丙泊酚調(diào)控HIF-1α表達(dá)靶向SIRT1信號通路對胰腺癌細(xì)胞增殖凋亡的影響

梁銀銀 周顯飛

[摘要] 目的 探討丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞增殖凋亡的影響，進(jìn)一步分析丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）和沉默信號調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）信號通路的影響。 方法 分別采用5 μg/ml和10 μg/ml的丙泊酚處理胰腺癌Panc-1細(xì)胞48 h，設(shè)置control組、低劑量組和高劑量組。采用CCK8檢測各組細(xì)胞的增殖能力，采用Hoechst 33258對各組細(xì)胞的凋亡指標(biāo)進(jìn)行檢測，應(yīng)用ELISA法測定各組細(xì)胞的炎癥因子水平，應(yīng)用qPCR法對SIRT1信號通路mRNA的表達(dá)水平進(jìn)行評判。 結(jié)果 與control組相比，低劑量組、高劑量組的增殖能力顯著降低（P<0.01），凋亡水平顯著升高（P<0.01）;炎癥因子IL-6（P<0.01）和IL-1β（P<0.01）水平顯著升高，凋亡相關(guān)蛋白Fas和FasL的表達(dá)顯著升高（P<0.01），Bcl-2/Bax顯著降低（P<0.01），HIF-1α mRNA的表達(dá)水平顯著升高（P<0.01），SIRT1 mRNA的表達(dá)水平顯著降低（P<0.01），HIF-1α蛋白的表達(dá)水平均顯著升高（P<0.01），SIRT1蛋白的表達(dá)水平顯著降低（P<0.01）。 結(jié)論 丙泊酚調(diào)控HIF-1α表達(dá)靶向SIRT1信號通路會促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞增殖，加速凋亡。

[關(guān)鍵詞] 胰腺癌;丙泊酚;SIRT1信號通路;增殖;凋亡

[中圖分類號] R735.9? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）04-0001-05

[Abstract] Objective To investigate the effect of propofol on proliferation and apoptosis of pancreatic cancer cells， and to further analyze the effect of propofol on hypoxia-inducible factor-1α （HIF-1α） and silencing signal regulator 1 （SIRT1） signaling pathway in pancreatic cancer cells. Methods Pancreatic cancer Panc-1 cells were treated with 5 μg/ml and 10 μg/ml propofol for 48 h， respectively. The control group， low-dose group， and high-dose group were set. CCK8 was used to detect the proliferation ability of cells in each group. Hoechst 33258 was used to detect the details of apoptotic indicators of cells in each group. ELISA was used to determine the levels of inflammatory factors in each group， and qPCR was used to evaluate the expression levels of SIRT1 signaling pathway mRNA. Results Compared with the control group， the proliferation ability of the low-dose group and the high-dose group was significantly reduced （P<0.01）; the apoptosis level was significantly increased （P<0.01）; the inflammatory factor IL-6 （P<0.01） and IL-1β （P<0.01） increased significantly; the expression of apoptosis-related proteins Fas and FasL was significantly increased （P<0.01）; Bcl-2/Bax was significantly decreased （P<0.01）; the expression level of HIF-1α mRNA was significantly increased （P<0.01）; the expression level of SIRT1 mRNA was significantly decreased （P<0.01）; the expression levels of HIF-1α protein were significantly increased （P<0.01）; and the expression level of SIRT1 protein was significantly decreased （P<0.01）. Conclusion Propofol regulating HIF-1α expression targeting the SIRT1 signaling pathway can promote the proliferation of pancreatic cancer cells and accelerate apoptosis.

[Key words] Pancreatic cancer; Propofol; SIRT1 signaling pathway; Proliferation; Apoptosis

