病理技術(shù)質(zhì)量控制常見(jiàn)問(wèn)題與方法對(duì)策分析

滑洋洋，龍安予，陶菁

(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 病理科，河南 鄭州 450000)

病理診斷在醫(yī)學(xué)診斷中占據(jù)重要地位，可通過(guò)對(duì)疾病發(fā)生原因、發(fā)病機(jī)制、患病機(jī)體形態(tài)結(jié)果、功能代謝改變及轉(zhuǎn)歸情況的研究準(zhǔn)確診斷疾病，對(duì)于疾病的臨床治療及預(yù)后具有重要參考意義，在大部分情況下可作為疾病臨床診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[1]。病理技術(shù)本質(zhì)上就是制片技術(shù)，屬于病理診斷的重要內(nèi)容，病理技術(shù)的質(zhì)量控制效果能夠在很大程度上影響病理診斷結(jié)果，進(jìn)而影響醫(yī)院醫(yī)療效果，因此做好病理技術(shù)的質(zhì)量控制具有重要意義。本文綜述病理技術(shù)質(zhì)量控制過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題，并總結(jié)相應(yīng)解決對(duì)策。

1 病理技術(shù)質(zhì)量控制常見(jiàn)問(wèn)題

1.1 標(biāo)本方面

在常規(guī)病理工作中標(biāo)本接收為開(kāi)始步驟，通常情況下病理技術(shù)人員需要與標(biāo)本送檢人員共同核對(duì)申請(qǐng)單及標(biāo)本的一致性，確定標(biāo)本固定的有效性與正確性，對(duì)送檢組織數(shù)量與病理申請(qǐng)單的一致性進(jìn)行核對(duì)[2]。但目前標(biāo)本處理實(shí)際工作中常見(jiàn)問(wèn)題包括：①病理申請(qǐng)單填寫(xiě)存在不規(guī)范情況：患者基本資料、標(biāo)本名稱或數(shù)量漏填，病理申請(qǐng)單手術(shù)記錄或臨床基本病程存在未填寫(xiě)或者填寫(xiě)不規(guī)范等情況，以上情況均會(huì)加大實(shí)際臨床診斷難度；②存在送檢標(biāo)本容器使用不當(dāng)或者送檢標(biāo)本無(wú)法及時(shí)通過(guò)福爾馬林進(jìn)行固定的情況；③存在病理申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本不一致情況(患者姓名、標(biāo)本名稱、送檢組織數(shù)量、標(biāo)本袋數(shù))；④存在申請(qǐng)單污染情況；⑤未獲得病理科許可的情況下，臨床上留取部分標(biāo)本進(jìn)行科研，使送檢標(biāo)本不完整，導(dǎo)致臨床病理診斷結(jié)果受到影響[3]。另外，標(biāo)本送檢時(shí)是否密封、是否有污染，剩余標(biāo)本的保存也是常見(jiàn)問(wèn)題。

1.2 取材方面

在進(jìn)行高質(zhì)量病理切片制備時(shí)，需注重取材的有效性，該環(huán)節(jié)可直接對(duì)后續(xù)病理切片質(zhì)量產(chǎn)生影響。在取材過(guò)程中，如出現(xiàn)取材過(guò)厚或者過(guò)大情況時(shí)，通常會(huì)引發(fā)脫水不徹底或者固定難度高等情況，使得后續(xù)切片質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。因此取材時(shí)需確保形態(tài)規(guī)則、大小合適、厚薄均勻，通常情況下以能夠完全放入包埋盒為宜，即大小處于1.5 cm×1.0 cm×0.2 cm～1.5 cm×1.0 cm×0.3 cm 之間。

1.3 包埋、切片、組織染色與制片方面

包埋方面：在實(shí)際包埋過(guò)程中，以待包埋組織混淆、組織污染、小組織塊丟失等問(wèn)題最為常見(jiàn)。切片方面：作為病理技術(shù)質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，在實(shí)際切片過(guò)程中，以切片不完整、厚薄不均勻、劃痕、污染、皺縮、破碎等問(wèn)題最為常見(jiàn)，以上情況均可直接影響臨床診斷結(jié)果。組織染色與制片方面：在實(shí)際工作中，組織染色往往會(huì)受到多種因素的影響，使得最終染色結(jié)果出現(xiàn)問(wèn)題。

