培養(yǎng)物含水量變化趨勢較為一致，呈明顯下降趨勢，這一時期是灰樹花菇體快速生長期，菇體需要從培養(yǎng)物中吸收大量水分，培養(yǎng)物含水量下降與菇體快速生長體現(xiàn)了明顯的一致性。

2.2 不同處理出菇效果

不同處理出菇效果及數(shù)據(jù)統(tǒng)計見圖5和表1。

圖5 不同處理出菇效果Fig.5 Effects of fruiting of different treatments

表1 不同處理出菇結(jié)果Tab.1 Results of fruiting of different treatments

從圖5及表1可以看出，處理1和處理2與對照組相比，菇體顏色明顯較深，處理1與處理2之間差異不明顯，灰樹花子實體顏色一般在幼菇時較深，隨著菇體變老其顏色也會逐漸變淺，因此推測并棒可以延長出菇期，這一點在出菇期也可看出。幼菇體積對照組與2個處理，及2個處理間均存在顯著差異，單菇重量對照組與2個處理，及2個處理間均達到極顯著差異，說明并棒可以提高幼菇大小及單菇重量。

3 討論

3.1 菌包營養(yǎng)與灰樹花子實體發(fā)育間的雙向影響性

菌包營養(yǎng)對灰樹花子實體大小的影響研究更多集中在不同配方對子實體大小的影響，通過并棒研究了菌包大小對子實體大小的影響，或者說營養(yǎng)供給的穩(wěn)定性對子實體大小的影響。試驗得到一個看似矛盾的結(jié)果，即并棒后，菇體積較大，產(chǎn)量較高，而最終培養(yǎng)物中氮含量反而較低，但結(jié)合出菇全過程看，出菇前期（開口出菇前16 d） 并棒處理培養(yǎng)物全氮含量較高，這一時期可能是決定灰樹花子實體大小的關(guān)鍵時期，穩(wěn)定的營養(yǎng)供給形成了健壯的原基、幼蕾乃至小菇，而健壯的小菇營養(yǎng)吸收能力較強，從而導(dǎo)致最終培養(yǎng)物中全氮含量較低。這說明菌包營養(yǎng)與灰樹花子實體發(fā)育之間可能存在雙向影響。

3.2 菌包營養(yǎng)供應(yīng)對灰樹花子實體品質(zhì)的影響

多蕾出菇品種如灰樹花、平菇、金針菇等有些菇蕾由于營養(yǎng)供應(yīng)不足而不能完全發(fā)育，形成大小不等的幼蕾或小菇，栽培上稱之為碎菇。碎菇過多會嚴(yán)重影響商品菇的品相。研究發(fā)現(xiàn)并棒處理可極大程度的減少碎菇率，進而提高商品菇品相。這一現(xiàn)象在以往不同規(guī)格菌包出菇試驗中表現(xiàn)不明顯，這可能是并棒不僅改變了菌棒大小，還在于營養(yǎng)供給上有一個時間差，即并棒前期只有一個菌棒為出菇提供營養(yǎng)，而后才是2個或3個菌棒為出菇提供營養(yǎng)，從而確保了出菇中后期的營養(yǎng)供應(yīng)，因此確保了每個小菇蕾都有足夠的營養(yǎng)完成發(fā)育，這為高效育菇提供了新思路。

4 結(jié)論

主要采用并棒構(gòu)建灰樹花子實體生理研究新模型，與配方試驗相比，排除了營養(yǎng)豐度差異的影響，結(jié)果表明營養(yǎng)供應(yīng)穩(wěn)定性對多蕾出菇品種品質(zhì)及產(chǎn)量有明顯影響，同時灰樹花菌包營養(yǎng)與子實體發(fā)育間的雙向影響亦得到體現(xiàn)，其深層影響機理還有待進一步研究。