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      不同類型慢性乙型肝炎患者Th細(xì)胞相關(guān)因子及血清ADA表達(dá)的臨床意義

      2022-04-02 16:10:48孫娜
      關(guān)鍵詞:慢性乙型肝炎

      孫娜

      【摘要】 目的:探討不同類型慢性乙型肝炎患者Th細(xì)胞相關(guān)因子及血清腺苷脫氨酶(adenosine deaminase,ADA)表達(dá)的臨床意義。方法:選取荊州市第二人民醫(yī)院2019年1月-2021年1月收治的90例乙型肝炎病毒感染相關(guān)疾病患者作為試驗組,同期選擇90例健康體檢者作為對照組。比較兩組的Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)及乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBV-DNA)水平。隨后將試驗組按照疾病不同分為A組(24例,慢性乙型肝炎病毒攜帶者)、B組(46例,慢性乙型肝炎)、C組(20例,慢性乙型肝炎伴肝硬化),再將B組分為B1組(17例,B基因型)、B2組(29例,C基因型),比較組間的上述指標(biāo)水平,并分析慢性乙型肝炎患者的HBV-DNA與Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果:試驗組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4、IL-10、ADA表達(dá)水平均較對照組高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A組、B組、C組IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4、IL-10、ADA表達(dá)水平相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A組與B、C組的HBV-DNA水平相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);但B組與C組的HBV-DNA水平相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。B1組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-10、ADA及HBV-DNA水平均較B2組低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);IL-4水平較B2組高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)直線相關(guān)性分析,慢性乙型肝炎患者的HBV-DNA與IL-4呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),與IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、ADA均呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論:乙型肝炎病毒感染者存在Th細(xì)胞相關(guān)因子異常情況;其血清ADA表達(dá)水平越高,提示患者的病情越重,臨床需做好相關(guān)防治措施。另外,上述指標(biāo)有利于判斷慢性乙型肝炎患者基因型的不同。

      【關(guān)鍵詞】 慢性乙型肝炎 腺苷脫氨酶 Th細(xì)胞相關(guān)因子

      Clinical Significance of Th Cell Related Factors and Serum ADA Expression in Patients with Different Types of Chronic Hepatitis B/SUN Na. //Medical Innovation of China, 2022, 19(08): 046-050

      [Abstract] Objective: To explore the clinical significance of Th cell-related factors and serum adenosine deaminase (ADA) expression in patients with different types of chronic hepatitis B. Method: A total of 90 patients with hepatitis B virus infection-related diseases admitted in the Second Hospital of Jingzhou from January 2019 to January 2021 were selected as the experimental group, and 90 healthy subjects were selected as the control group during the same period. Th cell related factors, serum ADA expression and hepatitis B virus DNA (HBV-DNA) levels were compared between the two groups. The experimental group was divided into 3 groups according to different diseases: group A (24 cases, chronic hepatitis B virus carriers), group B (46 cases, chronic hepatitis B), and group C (20 cases, chronic hepatitis B with cirrhosis), group B was divided into group B1 (17 cases, B genotype) and group B2 (29 cases, C genotype), the levels of the above indicators between the groups were compared, the correlation between HBV-DNA and Th cell related factors, serum ADA expression in patients with chronic hepatitis B were analyzed. Result: The levels of IFN-γ, Th1/Th2, IL-2, IL-4, IL-10 and ADA in the experimental group were higher than those in the control group, the differences were statistically significant (P<0.05). The expression levels of IFN-γ, Th1/Th2, IL-2, IL-4, IL-10 and ADA in group A, B and C were significantly different (P<0.05). HBV-DNA level in group A was significantly different from those in group B and C (P<0.05); however, there was no significant difference in HBV-DNA level between group B and group C (P>0.05). IFN-γ, Th1/Th2, IL-2,