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）是胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞DNA的異常突變導(dǎo)致的惡性腫瘤，是臨床上最常見的惡性腫瘤之一[1]。流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌的發(fā)病率呈逐年增長的趨勢，具有惡性化程度高、死亡率高的特點(diǎn)，早期的腫瘤細(xì)胞極易擴(kuò)散至淋巴結(jié)及肺、肝臟等器官，5年生存率不超過10%[2]。大多數(shù)胰腺癌患者往往因腫瘤擴(kuò)散和血管浸潤而喪失手術(shù)條件，只能采用放療、化療等手段進(jìn)行輔助治療，但效果較差，目前手術(shù)切除仍是胰腺癌患者最有效的治療手段[3]。臨床數(shù)據(jù)表明，圍術(shù)期麻醉對于腫瘤細(xì)胞的炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生較大影響，會影響腫瘤細(xì)胞的增殖和凋亡[4-5]。丙泊酚是臨床上常用的全身麻醉藥物之一，常用于多種途徑的鎮(zhèn)靜和麻醉過程，具有起效快、可控性好和代謝快的優(yōu)點(diǎn)[6]。近年來，研究者發(fā)現(xiàn)，丙泊酚與多種腫瘤的生物學(xué)效應(yīng)及預(yù)后密切相關(guān)，其通過影響腫瘤細(xì)胞內(nèi)自由基及炎癥損傷過程而調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖[7]。Chen等[8]研究發(fā)現(xiàn)，氟烷可影響乳腺癌細(xì)胞的缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）的表達(dá)，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，促進(jìn)術(shù)后腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator 1，SIRT1）是組蛋白乙?；福悄[瘤治療和診斷的靶點(diǎn)，激活SIRT1信號通路可抑制細(xì)胞的凋亡、炎癥和氧化反應(yīng)[9]。目前有關(guān)丙泊酚對SIRT1信號通路及胰腺癌細(xì)胞的調(diào)控作用研究尚少，本課題擬通過體外實(shí)驗(yàn)研究丙泊酚對SIRT1信號通路、胰腺癌細(xì)胞的常規(guī)調(diào)控水平，為胰腺癌患者手術(shù)治療的麻醉劑的選擇提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源

胰腺癌Panc-1細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫;DMEM培養(yǎng)基（Gibco公司）;胰蛋白酶（Sigma公司）;胎牛血清（Gibco公司）;丙泊酚（Sigma公司）;CCK8試劑盒（Sigma公司）;Hoechst細(xì)胞33258試劑盒（碧云天生物科技有限公司）;白細(xì)胞介素-6（IL-6）ELISA試劑盒（博士德生物科技有限公司）;白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）ELISA試劑盒（博士德生物科技有限公司）;BCA蛋白定量試劑盒（美國Invitrogen公司）;PVDF膜（Millipore公司）;Fas、FasL、Bax、Bcl-2、HIF-1α、SIRT1和GAPDH單克隆抗體（Abcam公司）;二抗（上海銀海圣生物科技有限公司）;ELC發(fā)光液（Thermo Fisher Scientifice公司）;RNA提取試劑盒（南京諾唯贊生物科技有限公司）;逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（南京諾唯贊生物科技有限公司）;應(yīng)用Life Technologies 公司生產(chǎn)的Taq Man?Micro RNA Reverse Transcription Kit試劑盒;BIO-RAD公司生產(chǎn)的酶標(biāo)儀;COSTAR公司生產(chǎn)的96孔板;COSTAR公司生產(chǎn)的6孔板;賽默飛科技有限公司生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱;德國Sartorious公司生產(chǎn)的電子天平，其他相關(guān)儀器和試劑均已在相關(guān)部分說明。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及處理? 復(fù)蘇細(xì)胞后接種于培養(yǎng)瓶中，加入含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞長至80%即可傳代。采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，設(shè)置5×104個/孔的細(xì)胞密度，將其接種于96孔板中，并向其加入適量的10%胎牛血清放入DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)。設(shè)置control組、低劑量組和高劑量組，低劑量組細(xì)胞加入5 μg/ml的丙泊酚處理細(xì)胞，高劑量組細(xì)胞加入10 μg/ml的丙泊酚處理細(xì)胞，Control組加入等量的血清進(jìn)行空白處理，置于37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，處理48 h后檢測各組細(xì)胞的生物學(xué)特性。

1.2.2 CCK8檢測細(xì)胞的增殖能力? Control組、低劑量組和高劑量組細(xì)胞經(jīng)不同濃度的丙泊酚處理48 h，采用CCK8檢測各組細(xì)胞的增殖能力，每孔加入10 μl的CCK8溶液，繼續(xù)置于37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，酶標(biāo)儀參數(shù)：450 nm，檢測各組細(xì)胞的OD值，確定細(xì)胞的增殖能力。

1.2.3 Hoechst 33258檢測細(xì)胞的凋亡水平? 采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/孔，并與6孔板連接，向其加入適量的含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中，Control組、低劑量組和高劑量組細(xì)胞經(jīng)不同濃度的丙泊酚處理48 h，采用Hoechst 33258檢測各組細(xì)胞的凋亡水平，棄去上清液，加入新鮮配置的4%多聚甲醛固定30 min，用PBS清洗3次，每孔加入50 μl的Hoechest 33258染色劑，置于室溫下避光孵育10 min。用熒光顯微鏡拍照，記錄各組細(xì)胞的狀態(tài)，計算各組細(xì)胞的凋亡水平。正常的細(xì)胞為暗藍(lán)色，細(xì)胞核中出現(xiàn)高亮的藍(lán)色則表明細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，計為凋亡細(xì)胞。

