孟慶國 趙英同
(1遼寧省微生物科學(xué)研究院,遼寧朝陽122000;2美利堅海睿德學(xué)校,佛羅里達州33325)
四孢蘑菇Agaricuscampestris,俗稱雷窩子,是樹林中生長的野生食用菌,口蘑屬中的一個種,春、秋季生長在草地、林間空地處。四孢蘑菇子實體中等至稍大,菌蓋寬3~13 cm,初扁半球形,后平展,白色至乳白色,后期具叢毛狀鱗片;菌肉白色,肉厚;菌褶初粉紅色,后變褐色至黑褐色,較密,離生,不等長;菌柄較短、粗、圓柱形,有時稍彎曲,長1~9 cm,粗0.5~2 cm,近光滑或略有纖毛,白色,中實。四孢蘑菇味道鮮美,營養(yǎng)豐富,肉質(zhì)滑嫩,深受消費者喜愛。為了充分利用楊樹葉,筆者對采集的四孢蘑菇進行菌種分離和栽培試驗?,F(xiàn)總結(jié)介紹如下。
在采集的四孢蘑菇中,選擇長勢好、菇形完整、中等至偏大,肉厚,孢子未彈射,無病蟲害的子實體(圖1),在無菌環(huán)境中進行組織分離。組織分離培養(yǎng)基為PDA。菇面用75%酒精棉球擦拭消毒,用手術(shù)刀切開種菇(圖2),在菌柄內(nèi)側(cè)用接種鉤取1 cm3菌肉接于試管斜面培養(yǎng)基上(圖3)。將試管放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)2 d組織塊可萌發(fā)出白色菌絲,繼續(xù)培養(yǎng)2 d,挑取生長健壯菌絲尖端轉(zhuǎn)接空白試管,菌絲長滿斜面后備用。
圖1 種菇
圖2 切開的種菇
圖3 菌肉接于試管斜面
母種配方為:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,蛋白胨3 g,瓊脂18~20 g,磷酸二氫鉀3 g,硫酸鎂1.5 g,pH6.5~7.0,水1 000 mL。常規(guī)方法制備培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)接母種,于保溫箱中25℃避光培養(yǎng)8~10 d備用。
原種配方為:玉米芯78%,麩皮20%,糖1%,石膏1%,pH6.5~7.0,料含水量60%~65%。
原種容器為常用750 mL菌種瓶。菌種瓶洗凈控干后,裝培養(yǎng)料至瓶肩,擦干凈瓶外壁及瓶口內(nèi)壁,蓋上帶有透氣孔的蓋,高壓滅菌(126℃)1 h,冷卻后在無菌條件下,按常規(guī)方法接入母種。接種后于清潔培養(yǎng)室25℃,空氣相對濕度40%~50%培養(yǎng),每天通風(fēng)換氣2~3次,每次30 min。一般培養(yǎng)30~40 d菌絲長滿瓶(圖4)。
圖4 培養(yǎng)好的原種
培養(yǎng)料配方為:楊樹葉83%,麩皮15%,糖1%,石膏1%,pH6.5~7,料含水量60%~65%。
楊樹葉、麩皮混勻,石膏、糖加入水中,再將其混合充分拌勻,料含水量為65%,pH9~10。料堆寬1.5~2.0 m、高0.8~1.0 m、長不限。當(dāng)料溫升至65℃維持12 h后翻堆,如此翻堆2次,一般5~7 d發(fā)酵結(jié)束(圖5)。
圖5 堆料
選17 cm×33 cm×0.005 cm聚丙烯塑料袋,將發(fā)酵好的楊樹葉裝袋,袋口套雙套環(huán)。高壓滅菌(126℃)1 h。試驗每袋裝料折干為0.3 kg,共裝100袋。
在無菌條件下,按常規(guī)方法接入原種,每瓶原種接20袋。接種后放入培養(yǎng)室,于25℃條件下暗光培養(yǎng)。楊樹葉培養(yǎng)基透氣性好,菌絲長速快,培養(yǎng)25~30 d菌絲即可長滿袋(圖6)。當(dāng)楊樹葉基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲(圖7),就可以結(jié)束菌絲培養(yǎng)。
圖6 培養(yǎng)好的菌袋
圖7 基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲
將脫袋后菌棒放入筐內(nèi)壓實(圖8)(為了增加透氣性,筐底部放兩層報紙或遮陽網(wǎng)),將調(diào)好水的土均勻地撒在料面上,厚度3 cm(腐殖質(zhì)土,加入2%石灰,噴水調(diào)土含水量為20%,即手握成團、落地即散)。為了保持料面濕潤,土層表面覆蓋一層楊樹葉(圖9)保濕。
圖8 裝入筐內(nèi)
圖9 覆蓋楊樹葉
覆土后保持室溫20~22℃,空氣相對濕度在60%~70%,保持室內(nèi)空氣新鮮,在此條件下,菌絲5~7 d可爬上土面(圖10)。
圖10 覆土面菌絲
菌絲爬土后即可催蕾,此時拉大早晚溫差7~8℃,保持溫度15~25℃,空氣相對濕度80%~90%,一般菌絲爬土后5~7 d可見菌絲扭結(jié)變粗(圖11),約7~10 d菌絲扭結(jié)現(xiàn)蕾(圖12)。
圖11 菌絲變粗
圖12 幼蕾
幼蕾形成后,調(diào)控溫度在18~22℃,空氣相對濕度85%~90%,保持空氣新鮮,有散射光。幼蕾期千萬不可強通風(fēng),溫差不可過大,以免導(dǎo)致幼蕾萎縮死亡。
較之幼蕾期,該階段控制溫度15~22℃,空氣相對濕度85%~90%,適當(dāng)加強通風(fēng),有散射光,但不能有強光照,否則菇體表面的鱗片明顯增多,影響商品外觀。生長3 d幼菇見圖13。
圖13 逐漸長大幼菇
成菇期要適當(dāng)降低室溫,這樣可以延遲菇體開傘,使菇肉厚實。溫度可保持在15~18℃,空氣相對濕度85%~99%,有散射光。溫度過高,子實體容易早熟、開傘,光照過強,蓋表層產(chǎn)生龜裂成“花菇”,影響商品質(zhì)量。
當(dāng)菇體結(jié)實、菌蓋緊包菌柄,菌膜未破裂時采收(圖14-圖16)。采收晚,菌蓋呈傘狀(圖17),菌褶變黑(圖18),嚴重時菌褶變黑成墨汁狀(圖19)。采收前不噴水,以免影響菇保鮮期。采收時手持菌柄下部,輕輕旋轉(zhuǎn)拔起,并清除病菇、菇根。采菇后,及時補土,停水2~3 d,適度通風(fēng),待菌絲恢復(fù)生長時再噴水催蕾開始下潮菇管理,第2潮菇出菇管理參照第1潮菇。
圖14 采收子實體
圖15 菌膜未破裂
圖16 菌膜破裂
圖17 菌蓋呈傘狀
圖18 菌褶變黑
圖19 菌褶成墨汁狀
試驗共采收2潮菇,鮮菇總產(chǎn)量9 kg,總投料量為30 kg,生物學(xué)效率為30%。試驗結(jié)果表明,采用楊樹葉為主要原料覆土栽培四孢蘑菇能出菇。筆者在覆土出菇的同時,選取發(fā)滿菌絲的栽培種,開袋口并拉直,覆蓋塑料薄膜,結(jié)果沒有出菇,可見覆土是該菌株出菇的必要條件。