滑洋洋,龍安予,陶菁
(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 病理科,河南 鄭州 450000)
病理診斷在醫(yī)學(xué)診斷中占據(jù)重要地位,可通過(guò)對(duì)疾病發(fā)生原因、發(fā)病機(jī)制、患病機(jī)體形態(tài)結(jié)果、功能代謝改變及轉(zhuǎn)歸情況的研究準(zhǔn)確診斷疾病,對(duì)于疾病的臨床治療及預(yù)后具有重要參考意義,在大部分情況下可作為疾病臨床診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[1]。病理技術(shù)本質(zhì)上就是制片技術(shù),屬于病理診斷的重要內(nèi)容,病理技術(shù)的質(zhì)量控制效果能夠在很大程度上影響病理診斷結(jié)果,進(jìn)而影響醫(yī)院醫(yī)療效果,因此做好病理技術(shù)的質(zhì)量控制具有重要意義。本文綜述病理技術(shù)質(zhì)量控制過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題,并總結(jié)相應(yīng)解決對(duì)策。
在常規(guī)病理工作中標(biāo)本接收為開(kāi)始步驟,通常情況下病理技術(shù)人員需要與標(biāo)本送檢人員共同核對(duì)申請(qǐng)單及標(biāo)本的一致性,確定標(biāo)本固定的有效性與正確性,對(duì)送檢組織數(shù)量與病理申請(qǐng)單的一致性進(jìn)行核對(duì)[2]。但目前標(biāo)本處理實(shí)際工作中常見(jiàn)問(wèn)題包括:①病理申請(qǐng)單填寫(xiě)存在不規(guī)范情況:患者基本資料、標(biāo)本名稱或數(shù)量漏填,病理申請(qǐng)單手術(shù)記錄或臨床基本病程存在未填寫(xiě)或者填寫(xiě)不規(guī)范等情況,以上情況均會(huì)加大實(shí)際臨床診斷難度;②存在送檢標(biāo)本容器使用不當(dāng)或者送檢標(biāo)本無(wú)法及時(shí)通過(guò)福爾馬林進(jìn)行固定的情況;③存在病理申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本不一致情況(患者姓名、標(biāo)本名稱、送檢組織數(shù)量、標(biāo)本袋數(shù));④存在申請(qǐng)單污染情況;⑤未獲得病理科許可的情況下,臨床上留取部分標(biāo)本進(jìn)行科研,使送檢標(biāo)本不完整,導(dǎo)致臨床病理診斷結(jié)果受到影響[3]。另外,標(biāo)本送檢時(shí)是否密封、是否有污染,剩余標(biāo)本的保存也是常見(jiàn)問(wèn)題。
在進(jìn)行高質(zhì)量病理切片制備時(shí),需注重取材的有效性,該環(huán)節(jié)可直接對(duì)后續(xù)病理切片質(zhì)量產(chǎn)生影響。在取材過(guò)程中,如出現(xiàn)取材過(guò)厚或者過(guò)大情況時(shí),通常會(huì)引發(fā)脫水不徹底或者固定難度高等情況,使得后續(xù)切片質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。因此取材時(shí)需確保形態(tài)規(guī)則、大小合適、厚薄均勻,通常情況下以能夠完全放入包埋盒為宜,即大小處于1.5 cm×1.0 cm×0.2 cm~1.5 cm×1.0 cm×0.3 cm 之間。
包埋方面:在實(shí)際包埋過(guò)程中,以待包埋組織混淆、組織污染、小組織塊丟失等問(wèn)題最為常見(jiàn)。切片方面:作為病理技術(shù)質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié),在實(shí)際切片過(guò)程中,以切片不完整、厚薄不均勻、劃痕、污染、皺縮、破碎等問(wèn)題最為常見(jiàn),以上情況均可直接影響臨床診斷結(jié)果。組織染色與制片方面:在實(shí)際工作中,組織染色往往會(huì)受到多種因素的影響,使得最終染色結(jié)果出現(xiàn)問(wèn)題。
為確保病理技術(shù)質(zhì)量,醫(yī)院病理科在實(shí)際工作中需做到以下內(nèi)容:①設(shè)置專人接收標(biāo)本,使病理技術(shù)人員能夠與標(biāo)本送檢人員共同核對(duì)病理申請(qǐng)單上所填寫(xiě)的各項(xiàng)內(nèi)容,確保病理申請(qǐng)單填寫(xiě)的規(guī)范性、全面性及清潔性,認(rèn)真核對(duì)送檢標(biāo)本袋與病理申請(qǐng)單相關(guān)內(nèi)容的一致性,即通過(guò)“雙向核對(duì)”的方法進(jìn)行核對(duì);②對(duì)于接收人員而言,需在實(shí)際工作中認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本固定情況,對(duì)送檢標(biāo)本大小與容器大小進(jìn)行檢查,確保兩者相適應(yīng),通常情況下固定液量高于組織大小,前者可達(dá)到后者5~10倍;③當(dāng)病理申請(qǐng)單與標(biāo)本均確認(rèn)無(wú)誤時(shí),應(yīng)當(dāng)要求標(biāo)本送檢人員與標(biāo)本接收人員共同簽名并做好相應(yīng)備案;④在實(shí)際工作中,當(dāng)標(biāo)本接收人員收到標(biāo)本后需做好標(biāo)本保存工作,以病理申請(qǐng)單為依據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)并錄入相關(guān)信息,在登記完成后需再次核對(duì)以確保準(zhǔn)確性,避免出現(xiàn)漏號(hào)、錯(cuò)號(hào)、信息輸入錯(cuò)誤及重號(hào)情況,如再次核對(duì)時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題需采取相應(yīng)措施進(jìn)行糾正;⑤在核對(duì)過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)存在不符合送檢要求的標(biāo)本或者病理申請(qǐng)單,接收人員需及時(shí)與臨床醫(yī)生聯(lián)系或者直接拒收,待糾正后再次核對(duì)接收,需注意核對(duì)的準(zhǔn)確性[4-5]。
在實(shí)際病理工作中往往對(duì)整體性具有明確要求,因此病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)與取材醫(yī)生相互配合,達(dá)到共同協(xié)作的目的[6-7]。在實(shí)際病理工作中,對(duì)于病理技術(shù)人員的要求包括:①在取材開(kāi)始前需使用打號(hào)機(jī)提前準(zhǔn)備好包埋盒,以防止由手寫(xiě)所導(dǎo)致的誤差情況;②取材過(guò)程中,病理技術(shù)人員需積極配合取材醫(yī)師,按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格執(zhí)行“三查七對(duì)”制度,其中“三查”包括取材前查、取材時(shí)查、取材后查;“七對(duì)”包括核對(duì)患者姓名、床號(hào)、科室、病理號(hào)、組織、采集部位、采集數(shù)量;③應(yīng)當(dāng)以認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度進(jìn)行核對(duì),如核對(duì)時(shí)發(fā)現(xiàn)病理申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本不一致,或者病理申請(qǐng)單填寫(xiě)不明確等可直接影響臨床診斷的情況時(shí),應(yīng)當(dāng)及時(shí)聯(lián)系臨床醫(yī)生,共同討論后提出相應(yīng)解決方案,如有需要還可邀請(qǐng)臨床醫(yī)生共同參與取材,以確保取材過(guò)程的正確性;④在實(shí)際取材時(shí),病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)及時(shí)且準(zhǔn)確記錄取材醫(yī)生對(duì)于標(biāo)本的相關(guān)描述,如有需要還可拍照說(shuō)明,分別記錄各包埋盒中標(biāo)本名稱,以便后續(xù)取材核對(duì);⑤當(dāng)取材結(jié)束后,病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)核實(shí)取材數(shù)量與蠟塊數(shù)量,確保兩者一致性,此外還需適當(dāng)分散標(biāo)本框內(nèi)的標(biāo)本排列情況,以防止由于排列過(guò)密影響標(biāo)本脫水與固定效果[8]。
取材時(shí)還應(yīng)當(dāng)對(duì)取材醫(yī)生提出相應(yīng)要求,主要包括以下內(nèi)容:①取材工作開(kāi)始前應(yīng)提前準(zhǔn)備好相應(yīng)取材用品,選取合適的器材并按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行規(guī)范化操作。由于取材刀片通常為廢棄切片刀片,因此取材醫(yī)生在實(shí)際操作過(guò)程中需注意刀片鋒利程度,如發(fā)現(xiàn)刀片不鋒利需及時(shí)更換,以防止刀片過(guò)鈍而破壞組織結(jié)構(gòu)[9];②取材醫(yī)生在實(shí)際工作中應(yīng)當(dāng)與病理技術(shù)人員進(jìn)行共同核對(duì),如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題需及時(shí)采取相應(yīng)措施進(jìn)行解決;③在進(jìn)行取材描述時(shí),取材醫(yī)生應(yīng)適當(dāng)提高音量,以防止由于聲音過(guò)小而導(dǎo)致病理技術(shù)人員漏記或者錯(cuò)記等情況[10];④取材時(shí)需根據(jù)組織的不同采取相應(yīng)取材方法與處理方法。在對(duì)子宮肌瘤等致密組織進(jìn)行取材時(shí),應(yīng)盡量薄一些,以避免由于試劑滲入而影響脫水與固定效果;在對(duì)淋巴結(jié)取材時(shí)應(yīng)注意剔除周?chē)嘤嘀窘M織;對(duì)內(nèi)鏡下小標(biāo)本進(jìn)行取材時(shí),應(yīng)使用茶包紙進(jìn)行包裹,以防止丟失,相較于以往廣泛應(yīng)用的擦鏡紙而言,茶包紙破損率更低,且有利于包埋展開(kāi);對(duì)于帶線或者帶釘?shù)慕M織進(jìn)行取材時(shí),應(yīng)當(dāng)剔除線或釘后放入包埋盒;⑤每次取出新標(biāo)本時(shí)需及時(shí)沖洗取材器械與取材臺(tái),以防止出現(xiàn)交叉感染情況。