1.2.4 ELISA法檢測細(xì)胞中炎癥因子的水平? 采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/孔接種于6孔板中，加入適量的含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，Control組、低劑量組和高劑量組細(xì)胞經(jīng)不同濃度的丙泊酚處理48 h，采用ELISA法對患者各組細(xì)胞中IL-6、炎癥因子、IL-1β指標(biāo)水平實(shí)施檢測，并根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作，酶標(biāo)儀參數(shù)：450 nm，檢測細(xì)胞OD值，測定炎癥因子IL-1β、IL-6水平。

1.2.5 Western blot檢測蛋白的表達(dá)水平? 采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/孔接種于6孔板中，向其加入適量的含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中，Control組、低劑量組和高劑量組細(xì)胞經(jīng)不同濃度的丙泊酚處理48 h，棄去上清液，加入適量的RIPA裂解液裂解細(xì)胞，離心機(jī)參數(shù)：4℃、12 000 rpm，離心10 min后取上層清液，應(yīng)用BCA蛋白定量試劑盒對各組細(xì)胞的蛋白濃度進(jìn)行檢測，制備等濃度的上樣緩沖體系，95℃水浴鍋煮沸滅活，采用12%的SDS聚丙烯酰胺濃縮膠和分離膠進(jìn)行電泳，當(dāng)其進(jìn)行轉(zhuǎn)膜后可實(shí)施蛋白轉(zhuǎn)移，將其置于PVDF膜上，并新鮮配置5%脫脂奶粉，將其封閉PVDF膜中2 h，根據(jù)目的條帶的分子量大小切下目的條帶，分別于4℃條件下孵育Fas、FasL、Bax、Bcl-2、HIF-1α、SIRT1和GAPDH（抗體均采用1∶1000稀釋）過夜，用TBST洗滌蛋白條帶3次，于室溫條件下孵育辣根過氧化物酶共軛的二抗（采用1∶5000稀釋）1 h，用TBST洗滌蛋白條帶3次，暗室內(nèi)加入ECL發(fā)光液（A液與B液按1∶1混勻）后進(jìn)行顯影和定影，再將條帶掃描后利用Image J軟件進(jìn)行灰度值分析。

1.2.6 qPCR檢測相關(guān)mRNA的表達(dá)水平? 采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/孔，并與6孔板連接，向其加入適量的含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中，Control組、低劑量組和高劑量組細(xì)胞經(jīng)不同濃度的丙泊酚處理48 h，棄去上清液，加入適量的Trizol，采用RNA提取試劑盒提取各組細(xì)胞的總RNA，測定總RNA濃度和純度。按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒的操作，配置25 μl的反應(yīng)體系，逆轉(zhuǎn)錄后獲得cDNA。配置qPCR反應(yīng)體系，反應(yīng)條件為：94℃變性5 min，95℃ 30 s，63℃ 50 s，72℃ 60 s，共35個循環(huán)，以GAPDH為內(nèi)參，測定各組細(xì)胞中HIF-1α和SIRT1 mRNA的相對表達(dá)水平。引物由英濰捷基生物科技有限公司合成，序列見表1。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件（SPSS Inc.，Chicago，IL，USA）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步采用Bonferroni校正的t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。P<0.05為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞增殖的影響

采用CCK8檢測丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞增殖能力的影響，結(jié)果顯示低劑量組和高劑量組細(xì)胞的增殖能力明顯低于control組，高劑量組細(xì)胞的增殖能力明顯低于低劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見圖1。

2.2 丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞凋亡的影響

采用Hoechst 33258檢測丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞凋亡水平的影響，結(jié)果顯示高劑量組、低劑量組細(xì)胞的凋亡水平明顯高于control組，高劑量組細(xì)胞的凋亡水平明顯高于低劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見圖2。

2.3丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞炎癥因子水平的影響

采用ELISA試劑盒檢測丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞炎癥因子水平的影響，結(jié)果顯示低劑量組、高劑量組細(xì)胞IL-6與IL-1β水平均明顯高于control組，高劑量組細(xì)胞IL-6與IL-1β水平均明顯高于低劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表2。

2.4 丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)的影響

采用Western blot檢測丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果顯示低劑量組、高劑量組細(xì)胞Fas與FasL的表達(dá)水平均明顯高于control組，Bcl-2/Bax明顯低于control組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;高劑量組細(xì)胞Fas與FasL的表達(dá)水平均明顯高于低劑量組，Bcl-2/Bax明顯低于低劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見圖3。

