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      微柱凝膠免疫檢測技術(shù)與鹽水試管檢測技術(shù)在臨床輸血治療中的應(yīng)用

      2021-11-24 13:38:52黃丹云
      醫(yī)療裝備 2021年20期
      關(guān)鍵詞:供血者微柱懸液

      黃丹云

      福州市長樂區(qū)醫(yī)院血庫 (福建福州 350200)

      輸血作為臨床常見的治療方式,有助于快速補(bǔ)充患者的血容量,但若血液質(zhì)量差、血型不符,則易導(dǎo)致不良輸血反應(yīng),降低治療安全性,進(jìn)而引起醫(yī)療糾紛,因此,在行輸血治療前,應(yīng)確保血液質(zhì)量及進(jìn)行血型鑒定,并應(yīng)嚴(yán)格配對,避免發(fā)生不良輸血反應(yīng)[1]。目前,臨床進(jìn)行血型鑒定及交叉配血常用的方法包括鹽水試管檢測技術(shù)與微柱凝膠免疫檢測技術(shù)[2]。基于此,本研究比較微柱凝膠免疫檢測技術(shù)與鹽水試管檢測技術(shù)在臨床輸血治療中的應(yīng)用價值,現(xiàn)報道如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      選取2019年5月至2020年5月我院收治的500例輸血患者作為研究對象,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對照組與試驗組,每組250例。試驗組男130例,女120例;年齡21~75歲,平均(37.10±8.70)歲。對照組男125例,女125例;年齡22~76歲,平均(36.90±9.03)歲。兩組一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):符合輸血治療適應(yīng)證;均了解研究目的,同意參與研究;病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):既往有精神疾病史;不配合研究。

      1.2 方法

      分別抽取患者及供血者清晨空腹靜脈血4~8 ml作為血液樣本,均分成2份,其中1份進(jìn)行血型鑒定,另1份進(jìn)行交叉配血。

      試驗組采用微柱凝膠免疫檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定與交叉配血。(1)血型鑒定:選擇ABO正反定型、RhD血型定型試劑卡(由湘儀集團(tuán)提供),在18~25 ℃條件下平衡30 min,使用長沙湘智離心機(jī)儀器有限公司提供的TG16WS離心機(jī)以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心2 min,確保外觀無氣泡、干膠和雜質(zhì)后緩慢撕膜待用;取患者與供血者血液樣本,經(jīng)抗凝處理后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清,在18~25 ℃條件下平衡30 min,防止冷凝集;然后分別加入適量0.9%氯化鈉注射液將患者與供血者血清樣本分別配置成濃度為0.5%的紅細(xì)胞懸液,外觀檢查呈均勻淡紅色,無血塊及絮狀物后待用;對ABO正反定型、RhD血型定型試劑卡做好標(biāo)記,分別為A、B、C、D、E、F,將濃度為0.5%的紅細(xì)胞懸液分別加入A、B、C、D管中,各50 μl,并將已知A型、B型的0.5%紅細(xì)胞懸液加入E、F凝膠微管中,各50 μl,然后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心5 min后肉眼觀察血型鑒定結(jié)果。(2)交叉配血:對微柱凝膠卡[由強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司提供]做好標(biāo)記,并在凝膠微管上標(biāo)記主側(cè)與次側(cè),在主側(cè)凝膠微管內(nèi)滴注50 μl供血者紅細(xì)胞懸液與25 μl患者血清樣本,在次側(cè)凝膠微管內(nèi)滴注25 μl供血者血清樣本與 50 μl患者紅細(xì)胞懸液,待操作完成后將其置于37 ℃下孵育,在孵育15 min后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心9 min,然后進(jìn)行結(jié)果判定。

      對照組采用鹽水試管檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定與交叉配血。(1)血型鑒定:將所有血液樣本經(jīng)抗凝處理后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清,然后加入適量0.9%氯化鈉注射液將血清樣本配置成濃度0.5%的紅細(xì)胞懸液;取小試管2支,分別標(biāo)明A、B字樣,在A試管中加入A型標(biāo)準(zhǔn)血清與患者的紅細(xì)胞懸液各50 μl,在B試管中加入B型標(biāo)準(zhǔn)血清與患者的紅細(xì)胞懸液各50 μl,混勻后均以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心1 min;取出試管后用手指輕彈試管底,使沉淀物被彈起,在良好的光源下觀察結(jié)果。(2)交叉配血:采用聚凝胺法,將供血者與患者的血液樣本以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清,加入適量0.9%氯化鈉注射液將血清樣本配置成濃度0.5%的紅細(xì)胞懸液;取2支微管,分別標(biāo)記為主側(cè)管和次側(cè)管,在主側(cè)管中滴注30 μl供血者紅細(xì)胞懸液與 50 μl患者血清樣本,在次側(cè)管中滴注50 μl供血者血清樣本與30 μl患者紅細(xì)胞懸液,然后每管再加入0.6 ml低離子介質(zhì)溶液后混勻,靜置1 min后每管再滴注2滴聚凝胺溶液(上海翊圣生物科技有限公司),混勻后以1 300 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心15 s后棄去上清液,然后輕搖試管,觀察有凝集后(若無凝集必須重做)取管底0.1 ml凝集液,并加入2滴重懸液,然后輕轉(zhuǎn)試管以混勻,肉眼觀察結(jié)果。

