花生果腐病拮抗菌貝萊斯芽胞桿菌Hsg1949鑒定與防效

曹偉平，陸 晴，鹿秀云，臧衛(wèi)平，宋 健*

（1.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所/河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心/農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定 071000；2.唐山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，唐山 063001；3.保定市龍?zhí)豆珗@管理處，保定 071000）

果腐病是花生生產(chǎn)上最為嚴(yán)重的病害之一，主要癥狀表現(xiàn)為花生莢果腐爛，感病較輕的莢果為褐色或黑色，果仁小而硬實(shí)，嚴(yán)重的整個莢果果皮和果仁均腐爛，染病地塊輕者減產(chǎn)20%，嚴(yán)重的減產(chǎn)可達(dá)50%以上，對花生產(chǎn)量和品質(zhì)構(gòu)成了極為嚴(yán)重的威脅[1]。在生產(chǎn)上，抗病品種選育[2]、農(nóng)藝措施[3]和化學(xué)農(nóng)藥防治[4]是目前生產(chǎn)上防控花生果腐病最常用的措施，但目前花生抗性品種有限，同時由于果腐病病原體的宿主范圍較廣[5,6]，土壤傳播特性也加重了藥劑防治的難度；長期使用化學(xué)殺菌劑也使得花生果腐病容易產(chǎn)生抗性，同時對土壤微生態(tài)環(huán)境容易產(chǎn)生不良影響[7]。利用拮抗微生物防治農(nóng)作物病害是一種有效且綠色環(huán)保的防治途徑，近年來已得到廣泛的重視和應(yīng)用，尋找一種安全、環(huán)境友好并具有良好防治效果的新型生防菌對花生產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

利用芽胞桿菌防治植物病害是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上最常用的生物防治技術(shù)之一[8]。芽胞桿菌 Bacillus種類和數(shù)量眾多，抗逆性強(qiáng)，繁殖速度快，大多芽胞桿菌可在植物體內(nèi)外定殖，而且芽胞桿菌發(fā)酵工藝成熟，便于生產(chǎn)應(yīng)用。芽胞桿菌能產(chǎn)生多種不同結(jié)構(gòu)的抗菌物質(zhì)，如脂肽、聚酮化合物、細(xì)菌素和鐵載體等[9]，具有廣譜的抑菌活性，同時對生態(tài)環(huán)境無污染，可以與環(huán)境中的其他微生物互作，誘導(dǎo)植株產(chǎn)生抗病性。趙昱榕等[10]在黃瓜植株中分離到一株對黃瓜棒孢葉斑病具有明顯拮抗作用的貝萊斯芽胞桿菌 Bacillus velezensis ZF2，防效達(dá)90.81%，同時對多種植物病原菌具有顯著拮抗作用。沙月霞等[11,12]應(yīng)用短小芽胞桿菌B.pumilus S09、解淀粉芽胞桿菌B amyloliquefaciens S170、貝萊斯芽孢桿菌E69和枯草芽胞桿菌B.subtilis E66防治稻瘟病，田間防治效果與化學(xué)農(nóng)藥防效相當(dāng)?？莶菅堪麠U菌B1409對番茄早疫病和辣椒疫霉病的預(yù)防效果良好，同時可促進(jìn)番茄和辣椒植株生長，增強(qiáng)植物體內(nèi)超氧化物歧化酶、過氧化物酶和過氧化氫酶的活性[13]。但是將生物防治應(yīng)用于花生果腐病的研究尚處于探索階段，孫偉明等[14]報道從花生根際土壤中分離獲得了2株解淀粉芽胞桿菌，可有效降低侵脈新赤殼菌Neocosmospora sp.引起的花生果腐病的發(fā)病指數(shù)。