2.5 丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞SIRT1信號通路的影響

分別采用qPCR和Western blot檢測丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞SIRT1信號通路的影響，結(jié)果顯示兩種檢測方法結(jié)果一致。低劑量組、高劑量組細(xì)胞HIF-1α mRNA與蛋白的表達(dá)水平均明顯高于control組，SIRT1 mRNA與蛋白的表達(dá)水平均明顯低于control組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;高劑量組細(xì)胞HIF-1α mRNA與蛋白的表達(dá)水平均明顯高于低劑量組，SIRT1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平均顯著低于低劑量組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見圖4～5。

3討論

胰腺癌是惡性化程度很高的腫瘤之一，具有侵襲性強(qiáng)、進(jìn)展快的特點(diǎn)，對多種化療藥物不敏感，故手術(shù)切除是目前早期胰腺癌患者最常用的治療手段[10]。胰腺癌圍術(shù)期會受到多種因素影響，產(chǎn)生免疫、內(nèi)分泌系統(tǒng)功能異常，導(dǎo)致腫瘤擴(kuò)散，對患者的預(yù)后產(chǎn)生影響。研究表明，不同麻醉藥物會對腫瘤細(xì)胞的惡性潛在性能產(chǎn)生影響。丙泊酚屬于臨床常見的靜脈麻醉藥。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚能夠?qū)崿F(xiàn)胰腺癌細(xì)胞的惡性潛能抑制。程序性死亡因子、程序性死亡配體屬于一對免疫共刺激分子，二者均參與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。

臨床研究表明，胰腺癌組織的高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況存在一定聯(lián)系，影響患者的預(yù)后。相關(guān)實(shí)驗(yàn)證明，胰腺癌細(xì)胞的高表達(dá)能夠有效實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖，PD-Ll低表達(dá)能夠有效抑制胰腺癌種植瘤的生長。

Carmicheal等[10]研究發(fā)現(xiàn)，麻醉劑可參與腫瘤細(xì)胞的病理和生理過程，影響血管生成，介導(dǎo)細(xì)胞的增殖和凋亡過程。本研究采用體外實(shí)驗(yàn)研究丙泊酚對胰腺癌細(xì)胞Panc-1增殖和凋亡的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，5 μg/ml和10 μg/ml的丙泊酚處理胰腺癌Panc-1細(xì)胞48 h可導(dǎo)致細(xì)胞的增殖能力顯著降低，凋亡水平顯著增加，且具有劑量依賴性，高濃度的丙泊酚更能有效抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，丙泊酚可顯著增加胰腺癌細(xì)胞中凋亡蛋白Fas與FasL的表達(dá)，降低Bcl-2/Bax的表達(dá)。FasL為Fas的配體，均屬于腫瘤壞死因子家族的細(xì)胞表面受體，細(xì)胞內(nèi)Fas與FasL的表達(dá)水平增加，其相互作用可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡;Bcl-2是抗凋亡家族成員，可通過抑制細(xì)胞內(nèi)線粒體凋亡過程而降低細(xì)胞的凋亡，臨床上常采用Bcl-2/Bax評價腫瘤的凋亡水平[11-12]。激活腫瘤細(xì)胞凋亡途徑可誘導(dǎo)細(xì)胞釋放大量的炎癥因子，嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)可進(jìn)一步激活細(xì)胞自噬過程，進(jìn)一步損傷細(xì)胞[13]。本研究結(jié)果顯示，丙泊酚可顯著增加胰腺癌細(xì)胞內(nèi)炎癥因子IL-6與IL-1β的水平。

低氧誘導(dǎo)處理可導(dǎo)致缺氧誘導(dǎo)因子-1廣泛存在于人體和哺乳動物體內(nèi)，是參與細(xì)胞內(nèi)氧代謝調(diào)控的重要細(xì)胞調(diào)節(jié)因子，由120 kD的α亞基和91～94 kD的β亞基組成的異源二聚體[14-20]。本研究結(jié)果表明，丙泊酚可抑制胰腺癌細(xì)胞SIRT信號通路，顯著降低胰腺癌細(xì)胞中SIRT1 mRNA和蛋白的表達(dá)。

綜上所述，丙泊酚通過激活胰腺癌細(xì)胞中HIF-1α的表達(dá)，進(jìn)而靶向抑制SIRT1信號通路，增加細(xì)胞內(nèi)炎癥因子釋放，增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白的表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖，該研究結(jié)果為臨床上胰腺癌患者手術(shù)過程中選擇合適的麻醉劑提供理論依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Ducreux M，Seufferlein T，Van Laethem JL，et al.Systemic treatment of pancreatic cancer revisited[J].Semin Oncol，2019，46（1）：28-38.