      IL-10, ADA expression and HBV-DNA levels in B1 group were lower than those of B2 group, the differences were statistically significant (P<0.05); IL-4 level was higher than that of B2 group, the difference was statistically significant (P<0.05). After linear correlation analysis, HBV-DNA and IL-4 of patients with chronic hepatitis B was negatively correlated (P<0.05), while HBV-DNA were positively correlated with IFN-γ, Th1/Th2, IL-2, and ADA (P<0.05). Conclusion: Patients with hepatitis B virus infection have abnormalities in Th cell-related factors; the higher the level of serum ADA expression, the more severe the patient’s condition, and relevant prevention and treatment measures need to be taken clinically. In addition, the above indicators are helpful for judging the different genotypes of patients with chronic hepatitis B.

      [Key words] Chronic hepatitis B ADA Th cell related factors

      First-author’s address: The Second Hospital of Jingzhou, Hubei Province, Jingzhou 434000, China

      doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2022.08.011

      乙型肝炎具有反復(fù)發(fā)作、病情復(fù)雜、治愈難度大等特點(diǎn),在國內(nèi)其病毒總感染率約達(dá)60%[1],長期感染下會反復(fù)作用患者的肝臟病灶部位,導(dǎo)致其肝細(xì)胞凋亡、肝臟持續(xù)纖維化增生,從而引起肝硬化,目前是一種嚴(yán)重威脅人類健康的傳染性疾病,引起臨床廣泛關(guān)注。乙型肝炎病毒的發(fā)病機(jī)制可從機(jī)體、病毒兩方面進(jìn)行研究,前者主要探索機(jī)體的病毒清除機(jī)制,后者則包括基因表達(dá)及相關(guān)影響因素,文獻(xiàn)[2]研究認(rèn)為,探討不同基因型乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBV-DNA)能夠深入了解乙肝的發(fā)病機(jī)制,進(jìn)而確保臨床治療的精準(zhǔn)性。近年來基礎(chǔ)免疫性研究的熱點(diǎn)之一即為Th細(xì)胞的功能性分化,文獻(xiàn)[3]研究顯示,Th1/Th2平衡失調(diào)與病毒、細(xì)菌等感染的發(fā)生存在明顯聯(lián)系。另外,文獻(xiàn)[4]研究表示血清腺苷脫氨酶(adenosine deaminase,ADA)是一種可反映肝損傷的肝細(xì)胞胞漿酶,與機(jī)體細(xì)胞免疫活性存在相關(guān)性,但現(xiàn)階段有關(guān)于上述兩種指標(biāo)對于不同基因型慢性乙型肝炎患者的臨床意義研究較少,故筆者做如下闡述。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 選取荊州市第二人民醫(yī)院2019年1月-2021年1月收治的90例乙型肝炎病毒感染相關(guān)疾病患者作為試驗組,同期選擇90例健康體檢者作為對照組。試驗組納入標(biāo)準(zhǔn):年齡>18歲;臨床資料完整;無甲亢類合并癥或糖尿病者。排除標(biāo)準(zhǔn):血清免疫學(xué)證實存在TTV病毒感染、巨細(xì)胞病毒及EB病毒者;合并酒精性肝炎、藥物性肝損害者;合并酒精性肝炎、藥物性肝損害者;嚴(yán)重免疫功能紊亂性疾病者。對照組納入標(biāo)準(zhǔn):年齡>18歲;1年內(nèi)未進(jìn)行過抗病毒治療或應(yīng)用過免疫調(diào)節(jié)劑。排除標(biāo)準(zhǔn):依從性差。研究對象均已完成知情同意書的簽署流程,且本研究由倫理委員會審核通過。