生防菌與病原菌之間有相同的生態(tài)位，具有共存、相隨關(guān)系，在有病原菌存在的土壤中，篩選出較強(qiáng)生防作用的菌株可能性較大[15,16]。基于此，我們在河北省多個花生主產(chǎn)區(qū)采集了莢果感染果腐病的花生根際土壤，通過平板對峙法從分離的細(xì)菌中篩選出一株芽胞桿菌Hsg1949，其菌懸液和無菌濾液對花生果腐病主要病原菌鐮孢菌Fusarium spp.的生長均有拮抗活性，結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察、Biolog微生物自動鑒定系統(tǒng)及16S rDNA和gyrA序列分析對其進(jìn)行分類鑒定，測試了該菌株對其他4種植物病原菌的拮抗作用，田間小區(qū)試驗(yàn)評價了菌株Hsg1949對花生果腐病的防治效果，以期為花生果腐病的有效防治提供新的綠色植保資源。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株 果腐病供試菌種：鐮孢菌菌株LX、DM、XT分離自感病花生莢果，采用直接挑取分離法[17]，并通過柯赫氏法則進(jìn)行致病性回接試驗(yàn)和菌種鑒定。其他供試病原菌：花生白絹病菌 Sclerotium rolfsii、棉花立枯病菌Rhizoctonia solani、棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum和棉花黃萎病菌Verticillium dahliae均由河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所分離提供。

1.1.2 供試培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，瓊脂粉15 g/L，pH自然。LB液體培養(yǎng)基：蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L，NaCl 10 g/L，pH 7.0。LB固體培養(yǎng)基：蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L，NaCl 10 g/L，瓊脂粉15 g/L。

1.2 拮抗菌株的分離篩選

1.2.1 細(xì)菌分離 土樣采集自河北邯鄲、石家莊、保定、秦皇島、唐山等縣市花生主產(chǎn)區(qū)的花生根際土，上述采集地點(diǎn)花生果腐病平均發(fā)病率15%～30%。稱取1 g土樣放到裝有99 mL無菌水的滅菌三角瓶中，170 r/min振蕩培養(yǎng)30 min，靜置30 min，取上清液10 mL加入50 mL滅菌離心管中，然后在80 ℃恒溫水浴30 min，取1 mL加無菌水9 mL，制成10 mL 10-3倍土壤微生物懸液，取兩種濃度的微生物懸液100 μL分別涂布于LB培養(yǎng)基平板上，每個濃度重復(fù)3次，在30 ℃恒溫培養(yǎng)3～5 d，待平板長出菌落后，根據(jù)《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》[18]中芽胞桿菌的形態(tài)特征進(jìn)行菌落篩選，鏡檢后采用劃線分離純化，直至得到單菌落的純培養(yǎng)物。

1.2.2 拮抗菌初篩 采用平板對峙法[19]對1.2.1中單菌落分離株進(jìn)行拮抗活性篩選。在PDA培養(yǎng)基平板（Φ＝9 cm）中心接入直徑為5 mm活化的果腐病菌餅，然后在距中心30 mm處4個方向分別接種不同分離株，以不接種分離株的平板為對照，每個處理 3次重復(fù)。28 ℃下恒溫培養(yǎng)，待空白對照即將長滿整個培養(yǎng)皿時，觀察抑菌效果，測量抑菌帶（Hsg1949菌落邊緣和和鐮孢菌邊緣之間的透明帶距離）大小。

1.2.3 拮抗菌的復(fù)篩 選取抑菌圈寬度大于6 mm的分離株，利用平板對峙培養(yǎng)方法對其進(jìn)行復(fù)篩，每處理重復(fù) 3次，以接無菌水為對照，28 ℃下恒溫培養(yǎng)。采用十字交叉法測量對照組直徑和處理組直徑，采用菌絲生長速率法[20]計算抑菌率。 抑菌率（%）＝[（對照菌落生長量－處理菌落生長量）/對照菌落生長量]×100%，生長量（mm）＝菌落平均直徑－菌餅直徑。