2 病理技術(shù)質(zhì)量控制的方法對(duì)策

2.1 標(biāo)本方面對(duì)策

為確保病理技術(shù)質(zhì)量，醫(yī)院病理科在實(shí)際工作中需做到以下內(nèi)容：①設(shè)置專人接收標(biāo)本，使病理技術(shù)人員能夠與標(biāo)本送檢人員共同核對(duì)病理申請(qǐng)單上所填寫(xiě)的各項(xiàng)內(nèi)容，確保病理申請(qǐng)單填寫(xiě)的規(guī)范性、全面性及清潔性，認(rèn)真核對(duì)送檢標(biāo)本袋與病理申請(qǐng)單相關(guān)內(nèi)容的一致性，即通過(guò)“雙向核對(duì)”的方法進(jìn)行核對(duì)；②對(duì)于接收人員而言，需在實(shí)際工作中認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本固定情況，對(duì)送檢標(biāo)本大小與容器大小進(jìn)行檢查，確保兩者相適應(yīng)，通常情況下固定液量高于組織大小，前者可達(dá)到后者5～10倍；③當(dāng)病理申請(qǐng)單與標(biāo)本均確認(rèn)無(wú)誤時(shí)，應(yīng)當(dāng)要求標(biāo)本送檢人員與標(biāo)本接收人員共同簽名并做好相應(yīng)備案；④在實(shí)際工作中，當(dāng)標(biāo)本接收人員收到標(biāo)本后需做好標(biāo)本保存工作，以病理申請(qǐng)單為依據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)并錄入相關(guān)信息，在登記完成后需再次核對(duì)以確保準(zhǔn)確性，避免出現(xiàn)漏號(hào)、錯(cuò)號(hào)、信息輸入錯(cuò)誤及重號(hào)情況，如再次核對(duì)時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題需采取相應(yīng)措施進(jìn)行糾正；⑤在核對(duì)過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)存在不符合送檢要求的標(biāo)本或者病理申請(qǐng)單，接收人員需及時(shí)與臨床醫(yī)生聯(lián)系或者直接拒收，待糾正后再次核對(duì)接收，需注意核對(duì)的準(zhǔn)確性[4-5]。

2.2 取材方面對(duì)策

在實(shí)際病理工作中往往對(duì)整體性具有明確要求，因此病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)與取材醫(yī)生相互配合，達(dá)到共同協(xié)作的目的[6-7]。在實(shí)際病理工作中，對(duì)于病理技術(shù)人員的要求包括：①在取材開(kāi)始前需使用打號(hào)機(jī)提前準(zhǔn)備好包埋盒，以防止由手寫(xiě)所導(dǎo)致的誤差情況；②取材過(guò)程中，病理技術(shù)人員需積極配合取材醫(yī)師，按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格執(zhí)行“三查七對(duì)”制度，其中“三查”包括取材前查、取材時(shí)查、取材后查；“七對(duì)”包括核對(duì)患者姓名、床號(hào)、科室、病理號(hào)、組織、采集部位、采集數(shù)量；③應(yīng)當(dāng)以認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度進(jìn)行核對(duì)，如核對(duì)時(shí)發(fā)現(xiàn)病理申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本不一致，或者病理申請(qǐng)單填寫(xiě)不明確等可直接影響臨床診斷的情況時(shí)，應(yīng)當(dāng)及時(shí)聯(lián)系臨床醫(yī)生，共同討論后提出相應(yīng)解決方案，如有需要還可邀請(qǐng)臨床醫(yī)生共同參與取材，以確保取材過(guò)程的正確性；④在實(shí)際取材時(shí)，病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)及時(shí)且準(zhǔn)確記錄取材醫(yī)生對(duì)于標(biāo)本的相關(guān)描述，如有需要還可拍照說(shuō)明，分別記錄各包埋盒中標(biāo)本名稱，以便后續(xù)取材核對(duì)；⑤當(dāng)取材結(jié)束后，病理技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)核實(shí)取材數(shù)量與蠟塊數(shù)量，確保兩者一致性，此外還需適當(dāng)分散標(biāo)本框內(nèi)的標(biāo)本排列情況，以防止由于排列過(guò)密影響標(biāo)本脫水與固定效果[8]。