      1.2 方法 收集180例納入對象性別、年齡、飲酒史、吸煙史等基線資料。ADA檢測:于研究對象晨起空腹時取3 mL靜脈血,做好血清分離、冰箱冷存等工作,采用全自動生化分析儀(生產(chǎn)廠家:克勒格瓦尼分析儀器有限公司,型號:OLYMPUS AU640)及相應(yīng)試劑盒(由上海研生生化試劑有限公司提供)完成檢測。HBV-DNA檢測:于無菌離心管注入2 mL空腹血清標(biāo)本,離心步驟完成,隨后在另一無菌離心管中轉(zhuǎn)入200 μL血清樣本,期間需融入等量DNA濃縮液行有效混合,再做好離心、靜置分層處理,留取沉淀后再納入提取液,得到混合液樣本后加入反應(yīng)板(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))中,采用基因擴(kuò)增儀(生產(chǎn)廠家:Applied Biosystem公司,型號:AB7500)及相應(yīng)試劑(由廣州達(dá)健生物科技有限公司提供)完成檢測。Th細(xì)胞相關(guān)因子檢測:空腹靜脈血采集、離心及血清分離等步驟完成,由第一軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部生物醫(yī)學(xué)診斷研究中心提供HBV基因分型微板,并采用購自上海貝西科技發(fā)展有限公司提供的定量酶免疫試劑盒完成γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白細(xì)胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平的檢測。

      1.3 觀察指標(biāo) 比較試驗組和對照組的Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)及HBV-DNA水平。隨后按照疾病不同將試驗組分組:24例慢性乙型肝炎病毒攜帶者設(shè)為A組,46例慢性乙型肝炎(包括17例B基因型與29例C基因型)設(shè)為B組,20例慢性乙型肝炎伴肝硬化設(shè)為C組,再將B組分為B1組(B基因型)、B2組(C基因型),比較組間的上述指標(biāo)水平,并分析慢性乙型肝炎患者的HBV-DNA與Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)的相關(guān)性。

      1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 由SPSS 20.0軟件處理,計量資料采用t檢驗,重復(fù)測量資料以F檢驗,組間兩兩對比采用SNK檢驗,用(x±s)表現(xiàn);計數(shù)資料采用字2檢驗,以率(%)表現(xiàn);直線相關(guān)分析法(Pearson)用于變量間相關(guān)性的分析。α=0.05為檢驗水準(zhǔn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 兩組一般資料比較 兩組一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性,見表1。

      2.2 兩組Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)比較 試驗組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4、IL-10、ADA表達(dá)水平均較對照組高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

      2.3 試驗組間Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)及HBV-DNA比較 三組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4、IL-10、ADA表達(dá)水平相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。試驗組的HBV-DAN為(4.33±0.45)log10 IU/mL。A組與B、C組的HBV-DNA水平相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);但B與C組的HBV-DNA水平相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

      2.4 B組間Th細(xì)胞相關(guān)因子、血清ADA表達(dá)及HBV-DNA比較 B1組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-10、ADA表達(dá)及HBV-DNA水平均較B2組低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);其IL-4水平較B2組高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

      2.5 相關(guān)性分析 經(jīng)直線相關(guān)性分析,慢性乙型肝炎患者的HBV-DNA與IL-4呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),與IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、ADA均呈正相關(guān)(P<0.05),與IL-10無相關(guān)性(P>0.05),見表5。

      3 討論

      乙型肝炎易復(fù)發(fā),且病程長,目前全球約有4億乙型肝炎病毒感染者,其中亞太地區(qū)占75%[5],臨床通常認(rèn)為該病的主要發(fā)病機(jī)制及病理損傷為免疫系統(tǒng)功能紊亂。Penna等[6]學(xué)者發(fā)現(xiàn)Th1細(xì)胞應(yīng)答在急性自限性乙型肝炎患者中占據(jù)主導(dǎo)地位,其誘導(dǎo)分化可反映肝組織病理損傷與病毒清除情況;而Th2細(xì)胞的誘導(dǎo)分化則可對Th1細(xì)胞分化進(jìn)行一定抑制,避免其應(yīng)答過度所致的病理損傷,且能夠促使乙型肝炎病毒感染的慢性化。雖文獻(xiàn)[7]報道Th細(xì)胞分化在慢性乙肝患者體內(nèi)的作用,但針對該病不同基因型患者免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)評價的相關(guān)調(diào)查較少。除此之外,ADA也與人體細(xì)胞免疫系統(tǒng)存在關(guān)聯(lián),ADA是一種可反映患者肝纖維化、肝細(xì)胞損害的核酸代謝酶[8],肝細(xì)胞內(nèi)的ADA可在肝細(xì)胞受損時迅速進(jìn)入血液,進(jìn)而造成ADA(血清中)活性上升,但鮮有研究分析該指標(biāo)在慢性乙型肝炎不同基因型患者中的作用。

