基于心康沖劑調(diào)控慢性心力衰竭大鼠JAK2/STAT3通路抗心肌纖維化的作用機(jī)制

徐丹，董朝陽，郭睿，郭冰，毛以林

〔摘要〕 目的 探討心康沖劑抗慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化的機(jī)制。方法 48只雄性SD大鼠隨機(jī)均分為正常組、模型組、心康沖劑治療組（治療組）、纈沙坦對(duì)照組（纈沙坦組）。除正常組外，其余各組經(jīng)腹腔注射注射用鹽酸多柔比星1.5 mg/kg制造慢性心力衰竭大鼠模型。治療組給與1.2 g/（kg·d）心康沖劑；纈沙坦組給與1.62 mg/（kg·d）纈沙坦膠囊；正常組、模型組給予等體積滅菌注射用水灌胃。每日1次，連續(xù)灌胃8周。以超聲心動(dòng)圖檢測大鼠心功能[左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fractions， LVEF）、左心室短軸縮短率（left ventricular fractional shortening， LVFS）]，Masson染色觀察心肌纖維化，RT-qPCR法檢測心肌組織Ⅰ型膠原（collagen Ⅰ， ColⅠ）mRNA表達(dá)水平，Western blot法檢測心肌ColⅠ、磷酸化酪氨酸激酶2（phospho-Janus kinase， p-JAK2）、磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（phoso-signal transducer and activator of transcription 3， p-STAT3）的蛋白含量。用Pearson相關(guān)及線性回歸分析ColⅠ、p-JAK2、p-STAT3與左室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end systolic diameter， LVESD）之間的相關(guān)性。結(jié)果 與正常組比較，模型組大鼠LVEF、LVFS顯著下降（P＜0.01）；與模型組比較，治療組大鼠LVEF、LVFS均升高（P＜0.01），LVESD下降（P＜0.01），ColⅠmRNA及蛋白含量均下降（P＜0.05，P＜0.01），p-JAK2、p-STAT3蛋白含量均下降（P＜0.05，P＜0.01）；與纈沙坦組比較，治療組LVEF、LVFS升高（P＜0.01），p-STAT3蛋白含量降低（P＜0.05），而ColⅠmRNA、p-JAK2、ColⅠ蛋白含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。ColⅠ、p-STAT3、p-JAK2均與LVESD具有明顯線性關(guān)系。結(jié)論 心康沖劑可通過下調(diào)JAK2/STAT3信號(hào)通路激活，降低ColⅠmRNA表達(dá)與ColⅠ蛋白合成，從而抗慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化。

〔關(guān)鍵詞〕 慢性心力衰竭；心康沖劑；心肌纖維化；JAK2/STAT3信號(hào)通路；Ⅰ型膠原

〔中圖分類號(hào)〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０23.08.007

Mechanism of action of Xinkang Granule against myocardial fibrosis

by regulating JAK2/STAT3 signaling pathway in rats with chronic

heart failure

XU Dan1，2， DONG Chaoyang1，2， GUO Rui1，2， GUO Bing1，2， MAO Yilin2*

1. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. The Second Hospital of Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410005， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To investigate the mechanism of Xinkang Granule （XKG） against myocardial fibrosis in rats with chronic heart failure （CHF）. Methods Forty-eight male SD rats were randomly divided into normal group， model group， XKG treatment group （treatment group）， valsartan control group （valsartan group）. Except for the normal group， the other groups were injected intraperitoneally with doxorubicin hydrochloride 1.5 mg/kg to establish a rat model of CHF. Then， the treatment group was given XKG 1.2 g/（kg·d）， the valsartan group was given valsartan capsules 1.62 mg/（kg·d）， and the normal group and the model group were given equal volumes of sterilized water for injection. All the rats received gavage once daily， continuously for 8 weeks. The cardiac functions of rats including left ventricular ejection fractions （LVEF） and left ventricular fractional shortening （LVFS） were measured by echocardiography， myocardial fibrosis was observed by Masson staining， the mRNA expression level of collagen Ⅰ （Col Ⅰ） in myocardial tissue was examined by RT-qPCR， and the protein level of myocardial ColⅠ， phospho-Janus kinase 2 （p-JAK2）， phoso-signal transducer， and activator of transcription 3 （p-STAT3） were measured by Western blot. Moreover， Pearson's correlation and linear regression were used to analyze the correlation between ColⅠ， p-JAK2， p-STAT3， and left ventricular end systolic diameter （LVESD）. Results Compared with the normal group， LVEF and LVFS in the model group significantly decreased （P<0.01）; compared with the model group， LVEF and LVFS in the treatment group increased （P<0.01）， LVESD decreased （P<0.01）， and the mRNA expression and protein level of ColⅠ as well as the protein levels of p-JAK2 and p-STAT3 were reduced （P<0.05， P<0.01）; compared with the valsartan group， LVEF and LVFS in the treatment group were higher （P<0.01）， but the protein level of p-STAT3 was lower （P<0.05）， and there was no significant difference in Col Ⅰ mRNA expression and the protein levels of p-JAK2 and Col Ⅰ（P>0.05）. ColⅠ， p-STAT3， and p-JAK2 all had obvious linear relationships with LVESD. Conclusion XKG can inhibit myocardial fibrosis in rats with chronic heart failure by down-regulating the activation of JAK2/STAT3 signaling pathway and reducing the mRNA expression and protein synthesis of ColⅠ.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 chronic heart failure; Xinkang Granule; myocardial fibrosis; JAK2/STAT3 signaling pathway; collagenⅠ

