自身免疫性肝病相關(guān)自身免疫性肝病抗體譜的檢測(cè)及臨床意義研究

渠 晶

(滕州市中心人民醫(yī)院 山東 棗莊 277599)

自身免疫性肝病主要因自身免疫系統(tǒng)發(fā)生異常進(jìn)而導(dǎo)致肝膽損傷，引發(fā)系列疾病，臨床癥狀主要表現(xiàn)為乏力、嗜睡、黃疸、食欲降低、腹脹等，目前無完全治愈案例，但可通過相關(guān)治療進(jìn)行緩解[1-3]。經(jīng)相關(guān)研究表明，肝病類型的不同和病理特征自身免疫性肝病的特點(diǎn)各不相同，而單一的診斷結(jié)果并不能作為判斷病情的依據(jù)[4]。而采用ALD抗體譜檢測(cè)效果更為顯著，同時(shí)也為了更加確定自身免疫性肝病采用抗體譜檢測(cè)對(duì)免疫肝病的診斷價(jià)值，本文主要探討自身免疫性肝病患者通過分析其臨床資料，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2020年1月～2021年12月本院收治的180例自身免疫性肝病患者為研究對(duì)象，同時(shí)并收集60例健康體檢人群作為對(duì)比，其中自身免疫性疾病的類型主要包括AIH(自身免疫性肝炎)60例為AIH組、PBC(原發(fā)性膽汁性肝病)60例為PBC組、PSC(原發(fā)性硬化膽管病)60例為PSC組，其中AIH組患者中男性和女性分別占38例、22例，年齡為23～64歲，平均年齡為(45.68±5.88)歲，PBC組患者中男性和女性分別占35例、25例，年齡為22～65歲，平均年齡為(46.05±5.62)歲，PSC組中男性和女性分別占36例、24例，年齡為22～66歲，平均年齡為(45.43±5.71)歲；健康體檢組男性和女性分別占34例、26例，年齡為23～67歲，平均年齡為(44.82±5.43)歲；納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合《自身免疫性肝病基礎(chǔ)與臨床》[5]對(duì)所有自身免疫性肝炎疾病的診斷依據(jù)；所有患者均自愿參與研究；依從性良好；排除標(biāo)準(zhǔn)：患者伴有其它肝臟疾病，如肝腫瘤、酒精肝硬化等；精神障礙疾病。四組患者的性別、年齡等臨床資料對(duì)比無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

所有患者均在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取3ml靜脈血，保存于真空采血管中，并作離心分離，分離速度為每分鐘3000r，時(shí)間為10min，并將分離出的血清放置于冰箱中，冰箱的溫度設(shè)定為20℃。本次研究中所有抗體譜免疫球蛋白試劑盒均由同一公司生產(chǎn)的，且所有檢測(cè)流程均按照試劑盒步驟完成。

1.2.1間接免疫熒光法檢測(cè)

間接免疫熒光技術(shù)的應(yīng)用主要用來檢測(cè)ANA(血清抗核抗體)、AMA(抗線粒體抗體)、SMA(抗平滑肌抗體)，間接免疫熒光法以Hep-2細(xì)胞作為細(xì)胞基質(zhì)片并提供抗原來源，將其與大鼠胃基質(zhì)的冰凍生物薄片以1：100的比例進(jìn)行血清配比，并將兩種基質(zhì)均溫水中浸泡30min，洗滌干凈后將羊抗人血清IgG放入后再持續(xù)30min進(jìn)行洗片和封片，并在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。判斷ANA或AMA的陽(yáng)性依據(jù)主要觀察組織或細(xì)胞內(nèi)是否出現(xiàn)特異性黃綠色熒光，若存在黃綠色熒光則表示為陽(yáng)性。

1.2.2免疫印跡法檢測(cè)

免疫印跡法主要是以高分辨率凝膠和免疫化學(xué)技術(shù)相結(jié)合的一種雜交技術(shù)，主要可用來檢測(cè)SLA/LP(抗可溶性肝抗原、肝胰抗原)、LKM-Ⅰ型，其中將五種不同的相對(duì)分子質(zhì)量采用AMA-M2亞型抗原做標(biāo)本。其比例可依據(jù)1：50，將30μl和1.5ml稀釋液進(jìn)行混合，并觀察膜的反應(yīng)情況；振蕩孵育可在常溫下進(jìn)行，持續(xù)時(shí)間為1h，清洗膜后將抗人IgG滴入，在常溫下晃動(dòng)1h進(jìn)行洗膜，可在NBT/BC IP上顯色10min以蒸餾水下結(jié)束反應(yīng)。陽(yáng)性判斷的標(biāo)準(zhǔn)可根據(jù)對(duì)照條帶圖對(duì)比，若特定區(qū)域顯示顏色或顏色較為清晰則為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1所有受檢者的血清ANA，AMA抗體測(cè)定結(jié)果比較