1.3 菌株Hsg1949鑒定

1.3.1 形態(tài)特征及生物化學(xué)特性分析 參照《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》對上述分離篩選的高效生防菌株Hsg1949進(jìn)行形態(tài)特征鑒定。應(yīng)用Biolog微生物自動分析系統(tǒng)（美國Biolog公司）對菌株Hsg1949進(jìn)行71種碳源利用測試和23種化學(xué)敏感性測試[10,21]，挑取菌株Hsg1949單菌落接種在Biolog推薦的BUG培養(yǎng)基上，33 ℃活化培養(yǎng)24 h，然后在B接種液中制成菌懸液，用Biolog 濁度儀將菌懸液濃度調(diào)至95%～98% T（T為所測得的透光率），將調(diào)好的菌懸液倒入V型加樣水槽中，用8通道電動移液器按每孔100 μL的量將菌懸液加入96微孔板的所有孔中，將微孔板放入OmniLog的孵育讀數(shù)儀中，33 ℃培養(yǎng)24 h后讀板，根據(jù)Biolog微生物鑒定系統(tǒng)給出的相似值判斷菌株Hsg1949的分類地位。

1.3.2 分子生物學(xué)鑒定 依據(jù)細(xì)菌DNA提取試劑盒（AXYGEN）步驟提取菌株Hsg1949的DNA，以細(xì)菌 16S rDNA 基因的特異引物 27F（5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′）和 1492R（5′- TACGGCTACCTTG TTACGACTT-3′）以及細(xì)菌持家基因 gyrA 的引物 GyrA-F（5′-CAGTCAGGAAATGCGTACGTCCTT-3′）和GyrA-R（5′-CAAGGTAATGCTCCAGGCATTGCT-3′）進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系50 μL，反應(yīng)體系為：基因組 DNA 2 μL，10×PCR buffer 5.0 μL，27F 引物 2 μL，1492R 引物 2 μL，dNTPs 4 μL，Taq酶（5 U/μL）0.5 μL，ddH2O 34.5 μL。反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性 3 min；94 ℃變性 30 s，54 ℃退火 30 s，72 ℃延伸1.5 min，循環(huán)30次；72 ℃10 min。PCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測，送上海派森諾基因科技有限公司測序，利用NCBI網(wǎng)站的BLAST功能對所測的16S rDNA和gyrA序列進(jìn)行同源性比對，確定親緣關(guān)系，利用MEGA6.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.4 拮抗菌株繼代培養(yǎng)穩(wěn)定性

將拮抗作用最強(qiáng)的菌株Hsg1949在LB培養(yǎng)基上采用劃線法進(jìn)行傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)40代后，采用平板對峙法測定菌株Hsg1949對花生果腐病鐮孢菌的拮抗效果，測量菌落直徑大小，采用菌絲生長速率法計算抑菌率，方法同1.2.3。

1.5 抑菌活性物質(zhì)的穩(wěn)定性

將菌株Hsg1949 接種于LB培養(yǎng)液中，30 ℃搖床（180 r/min）培養(yǎng)40 h，得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液10000 r/min離心10 min，收集上清并用0.22 μm微孔濾膜過濾，獲得無菌發(fā)酵上清液，取無菌發(fā)酵上清液分別在40 ℃、60 ℃、80 ℃、100 ℃和120 ℃處理30 min，冷卻至室溫后，將無菌上清液和PDA培養(yǎng)基按1:4（v/v）混勻倒平板，于平板中央接直徑為5 mm的果腐病菌餅，以未經(jīng)高溫處理的無菌發(fā)酵上清液為對照，每處理3個重復(fù)，27 ℃培養(yǎng)7 d，采用菌絲生長速率法計算抑菌率，方法同1.2.3。

在無菌發(fā)酵液原始pH值的基礎(chǔ)上，分別用1 mol/L的HCl和1 mol/L NaOH將無菌發(fā)酵液pH分別調(diào)至 3、5、7、9和11，靜置3 h，然后再調(diào)到pH 7，將處理后的上清液用0.22 μm微孔濾膜過濾，按1:4（v/v）與PDA培養(yǎng)基混勻倒平板，以未處理的無菌發(fā)酵上清液為對照，每處理3個重復(fù)，27 ℃培養(yǎng)7 d，采用菌絲生長速率法計算抑菌率，方法同1.2.3。