慢性心力衰竭（chronic heart failure， CHF）是由于各種器質(zhì)性或功能性的心臟疾病導(dǎo)致心功能不全，進(jìn)而引起的一種臨床綜合征，是心臟疾病的終末階段[1]。心力衰竭（簡稱心衰）時(shí)心臟負(fù)荷增加，心肌出現(xiàn)代償性肥厚，表現(xiàn)為心肌膠原纖維沉積，心肌舒張和收縮僵硬異常，心肌順應(yīng)性下降[2]，即出現(xiàn)心肌纖維化。Janus蛋白酪氨酸激酶2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3， JAK2/STAT3）信號(hào)通路的激活能調(diào)控心肌成纖維細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移，使膠原蛋白過度沉積，從而影響心肌纖維化的發(fā)生發(fā)展[3]。JAK2磷酸化后可進(jìn)一步使STAT3磷酸化[4]，磷酸化后的STAT3可以上調(diào)Ⅰ型膠原蛋白（collagenⅠ， ColⅠ）合成[5]，促進(jìn)纖維化的發(fā)生發(fā)展。

心康沖劑（Xinkang Granule， XKG）是第七批全國老中醫(yī)藥專家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)繼承工作指導(dǎo)老師、湖南省名老中醫(yī)毛以林教授以《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》之升陷湯、《傷寒論》之真武湯、苓桂術(shù)甘湯及時(shí)方參苓白術(shù)散、五皮飲為基礎(chǔ)，融合化裁而出，具有“升補(bǔ)心肺宗氣、溫補(bǔ)脾腎陽氣、利水滲濕”的功效，針對(duì)CHF后期“宗氣下陷、脾腎陽虛、水飲內(nèi)?！辈C(jī)而設(shè)[6]。本實(shí)驗(yàn)通過腹腔注射鹽酸多柔比星建立心衰模型，采用心康沖劑進(jìn)行干預(yù)，與纈沙坦進(jìn)行對(duì)照，研究心康沖劑調(diào)控CHF大鼠JAK2/STAT3信號(hào)通路激活抗心肌纖維化的作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料

1.1? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

48只健康雄性SPF級(jí)SD大鼠，購于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證編號(hào)：430727221100402072），體質(zhì)量180～200 g。動(dòng)物飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，室內(nèi)溫度（24±2） ℃，相對(duì)濕度50%～70%。大鼠均自由攝食、飲水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。此實(shí)驗(yàn)由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，倫理編號(hào)：LL2022030302。

1.2? 主要藥品及試劑

注射用鹽酸多柔比星（浙江海正藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：H33021979）；纈沙坦膠囊（北京諾華制藥有限公司，批號(hào)：H20040217）；心康沖劑（廣東一方制藥有限公司）；PCR引物（由北京擎科生物科技股份有限公司合成）；mRNA、miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、UltraSYBR Mixture、DM2000 Plus DNA Marker（中國北京康為世紀(jì)，貨號(hào)：CW2569、CW2141、CW2601、CW0632）；Trizol試劑盒（美國Thermo公司，貨號(hào)：15596026）；核酸染料（中國北京普利萊基因技術(shù)有限公司，貨號(hào)：PB11141）；抗體：ColⅠ、GAPDH（美國Proteintech公司，貨號(hào)：14695-1-AP、10494-1-AP）、p-JAK2、p-STAT3（英國Abcam公司，貨號(hào)：ab32101、ab76315）；二抗 Goat anti-Rabbit IgG （H+L） Secondary Antibody， HRP（中國Abiowell公司，貨號(hào)：AWS0002b）；Masson染色試劑盒（上海威奧生物科技有限公司，貨號(hào)：AWI0253a）。

1.3? 主要儀器

便攜式彩色多普勒超聲儀（飛依諾科技股份有限公司，型號(hào)：VINNO6LAB）；熒光定量RCP儀（美國ABI公司，型號(hào)：QuantStudio1）；化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（中國上海勤翔科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)：ChemiScope6100）；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（中國湖南湘儀，型號(hào)：H1650R）；顯微鏡（Motic，型號(hào)：BA210T）。