取材時(shí)還應(yīng)當(dāng)對(duì)取材醫(yī)生提出相應(yīng)要求，主要包括以下內(nèi)容：①取材工作開(kāi)始前應(yīng)提前準(zhǔn)備好相應(yīng)取材用品，選取合適的器材并按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行規(guī)范化操作。由于取材刀片通常為廢棄切片刀片，因此取材醫(yī)生在實(shí)際操作過(guò)程中需注意刀片鋒利程度，如發(fā)現(xiàn)刀片不鋒利需及時(shí)更換，以防止刀片過(guò)鈍而破壞組織結(jié)構(gòu)[9]；②取材醫(yī)生在實(shí)際工作中應(yīng)當(dāng)與病理技術(shù)人員進(jìn)行共同核對(duì)，如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題需及時(shí)采取相應(yīng)措施進(jìn)行解決；③在進(jìn)行取材描述時(shí)，取材醫(yī)生應(yīng)適當(dāng)提高音量，以防止由于聲音過(guò)小而導(dǎo)致病理技術(shù)人員漏記或者錯(cuò)記等情況[10]；④取材時(shí)需根據(jù)組織的不同采取相應(yīng)取材方法與處理方法。在對(duì)子宮肌瘤等致密組織進(jìn)行取材時(shí)，應(yīng)盡量薄一些，以避免由于試劑滲入而影響脫水與固定效果；在對(duì)淋巴結(jié)取材時(shí)應(yīng)注意剔除周?chē)嘤嘀窘M織；對(duì)內(nèi)鏡下小標(biāo)本進(jìn)行取材時(shí)，應(yīng)使用茶包紙進(jìn)行包裹，以防止丟失，相較于以往廣泛應(yīng)用的擦鏡紙而言，茶包紙破損率更低，且有利于包埋展開(kāi)；對(duì)于帶線或者帶釘?shù)慕M織進(jìn)行取材時(shí)，應(yīng)當(dāng)剔除線或釘后放入包埋盒；⑤每次取出新標(biāo)本時(shí)需及時(shí)沖洗取材器械與取材臺(tái)，以防止出現(xiàn)交叉感染情況。

2.3 取材后組織處理方面對(duì)策

取材結(jié)束后，需將標(biāo)本放置于密閉式半自動(dòng)脫水機(jī)或者全自動(dòng)密閉式脫水機(jī)進(jìn)行處理，流程包括脫水、透明、浸蠟處理。應(yīng)當(dāng)由專業(yè)人員對(duì)密閉式半自動(dòng)脫水機(jī)或者全自動(dòng)密閉式脫水機(jī)進(jìn)行管理，做好日常程序設(shè)定與試劑更換，并做好記錄。按照相關(guān)規(guī)定控制脫水量、脫水時(shí)間、透明時(shí)間、浸蠟溫度等，以確保達(dá)到最佳效果。為減少處理過(guò)程中人體受到的損害，可選擇性使用新型環(huán)保材料以替代傳統(tǒng)二甲苯。