與其它三組對(duì)比，健康受檢組的陽(yáng)性率較低，其中AIH 組患者的血清ANA陽(yáng)性率高于PBC和PSC組，差異顯著(P<0.05)，而PBC組和PSC組的血清ANA陽(yáng)性率對(duì)比無顯著差異(P>0.05)，PBC組與其它三組對(duì)比AMA陽(yáng)性率較高，差異顯著(P<0.05)，如表1所示。

表1 四組受檢者血清ANA、AMA抗體測(cè)定結(jié)果的比較[n(%)]

2.2四組受檢者SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體測(cè)定結(jié)果的比較

與其它三組對(duì)比，AIH組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽(yáng)性率較高，差異顯著(P<0.05)，而PBC組、PSC組和健康受檢組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽(yáng)性率對(duì)比無顯著差異(P>0.05)，如表2所示。

表2 四組受檢者SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體測(cè)定結(jié)果的比較[n(%)]

3 討論

自身免疫性肝病的疾病類型較多，依據(jù)組織病理學(xué)和免疫學(xué)可分為AIH、PBC、PSC等，當(dāng)前，臨床對(duì)自身免疫性肝病的發(fā)病機(jī)制尚未有明確結(jié)石，但被臨床學(xué)者普遍認(rèn)為誘發(fā)的原因是支持抗原被激活，還有學(xué)者認(rèn)為和病毒感染有很大關(guān)聯(lián)，肝組織在被乙肝病毒或麻疹等感染后其肝細(xì)胞膜則會(huì)被白細(xì)胞抗原給活化，通過刺激自身B細(xì)胞而釋放出更多的抗體，進(jìn)而對(duì)自身肝臟組織造成很大損害，若隨著病情的發(fā)展下，會(huì)引發(fā)肝功能衰竭或肝硬化等嚴(yán)重疾病，若不及時(shí)治療還會(huì)造成患者死亡[6-9]。因自身免疫性肝病的抗體具有一定特異性，且抗體的滴度水平也相對(duì)較高，為此自身免疫性肝病患者的診斷科采用自身抗體譜進(jìn)行檢測(cè)[10]。

抗線粒體抗體對(duì)檢測(cè)原發(fā)性膽汁肝硬化具有較強(qiáng)的特異性，并且抗可溶性肝抗原/抗胰抗原也是診斷AIH較強(qiáng)且有效的一種方式，為此，采用自身抗體譜檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的早期診治具有重要意義[11-12]。通過不同自身免疫性肝病的不同其對(duì)血清AMA水平的影響也存在一定差異，而影響最小的則是AIH。通過本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與其它三組對(duì)比，健康受檢組的陽(yáng)性率較低，其中AIH 組患者的血清ANA陽(yáng)性率高于PBC和PSC組，而PBC組和PSC組的血清ANA陽(yáng)性率對(duì)比無顯著差異(P>0.05)，PBC組與其它三組對(duì)比AMA陽(yáng)性率較高；與其它三組對(duì)比，AIH組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽(yáng)性率較高，差異顯著(P<0.05)，而PBC組、PSC組和健康受檢組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽(yáng)性率對(duì)比無顯著差異(P>0.05)；由此表明，臨床采用自身抗體譜檢測(cè)可顯著篩查自身免疫性肝病，同時(shí)也是作為檢測(cè)自身免疫性肝病的重要指標(biāo)。

綜上所述，臨床采用自身抗體譜檢測(cè)肝臟疾病的應(yīng)用效果較為顯著，主要用于鑒別自身免疫性肝病，而臨床治療的依據(jù)可結(jié)合自身抗體譜的檢測(cè)情況和患者自身癥狀及其它檢測(cè)指標(biāo)決定治療策略，進(jìn)而才能為治療自身免疫性肝病的效果提供重要參考依據(jù)。