2 方法

2.1? 動(dòng)物分組及造模

動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)取12只作為正常組，其余大鼠進(jìn)行造模。有研究證實(shí)，阿霉素可通過JAK/STAT信號(hào)通路誘導(dǎo)大鼠左心室細(xì)胞死亡和纖維化[7]。故本實(shí)驗(yàn)選用阿霉素進(jìn)行造模，造模方法同文獻(xiàn)[8]，大鼠按1.5 mg/kg阿霉素腹腔注射，每周2次，共7周[9]。以大鼠出現(xiàn)皮毛枯槁、豎立、躊臥扎堆、縮肩拱背、行動(dòng)遲緩、精神萎靡、尾涼暗淡、腹水等癥狀，以及超聲心動(dòng)圖檢測左心室短軸縮短率（left ventricular fractional shortening， LVFS）＜30%[10]，為心力衰竭造模成功的標(biāo)志。36只成模大鼠再按隨機(jī)數(shù)字表法分為阿霉素模型組（模型組）、心康沖劑治療組（治療組）、纈沙坦對(duì)照組（纈沙坦組），每組12只。

2.2? 藥物制備及給藥

心康沖劑組成：白參10 g，黃芪30 g，柴胡5 g，升麻5 g，桔梗5 g，茯苓15 g，薏苡仁30 g，生姜皮10 g，大腹皮10 g，陳皮10 g，桂枝6 g，制附片10 g，砂仁6 g。由廣東一方制藥有限公司提供中藥配方顆粒，根據(jù)前期研究已證明的最佳有效劑量[11]，按成人2倍等效劑量即1 g/（kg·d），配制成濃度為1.2 g/mL的溶液。纈沙坦膠囊成人劑量80 mg/d，按人與動(dòng)物體表面積折算[12]，以纈沙坦膠囊配制成1.62 mg/mL的溶液，灌胃量=給藥劑量/各組相應(yīng)溶液濃度，每次灌胃量1～2 mL。正常組及模型組給予等量滅菌注射用水灌胃。每天1次，持續(xù)8周后結(jié)束實(shí)驗(yàn)進(jìn)行取材。

2.3? 指標(biāo)及檢測方法

2.3.1? 心臟超聲檢測心功能? 大鼠用動(dòng)物用異氟烷經(jīng)呼吸麻醉機(jī)麻醉后固定，前胸涂搽脫毛膏備皮后涂耦合劑，經(jīng)飛依諾VINNO6lab彩色多譜勒超聲診斷儀取大鼠左心室長軸切面后進(jìn)行M超聲檢測，連續(xù)記錄10個(gè)心動(dòng)周期，測量左心室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end diastolic diameter， LVEDD）、左心室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end systolic diameter， LVESD）、左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fractions， LVEF）、LVFS，所有數(shù)據(jù)均測量3次并取其平均值記錄。

2.3.2? Masson染色? 取大鼠左心室心肌組織，放入4%多聚甲醛溶液中固定標(biāo)本，經(jīng)石蠟包埋、切片（厚度約5 μm）后，行Masson染色，過程參照Masson染色試劑盒說明書。染色后每組樣本分別在×100和×400鏡下隨機(jī)選取4個(gè)視野拍照。光學(xué)顯微鏡下觀察肌纖維呈紅色，膠原纖維呈藍(lán)染或綠色。

2.3.3? RT-qPCR檢測心肌組織ColⅠmRNA表達(dá)? 取大鼠心肌組織約0.02 g，以Trizol提取心肌組織總RNA，以組織總mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄cDNA（反應(yīng)體系為20 μL），42 ℃孵育15 min，85 ℃孵育5 min，冰上冷卻，5倍稀釋后于-20 ℃保存。每個(gè)標(biāo)本取2 μL進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)體系為30 μL，檢測基因上下游引物各1 μL，去離子水11 μL，PCR Master Mix15 μL。擴(kuò)增條件為95 ℃ 10 min，95 ℃ 15 s，60 ℃ 30 s，共40個(gè)循環(huán)，經(jīng)GAPDH內(nèi)參校正。收集每循環(huán)第３個(gè)步驟熒光信號(hào)量，以2-ΔΔCt反映各樣品相對(duì)于對(duì)照組樣品目的基因表達(dá)水平的比值，ΔCt=目的基因Ct-內(nèi)參基因Ct，-ΔΔCt=（對(duì)照組）ΔCt-各樣品ΔCt。每個(gè)樣本重復(fù)３次后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。引物設(shè)計(jì)首先在NCBI上搜索目的基因的序列，然后運(yùn)用Primer５軟件設(shè)計(jì)引物，最后由北京擎科合成引物。引物序列見表１。

