○唐黎標(biāo)
中草藥具有天然、安全和副作用小等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)在我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛應(yīng)用。但是,由于中草藥成分復(fù)雜,有效成分含量通常較低,而且魚腸道較短,排泄快,有些魚類沒有胃,造成藥劑有效成分在魚腸道中吸收時(shí)間短,吸收少,治療效果欠佳。發(fā)酵中草藥是以優(yōu)選的益生菌作為菌種,在適宜的環(huán)境條件下,在體外模擬中草藥在腸道中的消化分解過程,對(duì)中草藥的有效成分進(jìn)行生物學(xué)轉(zhuǎn)化。發(fā)酵中草藥較傳統(tǒng)中草藥具有增強(qiáng)藥效、減少用量及降低副作用等優(yōu)勢,應(yīng)用前景廣闊。
傳統(tǒng)發(fā)酵中草藥過程中存在很多問題,如發(fā)酵菌種不純導(dǎo)致發(fā)酵過程和產(chǎn)物不穩(wěn)定、難以控制等。目前用于中草藥發(fā)酵的微生物主要有乳酸菌、芽胞桿菌、酵母菌、黃曲霉菌、黑曲霉菌以及各種藥用真菌等。專家選擇13株性能良好的乳酸菌對(duì)5味抗菌、抗病毒中草藥(板藍(lán)根、甘草、陳皮、苦丁、苦藠)進(jìn)行發(fā)酵,檢測發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌的抗菌活性,結(jié)果顯示,乳酸菌在5味中草藥中均能生長,每種中草藥均有最適發(fā)酵菌株,且不同的乳酸菌菌株發(fā)酵5味中草藥表現(xiàn)出不同的抑菌能力。不同種類菌的酶系統(tǒng)不同,因此還可以采用復(fù)合菌進(jìn)行發(fā)酵。專家以復(fù)合益生菌(干酪乳桿菌、糞腸球菌、產(chǎn)朊假絲酵母)固態(tài)發(fā)酵復(fù)方中草藥,分別測定總黃酮、總生物堿、粗多糖和總皂苷的含量,研究發(fā)現(xiàn)中草藥經(jīng)微生物發(fā)酵后,可溶性總黃酮、總生物堿、粗多糖和總皂苷含量分別比未發(fā)酵組提高 55.14%、127.28%、55.42%和49.21%。此外,將中草藥提取液加入到藥用真菌的培養(yǎng)液中進(jìn)行發(fā)酵,也能促使藥效物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。
微生物發(fā)酵是提高中草藥有效成分的最重要的方法之一,發(fā)酵過程中最關(guān)鍵的是對(duì)發(fā)酵條件的優(yōu)化控制。傳統(tǒng)中草藥發(fā)酵過程主要憑主觀經(jīng)驗(yàn)控制,如發(fā)酵溫度、濕度等,不能保證其發(fā)酵質(zhì)量的穩(wěn)定性。而現(xiàn)代中草藥發(fā)酵是利用微生物的代謝作用分解植物中的大分子物質(zhì),在發(fā)酵的全過程中利用現(xiàn)代生物技術(shù)對(duì)發(fā)酵工藝條件(純種發(fā)酵菌種、溫度、濕度、氧氣和pH等)進(jìn)行監(jiān)控,提高對(duì)中草藥有效成分的提取率。專家研究了枯草芽孢桿菌發(fā)酵金櫻子的最佳工藝,以金櫻子多糖含量為檢測指標(biāo),以5個(gè)單因素為優(yōu)化條件,通過單因素和響應(yīng)面相結(jié)合的試驗(yàn)方法得出最佳條件為:含水量為53.79%、接種量為5.74%、發(fā)酵時(shí)間為2天,此條件下測得金櫻子多糖平均值為15.47%。相較于未發(fā)酵金櫻子中10.49%的金櫻子多糖提高了47.47%。復(fù)方中藥由于其組方中各藥物的協(xié)同作用,實(shí)際應(yīng)用效果優(yōu)于單味中藥,因此,對(duì)復(fù)方中草藥進(jìn)行發(fā)酵工藝的優(yōu)化具有更好的應(yīng)用前景。
一些中草藥作為飼料添加劑可以增強(qiáng)動(dòng)物對(duì)飼料的消化、吸收,提高飼料利用率,促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育,提高動(dòng)物的生長性能。專家在吉富羅非魚幼魚日糧中添加了4種傳統(tǒng)醫(yī)藥典籍記載的中藥方劑,發(fā)現(xiàn)其中3種能顯著提高羅非魚的特定生長率,降低其飼料系數(shù)。益生菌添加到水產(chǎn)動(dòng)物飼料中,通過腸道黏附定植、免疫系統(tǒng)增強(qiáng)和腸道菌群優(yōu)化發(fā)揮其生理功能,在改善飼料利用率、促進(jìn)機(jī)體生長方面有顯著的應(yīng)用效果。益生菌在發(fā)酵中草藥的過程中,與中草藥能相鋪相成,中草藥能促進(jìn)益生菌的增殖,益生菌則能增強(qiáng)中草藥的吸收率,發(fā)酵中草藥能表現(xiàn)出比中草藥和益生菌單獨(dú)使用更好的功效。專家研究了飼料中添加益生菌發(fā)酵中草藥對(duì)鯉魚生長性能的影響,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵中草藥組比對(duì)照組增重率提高了22.55%,飼料系數(shù)下降了22.48%,比添加中草藥組增重率提高了21.55%,飼料系數(shù)下降了21.56%。