1.6 菌株Hsg1949抑菌譜測定

采用平板對峙法，以花生白絹病菌、棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌4株病原菌為指示菌，測定菌株Hsg1949的抑菌活性。用打孔器取直徑5 mm活化的供試病原菌菌塊置于PDA平板中央，在距中心30 mm處4個方向分別接種菌株Hsg1949，以不接種菌株Hsg1949的平板為對照，每處理重復(fù)3次，采用菌絲生長速率法計算抑制率，方法同1.2.3。

1.7 菌株Hsg1949 對花生果腐病的田間防效試驗(yàn)

對花生果腐病的田間小區(qū)試驗(yàn)在河北省灤州市百信花生種植專業(yè)合作社進(jìn)行，該合作社常年種植花生，往年花生果腐病發(fā)病率為10%～40%，土質(zhì)為沙壤土。2020年5月4日進(jìn)行播種，花生品種為冀花11（由灤州市百信花生種植專業(yè)合作社提供），田間采用常規(guī)農(nóng)事管理，于花生下針期（7月2日）和莢果初期（7月23日）在莖基部噴淋施藥[22,23]。菌株Hsg1949濃度設(shè)定為1×108、2×108、5×108cfu/mL[10,24]；設(shè)定化學(xué)農(nóng)藥50%多菌靈（河北冠龍農(nóng)業(yè)有限公司）（施用量為100 g/畝）和清水對照，各處理藥液用水量均為60 kg/畝，每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)20 m2。將相應(yīng)劑量的菌（藥）劑按照設(shè)定濃度分別放入15 L背負(fù)式手動噴霧器中，加水配成菌（藥）液，去掉噴頭，對準(zhǔn)花生莖基部逐一噴淋，每穴噴10～15 mL。噴淋結(jié)束后，立即用大水澆灌試驗(yàn)小區(qū)。于花生收獲時調(diào)查花生果腐病的發(fā)病情況。每處理采用5點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)調(diào)查1 m2，記錄總莢果數(shù)和被害莢果數(shù)。莢果發(fā)病率（%）＝被害莢果數(shù)/總莢果數(shù)×100，防治效果（%）＝（對照區(qū)莢果發(fā)病率－處理區(qū)莢果發(fā)病率）/對照區(qū)莢果發(fā)病率×100。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Excel計算平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，采用SPSS18.0軟件中的Duncan’s新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 拮抗菌株的分離篩選

從1523份土樣中共分離獲得芽胞桿菌232株，初篩結(jié)果表明有17株對花生果腐病菌鐮孢菌具有拮抗作用。復(fù)篩結(jié)果顯示其中4個芽胞桿菌分離株對3株鐮孢菌具有穩(wěn)定的抑菌活性，以Hsg1949的抑菌活性最強(qiáng)，抑菌率可達(dá)77.4%（表1），選擇Hsg1949開展后續(xù)研究。

初始菌株Hsg1949對3株鐮孢菌XT、LX和DM的抑制率分別為77.4%、69.3%和62.4%；抑菌帶寬1.2～8.2 mm；繼代培養(yǎng)40代抑菌結(jié)果顯示，菌株Hsg1949表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性，不易發(fā)生變異（表1）。