      1.3 評價指標(biāo)

      (1)比較兩組正反定型符合情況:管內(nèi)紅細(xì)胞部分或全部與柱內(nèi)凝膠結(jié)合(試驗組)或紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集(對照組)為陽性,管內(nèi)紅細(xì)胞完全沉積到微柱管尖底部(試驗組)或呈散在游離狀態(tài)(對照組)為陰性;若正反定型均為陰性則表示正反定型相符,若正反定型出現(xiàn)任一陽性表示正反定型不符,正反定型符合時可進(jìn)行下一步交叉配血操作,正反定型不符時必須將標(biāo)本復(fù)查,并進(jìn)一步查明原因,獲得準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果。(2)比較兩組交叉配血結(jié)果:微柱凝膠法的判定標(biāo)準(zhǔn),紅細(xì)胞沉積于凝膠微管底為匹配,紅細(xì)胞聚集于凝膠微管上、中部位為不匹配;聚凝胺法的判定標(biāo)準(zhǔn),主側(cè)管及次側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集在1 min內(nèi)散開屬于聚凝胺引起的非特異性凝集,表示患者與供血者血型匹配,紅細(xì)胞凝集不散開屬于異體抗體所引起的免疫性凝集,表示患者與供血者血型不匹配。(3)比較兩組輸血服務(wù)質(zhì)量(按照《臨床科室輸血質(zhì)量自查評分細(xì)則》進(jìn)行評定,0~100分,分值越高代表輸血服務(wù)質(zhì)量越高)及輸血意外事件發(fā)生情況。

      1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

      2 結(jié)果

      2.1 兩組血型鑒定結(jié)果比較

      兩組正反定型符合情況比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.145,P=0.703),見表1。

      表1 兩組血型鑒定結(jié)果比較[例(%)]

      2.2 兩組交叉配血結(jié)果比較

      試驗組交叉配血成功率高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

      表2 兩組交叉配血結(jié)果比較[例(%)]

      2.3兩組輸血服務(wù)質(zhì)量及輸血意外事件發(fā)生情況比較

      試驗組輸血服務(wù)質(zhì)量評分高于對照組,輸血意外事件發(fā)生率低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

      表3 兩組輸血服務(wù)質(zhì)量及輸血意外事件發(fā)生情況比較

      3 討論

      臨床急診急救中常采用輸血治療,可及時為患者補(bǔ)充血容量,避免由于血液流失過多導(dǎo)致的休克等意外事件,而于輸血前采取適宜的手段進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血非常必要[3]。

      既往臨床多采用鹽水試管檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定,采用聚凝胺法進(jìn)行交叉配血,結(jié)果易受藥物等因素的影響,無法滿足臨床實際需要[4]。隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步,微柱凝膠免疫檢測技術(shù)被廣泛用于血型鑒定與交叉配血中。有研究表明,與傳統(tǒng)檢測方法相比,微柱凝膠免疫檢測具有檢測步驟簡便、準(zhǔn)確率和靈敏度高、自動化程度和標(biāo)準(zhǔn)化高、輸血安全等優(yōu)點(diǎn)[5]。本研究結(jié)果顯示,兩組正反定型符合情況比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);試驗組交叉配血成功率及輸血服務(wù)質(zhì)量評分均高于對照組,輸血意外事件發(fā)生率低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)分析,其原因為,微柱凝膠免疫檢測技術(shù)是將抗原抗體反應(yīng)與凝膠過濾層析原理相結(jié)合的血型血清型檢測技術(shù),其本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗,在進(jìn)行微柱凝膠免疫檢測時,在裝有超細(xì)凝膠介質(zhì)的凝膠微管中紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后可形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊,在一定的離心作用力下,該凝集團(tuán)塊位于凝膠介質(zhì)表面或者中間,說明配血不合,而若血清中不含有針對紅細(xì)胞膜上血型抗原的抗體,紅細(xì)胞便不能和抗體結(jié)合,在同樣的離心作用力下,紅細(xì)胞可沉降到凝膠微管底部,說明配血成功;通過上述肉眼可見的紅細(xì)胞凝集反應(yīng)便可準(zhǔn)確判定患者與供血者的配血結(jié)果,利于提高交叉配血成功率,進(jìn)而保證臨床輸血安全性和有效性,對提升輸血服務(wù)質(zhì)量、減少輸血意外事件發(fā)生具有重要意義。

      綜上所述,將微柱凝膠免疫檢測技術(shù)應(yīng)用于臨床輸血治療中,可提高交叉配血成功率及輸血服務(wù)質(zhì)量,減少輸血意外事件的發(fā)生。

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