鄭瑞蓮 金 晶 魏 云 陳媛媛 胡文江*

1.新疆軍區(qū)總醫(yī)院北京路醫(yī)療區(qū)(烏魯木齊，830013)；2.中國人民解放軍61150部隊

卵巢癌是婦科腫瘤，患者早期發(fā)病癥狀不明顯易被忽視，導(dǎo)致60%～70%患者初診時已進(jìn)展為III-IV期[1]。研究表明[2]卵巢癌晚期術(shù)后治療5年內(nèi)生存率不足30%，而卵巢癌I期患者5年內(nèi)生存率可高于50%。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是卵巢癌的重要轉(zhuǎn)移途徑，與卵巢癌預(yù)后差有一定關(guān)系。因此，診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有重要意義。超聲造影能夠反映組織血流灌注情況，從而對心、肝、腎及婦科疾病進(jìn)行診斷[3]。沉默信息調(diào)控子1(STRT1)是一種依賴型組蛋白去乙酰化酶，與細(xì)胞的增殖、凋亡、衰老、炎癥等有關(guān)，參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4]。高遷移率蛋白1(HMGB1)是一種非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移有關(guān)。研究表明STRT1、HMGB1可作為胃癌、非小細(xì)胞肺癌等潛在生物標(biāo)志物[5-6]。本研究通過對卵巢癌患者進(jìn)行超聲造影分析，結(jié)合其血清SIRT1、HMGB1水平，為診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移提供新的可能方法。

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月-2019年12月在本院確診的卵巢癌患者96例(卵巢癌組)，年齡(53.2±8.8)歲(37～74歲)，世界衛(wèi)生組織2014組織病理學(xué)分類為漿液性腺癌58例，粘液性腺癌27例，子宮內(nèi)膜樣腺癌7例，其他類型腫瘤4例；根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)病理分期為Ⅰ～Ⅱ期37例，Ⅲ～Ⅳ期59例；根據(jù)是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移54例。選取同期在本院健康體檢的卵巢正常女性96例為對照組，年齡與卵巢癌組匹配(54.2±9.4)歲(35～75歲)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①卵巢癌經(jīng)病理組織學(xué)確診；②在本院行超聲造影分析；③未進(jìn)行化療或使用免疫抑制藥物；④簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有嚴(yán)重系統(tǒng)性疾??；②心肝腎功能不全；③合并其他惡性腫瘤。本研究經(jīng)本院倫理委員會審批。

1.2 主要試劑及儀器

SIRT1、HMGB1酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(SEE912Hu、SEA399Hu)均購自于武漢云克隆科技股份有限公司，GE E9彩色超聲診斷儀購自于通用電氣(中國)有限公司，聲諾維(Sono Vue)超聲造影劑購自于意大利Bracco公司。

1.3 研究方法

1.3.1血液樣品采集卵巢癌患者入院24h內(nèi)、健康體檢者于體檢時，采集兩組外周靜脈血離心取上清液，-80℃保存。

1.3.2超聲診斷GE E9彩色超聲診斷儀，探頭頻率3.5MHz。首先行常規(guī)超聲檢查，確定卵巢癌變位置、形態(tài)、體積；行腹超聲造影檢查，造影劑+5ml生理鹽水，振蕩溶解形成造影劑混懸液，肘靜脈推注2～2.4ml，同時啟動計數(shù)器并存儲動態(tài)圖像，Qontrast超聲造影軟件定量分析獲取到達(dá)時間、達(dá)峰時間、灌注時間、增強強度、基礎(chǔ)強度等參數(shù)。

1.3.3血清SIRT1、HMGB1檢測酶聯(lián)免疫吸附試驗雙抗體夾心法檢測血清SIRT1、HMGB1水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 超聲造影定量參數(shù)比較

與對照組比較，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組造影劑到達(dá)時間、灌注時間無差異(P>0.05)，達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度降低，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組增強強度升高(均P<0.05)；與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度降低(P<0.05)。見表1。

表1 各組超聲造影定量參數(shù)比較

2.2 血清SIRT1、HMGB1水平比較

對照組、非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清SIRT1水平逐漸降低，血清HMGB1水平逐漸升高(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清SIRT1、HMGB1水平比較