2.2 菌株Hsg1949的鑒定

2.2.1 菌株Hsg1949形態(tài)學(xué)和Biolog生物化學(xué)鑒定 28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h，菌株Hsg1949在LB固體培養(yǎng)基上的菌落為圓形或近圓形，邊緣嚙蝕狀，菌落隆起呈饅頭狀，表面濕潤；培養(yǎng)后期，表面干燥有皺褶，顏色為乳白色，無光澤不透明，有黏性，與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密（圖1A），革蘭氏染色為陽性，短桿狀，能夠產(chǎn)生芽胞，芽胞為橢圓形（圖1B）。采用GenIII型96孔板及Biolog自動微生物鑒定系統(tǒng)對Hsg1949的94種（71種碳源利用和23種化學(xué)敏感性）表型進(jìn)行測試（表2）結(jié)果表明，菌株Hsg1949可以利用α-D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖、1%乳酸鈉、D-山梨醇、D-甘露醇、L-谷氨酸、L-天冬氨酸、L-丙氨酸；不能利用丙三醇、D-絲氨酸、D-天冬氨酸、萬古霉素、D-松二糖、水蘇糖、α-D-乳糖、N-Acetyl-β-D甘露糖胺、D-半乳糖、D-海藻糖、肌苷、D-阿拉伯醇，與已報道的貝萊斯芽胞桿菌特征一致[10,25]。

圖1 菌株Hsg1949形態(tài)學(xué)特征Fig.1 Morphological characteristics of strain Hsg1949

表2 菌株Hsg1949生理生化特征測定Table 2 Characters of physiology and biochemistry of strain Hsg1949

2.2.2 分子生物學(xué)鑒定結(jié)果 為了進(jìn)一步明確菌株Hsg1949的分類地位，將 Hsg1949的16S rDNA序列在NCBI中進(jìn)行BLAST分析，結(jié)果顯示，菌株Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌FJ17-4（MT103089.1）、枯草芽胞桿菌ME-1（JQ900635.1）、解淀粉芽胞桿菌 SB1（MF171193.1）、蠟樣芽胞桿菌B.cereus TJ（JX506728.1）、暹羅芽胞桿菌B.siamensis ICMP 20282（MF682396.1）等菌株的16S rDNA同源性達(dá)到99.79%，系統(tǒng)發(fā)育樹顯示，Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、解淀粉芽胞桿菌處于同一分支（圖2A）。進(jìn)一步利用gyrA基因序列在NCBI中進(jìn)行Blast分析，結(jié)果顯示Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌NRRL B-41580的gyrA基因序列同源性最高，達(dá)到99.40%。系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果（圖2B）顯示，菌株Hsg1949與貝萊斯芽胞桿菌處于同一個分支，綜合上述結(jié)果，確定菌株Hsg1949為貝萊斯芽胞桿菌。

2.3 菌株Hsg1949發(fā)酵上清液抑菌活性及穩(wěn)定性

菌株Hsg1949發(fā)酵上清液具有良好的熱穩(wěn)定性（表3），與常溫（25 ℃）相比，上清液經(jīng)40 ℃～100℃處理對3株鐮孢菌分離株的拮抗活性無顯著影響（P＞0.05），120 ℃高溫處理后，上清液的抑菌活性顯著下降（P＜0.05），對3株鐮孢菌分離株的抑制率分別為0.90%、4.24%和10.56%，基本失去對鐮孢菌的抑制活性。酸性環(huán)境（pH 3.0～5.0）和中性環(huán)境（pH 7.0）未降低菌株Hsg1949發(fā)酵上清液對鐮孢菌的抑菌活性，堿性環(huán)境（pH 11）顯著降低了Hsg1949上清液的抑菌活性（表4）。

表4 菌株Hsg1949發(fā)酵濾液pH穩(wěn)定性檢測結(jié)果Table 4 The pH stability assay results of strain Hsg1949 cell-free fermentation supernatant

2.4 菌株Hsg1949對4種植物病原菌的抑制作用

抑菌譜測定結(jié)果（圖3，表5）表明，菌株Hsg1949對白絹病、黃萎病、枯萎病和立枯病4種土傳病原真菌有較好的抑制效果，抑菌率為 54.4%～79.3%，其中對黃萎病病菌的抑制活性明顯，抑菌率達(dá)到了79.3%。