      臨床上,抗原遞呈細(xì)胞(特異性)遞呈抗原后會對T細(xì)胞前體進(jìn)行相應(yīng)誘導(dǎo)[9-10],逐漸分化為兩種亞型,包括Th0A、Th0B兩種,前者可分泌IL-2、IL-4,后者則能夠分泌IFN-γ、IL-2及IL-4[11-12]。由此也看出IL-4在Th0細(xì)胞發(fā)展中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。而IFN-γ、IL-2等指標(biāo)在控制Th細(xì)胞亞群平衡過程中起到輔助效果[13],Th1細(xì)胞可通過上述指標(biāo)水平的上升(旁分泌及自分泌)而增殖[14],導(dǎo)致Th0細(xì)胞逐漸向Th1細(xì)胞的方向分化。另外,維持正常免疫功能的重要因素之一即為Th1/Th2應(yīng)答間的平衡[15],Th1細(xì)胞的誘導(dǎo)分化與肝組織病理損傷、病毒清除均有關(guān);而其細(xì)胞因子的產(chǎn)生也會相應(yīng)增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能[16-17],提高巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞及細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的活性,會導(dǎo)致肝組織的炎癥損傷更為嚴(yán)重[18]。本次研究中,A、B、C三組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4水平相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),提示上述指標(biāo)可有效區(qū)分不同的乙型肝炎病毒感染相關(guān)疾病;而在B1組、B2組的IFN-γ、Th1/Th2、IL-2、IL-4水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),則提示上述指標(biāo)還能夠區(qū)別不同基因型的慢性乙型肝炎患者,也可說明C型患者體內(nèi)的Th1細(xì)胞優(yōu)勢應(yīng)答,其肝臟損傷更難控制,整體預(yù)后狀況不佳。

      文獻(xiàn)[19]研究發(fā)現(xiàn)ADA不但可在肝膽疾病鑒別診斷中發(fā)揮作用,還能夠作用于核糖核酸1。核糖核酸1可于肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中對乙型肝炎病毒的基因復(fù)制行有效刺激,通過刺激核糖核酸結(jié)合區(qū)與編輯區(qū)的方式可促進(jìn)HBV-DNA的復(fù)制[20];另外也可通過提高miRNA-122(肝細(xì)胞)水平的方式對HBV病毒感染產(chǎn)生一定預(yù)防作用[21]。本次研究也發(fā)現(xiàn)ADA與HBV-DNA呈正相關(guān),基于此可知其能夠用于反映慢性乙型肝炎的病情狀況。

      綜上所述,慢性乙型肝炎病毒攜帶者、慢性乙型肝炎、慢性乙型肝炎伴肝硬化三種疾病患者可采用Th細(xì)胞相關(guān)因子及血清ADA表達(dá)進(jìn)行區(qū)分,依靠上述指標(biāo)還可分析乙型肝炎病毒的發(fā)病機(jī)制及病情狀況,了解其基因分型,盡早做好相關(guān)防治工作,值得臨床借鑒。本次研究仍存在納入病例少、隨訪時間短等不足之處,還需進(jìn)一步相關(guān)研究,盡可能保障患者的臨床安全。

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      (收稿日期:2021-09-07) (本文編輯:張爽)

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