2.3 超聲造影定量參數(shù)與血清SIRT1、HMGB1診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移價值

ROC曲線結(jié)果顯示，超聲造影參數(shù)達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度，以及血清SIRT1、HMGB1水平診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有一定價值，各指標(biāo)聯(lián)合診斷的曲線下面積(AUC)最大，診斷效能最佳。見表3。

表3 各指標(biāo)診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移效能

2.4 卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移危險因素分析

將是否發(fā)生卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作為因變量，以超聲造影參數(shù)、血清SIRT1、HMGB1水平作為自變量行多因素logistic回歸分析。結(jié)果表明，達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度、HMGB1高是卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險因素，血清SIRT1高是卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的保護因素。見表4。

表4 影響卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的多因素分析

3 討論

卵巢癌是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，發(fā)病率高且預(yù)后較差，晚期卵巢癌患者生存率遠(yuǎn)低于早期患者。超聲造影技術(shù)能夠?qū)M織血流灌注情況進(jìn)行觀察，從而對疾病進(jìn)行診斷。毛楓等[7]研究表明相對于常規(guī)超聲，超聲造影對隱匿性肝癌有較高檢出率；梁麗萍等[8]研究表明超聲造影定量參數(shù)中峰值強度可以作為甲狀腺良惡性小結(jié)節(jié)的重要參考指標(biāo)。利用超聲造影等對卵巢癌篩查，還可動態(tài)監(jiān)測疾病發(fā)展。本研究結(jié)果表明，與對照組比較，卵巢癌組超聲造影參數(shù)達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度均降低；與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度更低。ROC曲線結(jié)果顯示，超聲造影參數(shù)達(dá)峰時間、基礎(chǔ)強度對診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定價值，提示可通過超聲造影對卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行初步篩查，可能會避免卵巢癌因延誤治療而進(jìn)一步惡化。

SIRT1能夠通過乙酰化調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄以及靶蛋白活性，是各種代謝和病理生理過程的關(guān)鍵因子。研究表明SIRT1能夠參與脂肪酸氧化、胰島素分泌和葡萄糖代謝等生理活動，與2型糖尿病、心血管疾病及代謝綜合征有關(guān)[9-11]；還可參與細(xì)胞的自噬、衰老、凋亡和增殖等過程，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)[12-13]。Chung等[14]研究表明SIRT1表達(dá)與三陰性乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌組血清SIRT1水平降低，且卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組水平低于非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示SIRT1可能參與了卵巢癌的發(fā)病，并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系；ROC曲線分析表明，血清SIRT1對卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定診斷價值，且是卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的保護因素，提示血清SIRT1可能參與了卵巢癌的發(fā)生及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，是診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的潛在生物標(biāo)志物。

HMGB1是一種非組蛋白染色質(zhì)相關(guān)的核蛋白，不僅與DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、重組有關(guān)，與免疫活性細(xì)胞的激活有一定關(guān)系[15]。研究表明HMGB1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，可抑制腫瘤發(fā)生，也可通過促進(jìn)腫瘤血管生成、抑制腫瘤凋亡等引起腫瘤的發(fā)生發(fā)展，與胃癌、前列腺癌、非小細(xì)胞肺癌等有關(guān)[16-18]。柯慧慧等[19]研究表明，HMGB1在卵巢癌組織中表達(dá)顯著高于卵巢囊腫組織。本研究結(jié)果表明，卵巢癌患者血清HMGB1水平高于對照組，且卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組水平高于非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示HMGB1可能參與了卵巢癌的發(fā)病，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也有一定關(guān)系；ROC曲線分析表明，血清HMGB1對卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定診斷價值，并且是卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險因素，提示血清HMGB1可能參與了卵巢癌的發(fā)生及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，是診斷卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能潛在生物標(biāo)志物。

目前，超聲造影在疾病診斷中的應(yīng)用越來越廣，本研究結(jié)果表明超聲造影、血清SIRT1、HMGB1水平對卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有一定診斷價值，而聯(lián)合診斷價值最高，提示臨床加以關(guān)注與研究。

綜上所述，超聲造影參數(shù)與血清SIRT1、HMGB1均對卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定診斷價值，聯(lián)合診斷效能最佳；患者血清SIRT1、HMGB1可能參與了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展，具體機制有待進(jìn)一步研究。