表5 菌株Hsg1949對植物病原菌抑制活性Table 5 Inhibition of pathogenic fungi by strain Hsg1949

2.5 菌株Hsg1949對花生果腐病的田間防效

田間小區(qū)防病試驗(yàn)表明，菌株 Hsg1949對花生果腐病具有良好的防治效果（表 6）。Hsg1949菌劑1×108～5×108cfu/mL處理和多菌靈處理的花生莢果發(fā)病率差異不顯著（P＞0.05），均顯著低于清水對照（P＜0.05）；Hsg1949菌劑2×108、5×108cfu/mL處理對花生果腐病的防效分別為66.54%和71.27%，與化學(xué)藥劑多菌靈防效（75.11%）相當(dāng)，菌劑1×108cfu/mL處理的防效（56.35%）顯著低于多菌靈（75.11%）（P＜0.05）。

表6 不同菌劑對花生果腐病的防治效果Table 6 Control efficiency of the strain Hsg1949 against pod rot of peanut

3 討論

國內(nèi)外研究表明，花生果腐病由鐮孢菌屬[26]、腐霉屬Pythium spp.[27]、絲核菌屬Rhizoctonia spp.[28]、麗赤殼屬Calonectria spp.[29]和侵脈新赤殼菌[14]等多種病原引起，不同區(qū)域的主要致病菌有所不同[30]。目前我國山東[31]、河北[32]、海南[33]、河南[34]等地均有花生果腐病病菌分離鑒定的相關(guān)報道，表明我國花生果腐病的主要病原菌為鐮孢菌。本研究在多年種植且果腐病發(fā)生較為嚴(yán)重的花生田根際土中分離到一株對花生果腐病原菌鐮孢菌具有較明顯拮抗作用的芽胞桿菌Hsg1949。根據(jù)菌落形態(tài)特征、Biolog生理生化檢測及利用16S rDNA和gryA序列分析，鑒定菌株Hsg1949為貝萊斯芽胞桿菌。

貝萊斯芽胞桿菌是芽胞桿菌屬的一個新種，與枯草芽胞桿菌和解淀粉芽胞桿菌親緣關(guān)系密切，最早報道于2005年[35]，近年來已用于防治水稻稻瘟病[11]、棉花黃萎病[36]、水稻條斑病[18]、甘蔗赤霉病[37]、生菜軟腐病菌核病[38]、煙草赤星病[39]、番茄青枯病和香蕉枯萎病[40]、黃瓜棒孢葉斑病[10]和桑斷枝爛葉病菌[41]、羅非魚源無乳鏈球菌[42]等幾十種動植物病害的生防研究，表現(xiàn)出良好的防效，具有成為新型生防微生物農(nóng)藥的潛力。近年來，芽胞桿菌的生防機(jī)理成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，拮抗蛋白和酯肽類抗生素等次生代謝產(chǎn)物可以使拮抗菌株對多種病原菌具有抑制作用[43,44]，代謝產(chǎn)物中含有的蛋白酶和纖維素酶對病原細(xì)菌也表現(xiàn)出拮抗作用[10]。菌株Hsg1949次生代謝物拮抗作用穩(wěn)定，下一步有必要定性測定其代謝產(chǎn)物中的抗菌物質(zhì)，明確其致病機(jī)制。

生防菌株的防治效果與植物種類、土壤性質(zhì)及農(nóng)事管理等因素密不可分，不同的菌株對特定的土壤環(huán)境存在著不同的適應(yīng)力。供試菌株對目標(biāo)病原菌抑菌圈的大小并不能代表田間的防治效果，要想達(dá)到較好的田間防治效果，還需室內(nèi)篩選與溫室防效測定相結(jié)合[45]。本研究結(jié)果與這一觀點(diǎn)相吻合，相對于前人研究中芽胞桿菌對鐮孢菌等病原菌的抑菌帶，Hsg1949對鐮孢菌的抑菌帶較小，低于10 mm，但對病原菌的抑菌率達(dá)到了70%左右，田間小區(qū)試驗(yàn)表明Hsg1949對花生果腐病表現(xiàn)出較好的防治效果，與多菌靈的防治效果相當(dāng)。Hsg1949對花生白絹病等其他土傳病原真菌也具有較明顯的抗菌活性，可為花生土傳病害生防菌劑的開發(fā)應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。