中草藥中含有的多糖類、有機(jī)酸類、生物堿類和揮發(fā)油類物質(zhì)可增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能。研究發(fā)現(xiàn),大多數(shù)中草藥具有免疫雙向調(diào)節(jié)功能。益生菌也能通過與腸道菌群相互協(xié)調(diào),并通過與腸道相關(guān)淋巴組織(GALT)相互作用,調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞分化及其相關(guān)細(xì)胞因子分泌,從而調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能。中草藥經(jīng)益生菌發(fā)酵后,能提高其中有效成分總黃酮、皂苷、生物堿、粗多糖和總多糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù),從而對(duì)機(jī)體的非特異性免疫有更明顯的提高。研究表明,復(fù)方發(fā)酵中草藥能顯著提高鯉魚、鯽魚和草魚的非特異性免疫能力,而且在飼料中分別添加2%的未發(fā)酵中草藥和發(fā)酵中草藥預(yù)防和治療鯽魚出血病發(fā)現(xiàn),相比較等添加量的未發(fā)酵中草藥,發(fā)酵中草藥預(yù)防組成活率提高了22.5%,治療組提高了30%,復(fù)方發(fā)酵中草藥和未發(fā)酵中草藥對(duì)嗜水氣單胞菌引起的鯽魚出血病均有明顯的預(yù)防和治療作用,但復(fù)方發(fā)酵中藥使用的效果優(yōu)于未發(fā)酵中藥。
中草藥中含有抑菌成份,其結(jié)構(gòu)類型涉及萜類、生物堿類、黃酮類、有機(jī)酸、醌類、多糖類和鞣質(zhì)等化合物,其抑菌作用機(jī)理主要是通過作用于細(xì)胞壁或細(xì)胞膜系統(tǒng),作用于細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的酶系統(tǒng)或功能蛋白及作用于遺傳物質(zhì)或遺傳微粒結(jié)構(gòu)而起作用。專家以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為指示菌,研究了32味中草藥提取物的抑菌作用,發(fā)現(xiàn)其中26種提取物對(duì)金黃色葡萄球菌具有抑制作用,23種提取物對(duì)大腸桿菌具有抑制作用,且抑菌效果在一定濃度范圍內(nèi)隨藥液濃度的增大而增強(qiáng)。中草藥經(jīng)過益生菌分解、轉(zhuǎn)化后,部分中草藥的發(fā)酵產(chǎn)物抑菌活性增加,而部分中草藥的發(fā)酵產(chǎn)物抑菌活性不變或者會(huì)降低。專家用枯草芽孢桿菌對(duì)50種中草藥進(jìn)行發(fā)酵,結(jié)果發(fā)現(xiàn)10種中草藥發(fā)酵前后抑菌活性不變,6種中草藥發(fā)酵后抑菌活性增強(qiáng),5種中草藥發(fā)酵后抑菌活性降低。分析增強(qiáng)的原因是菌體對(duì)中草藥進(jìn)行轉(zhuǎn)化產(chǎn)生了更多的抑菌活性物質(zhì),中草藥中的營養(yǎng)物質(zhì)又更有利于菌體的生長,因此益生菌和中草藥的協(xié)同作用使抑菌活性得到了增強(qiáng);活性不變的原因是益生菌在部分中草藥中不能生長,因此活性物質(zhì)未能轉(zhuǎn)化;而活性降低的原因可能是菌體將中草藥中的部分抑菌活性成分轉(zhuǎn)化為非抑菌活性成分的緣故。
部分中草藥制劑潑灑到池塘中或制成飼料添加劑投喂養(yǎng)殖魚類能改善池塘水質(zhì)。益生菌也能通過降解池塘中的有機(jī)質(zhì)來凈化水質(zhì)。專家在羅非魚飼料中添加芽孢桿菌和乳酸菌發(fā)酵的中草藥,經(jīng)過30天的飼養(yǎng),發(fā)現(xiàn)該制劑有很強(qiáng)的降低亞硝酸氮能力,但對(duì)氨氮不具備明顯的降低功效。但專家將研制的中草藥復(fù)合益生菌制劑添加到飼料中投喂凡納濱對(duì)蝦一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn),養(yǎng)殖水體pH值、氨氮和亞硝酸鹽含量較對(duì)照組都能維持相對(duì)穩(wěn)定,后期氨氮和亞硝酸鹽含量顯著低于對(duì)照組,且中草藥復(fù)合益生菌制劑對(duì)水質(zhì)的改良效果要優(yōu)于單獨(dú)使用益生菌制劑。
中國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)從40年前的改革開放開始,從模仿到創(chuàng)新,最終發(fā)展成產(chǎn)值近100億的產(chǎn)業(yè),這其中包括化學(xué)藥品、抗生素、生物制品、中草藥制劑等。中草藥制劑由于其防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病療效慢,效果不理想,因此只能做為免疫增強(qiáng)劑等預(yù)防藥物,市場份額也只占水產(chǎn)動(dòng)保產(chǎn)業(yè)的很小一部分。但隨著國家對(duì)環(huán)保監(jiān)管力度的加大,以及人們對(duì)水產(chǎn)品品質(zhì)的要求越來越高,中草藥由于其無殘留、副作用小,必是未來發(fā)展的方向,發(fā)酵中草藥制劑由于其獨(dú)特的優(yōu)勢必會(huì)得到重視并大力發(fā)展。
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