取材結(jié)束后,需將標(biāo)本放置于密閉式半自動(dòng)脫水機(jī)或者全自動(dòng)密閉式脫水機(jī)進(jìn)行處理,流程包括脫水、透明、浸蠟處理。應(yīng)當(dāng)由專業(yè)人員對(duì)密閉式半自動(dòng)脫水機(jī)或者全自動(dòng)密閉式脫水機(jī)進(jìn)行管理,做好日常程序設(shè)定與試劑更換,并做好記錄。按照相關(guān)規(guī)定控制脫水量、脫水時(shí)間、透明時(shí)間、浸蠟溫度等,以確保達(dá)到最佳效果。為減少處理過(guò)程中人體受到的損害,可選擇性使用新型環(huán)保材料以替代傳統(tǒng)二甲苯。
為確保包埋的有效性,針對(duì)上述問(wèn)題需采取以下措施:①在包埋開(kāi)始前與結(jié)束后需做好包埋臺(tái)清理工作,以避免殘余碎組織對(duì)包蠟塊造成污染;②包埋過(guò)程中需按照順序取出包埋組織,不可直接打開(kāi)多個(gè)包埋盒,以防止混淆情況發(fā)生;③應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況選擇合適包埋模塊,對(duì)于一般組織標(biāo)本而言,應(yīng)當(dāng)以組織最大面為標(biāo)準(zhǔn)向下進(jìn)行包埋;對(duì)于小組織標(biāo)本而言,需靠近并包埋于相同平面,在包埋過(guò)程中需仔細(xì)核對(duì),確保包埋數(shù)量與取材數(shù)量的一致性;在鑷取過(guò)程中需注意小組織滑落情況,同時(shí)還需防止過(guò)度用力而導(dǎo)致組織受損;④對(duì)皮膚黏膜與消化道組織進(jìn)行包埋時(shí)應(yīng)當(dāng)以縱向立式為主,以便對(duì)全層病變進(jìn)行觀察;⑤需重點(diǎn)觀察標(biāo)本脫水效果,如發(fā)現(xiàn)異常情況需采取相應(yīng)措施進(jìn)行處理;此外建議于通風(fēng)櫥內(nèi)完成包埋工作,以減少技術(shù)人員受到的損害[14]。
為確保切片的高質(zhì)量,應(yīng)做好以下內(nèi)容:①通過(guò)病理打號(hào)系統(tǒng)進(jìn)行操作,確保打號(hào)的規(guī)范性與完整性,使玻片維持清潔性;②切片前需做好刀片、刀座、刀架的檢查工作,適當(dāng)調(diào)整切片角度與厚度,并確保蠟塊固定有效性,以防止切片出現(xiàn)厚薄不均情況;③切片時(shí)需確保完整性,以組織最大平面為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行修整,小標(biāo)本應(yīng)當(dāng)多切幾張以便臨床醫(yī)生讀片;④撈片時(shí)需做好核對(duì)工作,以防止混淆;切完一個(gè)蠟塊后需做好刀刃清潔工作,以防止污染情況;撈片時(shí)盡量將組織放置于玻片中央,以確保玻片美觀性;⑤切片前先安裝好刀片,調(diào)整切片厚度及切片角度,確認(rèn)標(biāo)本組織類型,根據(jù)組織的不同采取不同切片標(biāo)準(zhǔn),切片前檢查切片機(jī)的角度并進(jìn)行調(diào)整固定,即刀座的角度約為10°,夾具的上下兩邊與刀刃平行,左右兩邊與刀刃垂直。預(yù)備切片和正式切片過(guò)程中所有角度均保持一致不得隨意變動(dòng)。通常情況下組織切片厚度為3~4 μm,淋巴結(jié)切片厚度應(yīng)為2 μm,脂肪相關(guān)組織可根據(jù)情況適當(dāng)增加厚度。
為確保切片的高質(zhì)量,應(yīng)做到以下內(nèi)容:①需確保脫蠟徹底性,以防止切片模糊,還需及時(shí)更換脫蠟液;②對(duì)染色及分化程度加以控制,做到對(duì)比鮮明;③切片后需迅速放置于二甲苯中,以防止霧氣出現(xiàn);④使用中性樹(shù)膠封片時(shí)需注意濃度,既不可過(guò)稀也不可過(guò)稠,以確保切片質(zhì)量。
近些年來(lái),隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的全面發(fā)展,病理診斷憑借其高度準(zhǔn)確性越來(lái)越受到重視,但在實(shí)際病理技術(shù)工作中仍然存在一些問(wèn)題,這些問(wèn)題直接影響病理技術(shù)的質(zhì)量,因此需做好病理技術(shù)質(zhì)量控制。而病理技術(shù)各項(xiàng)工作存在環(huán)環(huán)相扣情況,每個(gè)環(huán)節(jié)均可影響最終切片質(zhì)量,進(jìn)而影響病理診斷,因此需總結(jié)病理技術(shù)質(zhì)量控制常見(jiàn)的問(wèn)題,提出相應(yīng)解決措施以確保病理切片的質(zhì)量。