2.4 包埋方面對(duì)策

為確保包埋的有效性，針對(duì)上述問(wèn)題需采取以下措施：①在包埋開(kāi)始前與結(jié)束后需做好包埋臺(tái)清理工作，以避免殘余碎組織對(duì)包蠟塊造成污染；②包埋過(guò)程中需按照順序取出包埋組織，不可直接打開(kāi)多個(gè)包埋盒，以防止混淆情況發(fā)生；③應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況選擇合適包埋模塊，對(duì)于一般組織標(biāo)本而言，應(yīng)當(dāng)以組織最大面為標(biāo)準(zhǔn)向下進(jìn)行包埋；對(duì)于小組織標(biāo)本而言，需靠近并包埋于相同平面，在包埋過(guò)程中需仔細(xì)核對(duì)，確保包埋數(shù)量與取材數(shù)量的一致性；在鑷取過(guò)程中需注意小組織滑落情況，同時(shí)還需防止過(guò)度用力而導(dǎo)致組織受損；④對(duì)皮膚黏膜與消化道組織進(jìn)行包埋時(shí)應(yīng)當(dāng)以縱向立式為主，以便對(duì)全層病變進(jìn)行觀察；⑤需重點(diǎn)觀察標(biāo)本脫水效果，如發(fā)現(xiàn)異常情況需采取相應(yīng)措施進(jìn)行處理；此外建議于通風(fēng)櫥內(nèi)完成包埋工作，以減少技術(shù)人員受到的損害[14]。

2.5 切片方面對(duì)策

為確保切片的高質(zhì)量，應(yīng)做好以下內(nèi)容：①通過(guò)病理打號(hào)系統(tǒng)進(jìn)行操作，確保打號(hào)的規(guī)范性與完整性，使玻片維持清潔性；②切片前需做好刀片、刀座、刀架的檢查工作，適當(dāng)調(diào)整切片角度與厚度，并確保蠟塊固定有效性，以防止切片出現(xiàn)厚薄不均情況；③切片時(shí)需確保完整性，以組織最大平面為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行修整，小標(biāo)本應(yīng)當(dāng)多切幾張以便臨床醫(yī)生讀片；④撈片時(shí)需做好核對(duì)工作，以防止混淆；切完一個(gè)蠟塊后需做好刀刃清潔工作，以防止污染情況；撈片時(shí)盡量將組織放置于玻片中央，以確保玻片美觀性；⑤切片前先安裝好刀片,調(diào)整切片厚度及切片角度,確認(rèn)標(biāo)本組織類型,根據(jù)組織的不同采取不同切片標(biāo)準(zhǔn)，切片前檢查切片機(jī)的角度并進(jìn)行調(diào)整固定，即刀座的角度約為10°，夾具的上下兩邊與刀刃平行，左右兩邊與刀刃垂直。預(yù)備切片和正式切片過(guò)程中所有角度均保持一致不得隨意變動(dòng)。通常情況下組織切片厚度為3～4 μm，淋巴結(jié)切片厚度應(yīng)為2 μm，脂肪相關(guān)組織可根據(jù)情況適當(dāng)增加厚度。

2.6 組織染色與制片方面對(duì)策

為確保切片的高質(zhì)量，應(yīng)做到以下內(nèi)容：①需確保脫蠟徹底性，以防止切片模糊，還需及時(shí)更換脫蠟液；②對(duì)染色及分化程度加以控制，做到對(duì)比鮮明；③切片后需迅速放置于二甲苯中，以防止霧氣出現(xiàn)；④使用中性樹(shù)膠封片時(shí)需注意濃度，既不可過(guò)稀也不可過(guò)稠，以確保切片質(zhì)量。

3 小結(jié)

近些年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的全面發(fā)展，病理診斷憑借其高度準(zhǔn)確性越來(lái)越受到重視，但在實(shí)際病理技術(shù)工作中仍然存在一些問(wèn)題，這些問(wèn)題直接影響病理技術(shù)的質(zhì)量，因此需做好病理技術(shù)質(zhì)量控制。而病理技術(shù)各項(xiàng)工作存在環(huán)環(huán)相扣情況，每個(gè)環(huán)節(jié)均可影響最終切片質(zhì)量，進(jìn)而影響病理診斷，因此需總結(jié)病理技術(shù)質(zhì)量控制常見(jiàn)的問(wèn)題，提出相應(yīng)解決措施以確保病理切片的質(zhì)量。