鮑 娟 陳小芳 陳軍劍 余路新
(廣東醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院,廣東 東莞523808)
醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)和血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗這兩門課程的實驗教學(xué)要用到一些正常、異常的血片和骨髓片[1],通過觀察血片、骨髓片了解各種血細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)有無異常,從而協(xié)助診斷疾病、觀察療效及判斷病情變化。隨著血液分析儀的應(yīng)用,促進了臨床檢驗工作效率的提高[2]。但是由于血液分析儀檢測工作原理和儀器操作方式的局限[3],一般僅能夠檢測出血液中細(xì)胞的體積、數(shù)目,以及白細(xì)胞占比,很難檢測出細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常,也很難檢測出有關(guān)的病理細(xì)胞,如異型淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、幼稚粒細(xì)胞等[4],診斷陽性率還比較低[5],檢測結(jié)果會存在一定誤差,這就需要實驗室進行必要的形態(tài)學(xué)復(fù)檢[6]。而細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是經(jīng)典、有效的方法,是臨床檢驗診斷工作的基礎(chǔ)和核心[7],因此,檢驗專業(yè)學(xué)生學(xué)好細(xì)胞形態(tài)檢驗是非常重要的,是走上工作崗位的必備能力,而實驗課上用的血片、骨髓片的質(zhì)量關(guān)系到學(xué)生實驗課的質(zhì)量,以及學(xué)生掌握知識的程度,是關(guān)系到學(xué)生切身利益的一個方面,也是評估教學(xué)效果重要的一環(huán),下面從幾個方面來探討如何提高血片和骨髓片的質(zhì)量。
臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)和血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗實驗課主要看正常血象、正常粒細(xì)胞系統(tǒng)與紅細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)學(xué)、正常巨核細(xì)胞系統(tǒng)及其他細(xì)胞形態(tài)學(xué)、異常血細(xì)胞形態(tài)學(xué)、血液系統(tǒng)疾病檢驗等,這兩門實驗課主要是要求學(xué)生掌握好形態(tài)學(xué),正確書寫骨髓檢查報告單,需要大量高質(zhì)量的血片、骨髓片做支撐才能保證實驗課的正常運行。
由于血片、骨髓片的特點,收集片比較困難[8],我們教學(xué)所需的血片、骨髓片是學(xué)校附院血液室提供,血液科醫(yī)生會篩選出符合實驗教學(xué)所需的片,及時通知實驗技術(shù)人員去取,這就需要實驗技術(shù)人員和血液科醫(yī)生保持密切的聯(lián)系,隨時關(guān)注留片情況,去取片時和血液室醫(yī)生的交流、學(xué)習(xí)對提高血片、骨髓片的質(zhì)量非常必要。
從醫(yī)院血液科常常一次性拿幾十張標(biāo)本,這些標(biāo)本如果不能一次性染完,就要做好保管。通常會先把拿回來的血片、骨髓片用甲醇固定,把血片、骨髓片平放在染色架上,加幾滴甲醇把片膜完全覆蓋,等甲醇揮發(fā)干,按照病種分類裝入不同的片盒,待染。
對比了瑞士染色液和瑞士-吉姆薩染色液染出的片子發(fā)現(xiàn),瑞士染色的主要優(yōu)點是染色方法簡單、省時、易于推廣,對血片染色效果還行,對骨髓片的染色效果往往不太理想,瑞士-吉姆薩染色液結(jié)合了瑞士染色液和吉姆薩染色液的優(yōu)點,染色方便,胞核、胞質(zhì)染色清晰[9,10],是實驗室用得比較多的染色液。
從醫(yī)院拿回來的標(biāo)本經(jīng)常使用簽字筆做記號,加染色后液記號容易被溶解,所以,染色前先用鉛筆在片膜上標(biāo)記好病種,防止弄混。如果染色時間過長或者染液偏堿,可用甲醇脫色后重復(fù)染色,要注意甲醇脫色時間,脫色時間長會影響細(xì)胞的染色質(zhì)量。染片時要用流水沖洗,不能先倒掉染液,以免沉渣過多,沉渣過多在鏡下會看到好多大、小顆粒沉渣覆蓋在細(xì)胞上,很影響對細(xì)胞漿、細(xì)胞核的觀察。
染片是一項瑣碎耗時的工作,要求實驗技術(shù)人員要細(xì)心、耐心,有些病種容易染色有些不容易上色,這就需要實驗技術(shù)人員要摸索染色條件,善于總結(jié),及時解決出現(xiàn)的問題,才能提供染色良好的片供教學(xué)使用。
學(xué)期末考試時每個學(xué)生2套考試片,這就需要近百套染色良好的考試片??荚嚻菍嶒灱夹g(shù)人員從顏色良好的片挑出來的,并排好號碼,每個號碼對應(yīng)相應(yīng)的病種,登記下來,并且多準(zhǔn)備了備用考試片,以備考試時學(xué)生打碎片及時替換。每次考試前實驗技術(shù)人員都會在鏡下查看考試片,遇到褪色的片及時挑出來,以免影響學(xué)生考試??荚嚱Y(jié)束之后,實驗技術(shù)人員要把考試片按照順序整理,如果有學(xué)生打破考試片,要對相應(yīng)的病種挑選染色良好的片補上,為下次考試做好準(zhǔn)備。
鑒于實驗教學(xué)用血片、骨髓片得來不易,學(xué)生上實驗課時要告誡學(xué)生愛惜片,小心拿放,減少打破血片和骨髓片造成的損失。為此,實驗室制定了懲罰制度和專門的借片登記本。每次實驗課前,學(xué)生過來實驗準(zhǔn)備室數(shù)好借的血片、骨髓片數(shù),登記在本子上,做完實驗要如數(shù)歸還,如果有打破的、丟失的,就要進行相應(yīng)的懲罰,讓學(xué)生重視歸還片,之前經(jīng)常有學(xué)生做完實驗把片落在顯微鏡上或加在書本里,歸還片時一盒少好幾張,出了懲罰制度后,學(xué)生重視歸還片,降低了人為損傷。在學(xué)期末實驗課復(fù)習(xí)時,學(xué)生借的片會比較多,就讓每個學(xué)生負(fù)責(zé)一盒片,這樣每盒片對應(yīng)一個人,就可以避免一個人借幾盒片把不同病種弄混、丟片的后果。
學(xué)生使用顯微鏡時,要首先在10倍鏡找好視野,再轉(zhuǎn)到油鏡細(xì)調(diào),不要在油鏡粗調(diào),以免壓壞片。
實驗教學(xué)用的血片、骨髓片保存過程中有褪色的情況,因此維護是必不可少的。因為學(xué)生看片要用到油鏡,經(jīng)常有片膜上鏡油沒有擦干凈,遇到這種情況,實驗技術(shù)人員應(yīng)把乙酸乙酯滴到擦鏡紙上,在片膜輕輕擦過,注意不要太大力劃破片膜,以免影響片的使用。遇到染色后儲存較久而褪色的片,由于圖片吸收空氣中的二氧化碳使細(xì)胞呈酸性改變,在復(fù)染時嗜堿性較強,染成藍(lán)色過多的結(jié)果,不適合觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu),參照方法[11]進行復(fù)染取得不錯的效果。
血片、骨髓片作為血檢實驗教學(xué)中重要的標(biāo)本,從收集、保管、染色、篩選、使用、維護每一步都很重要,實驗技術(shù)人要認(rèn)真對待每一張片,保證實驗教學(xué)片的質(zhì)量才能保證實驗教學(xué)的質(zhì)量,使學(xué)生學(xué)有所成,服務(wù)于社會。