[2] Li S，Xu HX，Wu CT，et al.Angiogenesis in pancreatic cancer：Current research status and clinical implications[J].Angiogenesis，2019，22（1）：15-36.

[3] Goggins M，Overbeek KA，Brand R，et al.Management of patients with increased risk for familial pancreatic cancer：Updated recommendations from the International Cancer of the Pancreas Screening（CAPS）Consortium[J].Lancet，2020，69（1）：2008-2020.

[4] Kim R.Effects of surgery and anesthetic choice on immunosuppression and cancer recurrence[J].J Transl Med，2018，16（1）：8.

[5] Eden C，Esses G，Katz D，et al.Effects of anesthetic interventions on breast cancer behavior，cancer-related patient outcomes，and postoperative recovery[J].Surg Oncol，2018，27（2）：266-274.

[6] Hausburg MA，Banton KL，Roman PE，et al.Effects of propofol on ischemia-reperfusion and traumatic brain injury[J].J Crit Care，2020，56（3）：281-287.

[7] Gao X，Mi Y，Guo N，et al.The mechanism of propofol in cancer development：An updated review[J].Asia Pac J Clin Oncol，2020，16（2）：e3-e11.

[8] Chen F，Chen J，Yang L，et al.Extracellular vesicle-packaged HIF-1α-stabilizing lncRNA from tumour-associated macrophages regulates aerobic glycolysis of breast cancer cells[J].Nat Cell Biol，2019，21（4）：498-510.

[9] 吳大平，徐璐，吳煥，等.miR-150-5p靶向SIRT1提高肝癌細(xì)胞系HepG2放療敏感性[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2020，3（6）：321-327.

[10] Carmicheal J，Patel A，Dalal V，et al.Elevating pancreatic cystic lesion stratification：Current and future pancreatic cancer biomarker（s）[J].Biochim Biophys Acta Rev Cancer，2020，1873（1）：188 318.

[11] Dan J，Gong X，Li D，et al.Inhibition of gastric cancer by local anesthetic bupivacaine through multiple mechanisms independent of sodium channel blockade[J].Biomed Pharmacother，2018，103（2）：823-828.

[12] Zhu Y，Yin X，Li J，et al.Overexpression of microRNA-204-5p alleviates renal ischemia-reperfusion injury in mice through blockage of Fas/FasL pathway[J].Exp Cell Res，2019，381（2）：208-214.

[13] Han M，Hu R，Ma J，et al.Fas signaling in dendritic cells mediates Th2 polarization in HDM-induced allergic pulmonary inflammation[J].Front Immunol，2018，21（3）：3045-3053.

[14] 樂韻，張夏炎，李凱.秦皮乙素通過HIF-1α調(diào)控乏氧微環(huán)境中三陰性乳腺癌細(xì)胞干性[J].中國新藥與臨床雜志，2020，9（7）：558-563.

[15] Zhang W，Zhou X，Yao Q，et al.HIF-1-mediated production of exosomes during hypoxia is protective in renal tubular cells[J].Am J Physiol Renal Physiol，2017，313（4）：F906-F913.

[16] Okamoto A，Sumi C，Tanaka H，et al.HIF-1-mediated suppression of mitochondria electron transport chain function confers resistance to lidocaine-induced cell death[J].Sci Rep，2017，7（1）：3816.

[17] Song WW，Gui AP，Li W，et al.Expressions of HIF-1alpha and KISS-1 in patients with liver cancer and correlation analysis[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（18）：4058-4063.

[18] Kaiser A，Krüger T，Eiselt G，et al.Identification of PARP-1，histone H1 and SIRT-1 as new regulators of breast cancer-related aromatase promoter Ⅰ.3/Ⅱ[J].Cells，2020，9（2）：427-438.

[19] Joo HY，Yun M，Jeong J，et al.SIRT1 deacetylates and stabilizes hypoxia-inducible factor-1alpha（HIF-1alpha）via direct interactions during hypoxia[J].Biochem Biophys Res Commun，2015，462（4）：294-300.

[20] Li C，Liu Z，Yang K，et al.miR-133b inhibits glioma cell proliferation and invasion by targeting Sirt1[J].Oncotarget，2016，7（24）：36 247-36 256.

（收稿日期：2021-01-20）