2.3.4? Western blot法檢測心肌ColⅠ、p-JAK２、p-STAT３蛋白表達(dá)水平? 剪取凍存心肌組織0.025 g，加入300 μL RIPA裂解液冰上裂解10 min，４ ℃，12 000 r/min半徑7 cm離心15 min后，將上清液轉(zhuǎn)移到1.5 mL離心管中；按照BCA蛋白定量試劑盒（Abiowell）使用說明操作，測定蛋白濃度。每個(gè)樣本取200 μL蛋白上清液，經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、一抗孵育，用1×PBST將一抗按照一定比例稀釋，ColⅠ（1∶1 000），p-JAK2（1∶1 000），p-STAT3（1∶5 000），GAPDH（1∶5 000），將膜與一抗一起孵育，室溫放置90 min。孵育結(jié)束，1×PBST洗3次，每次15 min。二抗孵育，用1×PBST稀釋HRP標(biāo)記的二抗，將按1∶5 000稀釋后的二抗與膜共同室溫孵育90 min。孵育結(jié)束，1×PBST洗3次，每次15 min。使用ECL化學(xué)發(fā)光液與膜孵育1 min，用濾紙吸盡液體，用塑封膜將膜包裹雜交膜，在凝膠成像系統(tǒng)成像。將曝光后的底片用Quantity One專業(yè)灰度分析軟件進(jìn)行分析。

2.4? 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用GraphPad Prism 8.0.2統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料均以“ｘ±s”表示，先進(jìn)行正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)，各組間比較采用one-way ANOVA分析；方差不齊時(shí)用方差分析Games-Howell檢驗(yàn)；不滿足正態(tài)性時(shí)選擇秩和檢驗(yàn)；變量間的相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析及線性回歸分析。均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1? 各組大鼠心功能指標(biāo)比較

與正常組比較，模型組大鼠LVEDD、LVESD升高（P＜0.05，P＜0.01），LVEF、LVFS顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，治療組LVEDD降低（P＜0.01），而LVEF、LVFS升高（P＜0.01）；纈沙坦組LVEDD差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而LVEF、LVFS升高（P＜0.01）。與纈沙坦組比較，治療組LVEDD、LVESD差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而LVEF、LVFS升高（P＜0.01）。詳見表2。

3.2? 各組大鼠心肌Masson染色結(jié)果

正常組大鼠心肌組織呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)灰色，心肌纖維排列整齊、規(guī)則，細(xì)胞間見少量呈藍(lán)色的膠原纖維沉積；模型組大鼠心肌纖維排列紊亂，視野中可見大量網(wǎng)狀排列的膠原纖維；纈沙坦組相較于模型組心肌纖維排列紊亂有所改善，心肌纖維沉積減少；治療組相較模型組心肌纖維排列紊亂有所改善，膠原纖維沉積明顯減少，相較于纈沙坦組膠原纖維沉積減少明顯。詳見圖1。

3.3? 各組ColⅠmRNA表達(dá)比較

與正常組比較，模型組大鼠心肌ColⅠmRNA表達(dá)升高（P＜0.01）；與模型組比較，XKG治療組大鼠心肌ColⅠmRNA表達(dá)下降（P＜0.01）；治療組與纈沙坦組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見圖2。

3.4? 各組ColⅠ、p-JAK2、p-STAT3蛋白含量差異比較

與正常組比較，模型組大鼠心肌Col? Ⅰ、p-STAT3、p-JAK2蛋白含量均升高（P＜0.01）；纈沙坦組p-STAT3、p-JAK2蛋白含量均升高（P＜0.05，P＜0.01）。與模型組比較，治療組大鼠心肌ColⅠ、p-STAT3、p-JAK2蛋白含量均降低（P＜0.05，P＜0.01）。與纈沙坦組比較，治療組大鼠心肌p-STAT3蛋白含量降低（P＜0.05），p-JAK2、ColⅠ蛋白含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見圖3。

3.5? 左室收縮末期內(nèi)徑與ColⅠ、p-STAT3、p-JAK2蛋白含量線性回歸分析及Pearson相關(guān)分析

p-STAT3蛋白含量、p-JAK2蛋白含量、ColⅠ蛋白含量均與LVIDs具有明確線性關(guān)系（F=47、57.69、9.666；P＜0.01，P＜0.05），且p-STAT3、p-JAK2、ColⅠ與LVIDs均呈正相關(guān)。詳見圖4。LVIDs能被p-STAT3、p-JAK2、ColⅠ蛋白含量解釋的因素分別占82.4%、85.2%、49.1%，其中與p-JAK2、p-STAT3蛋白含量的相關(guān)系數(shù)較大（r=0.923、0.908）。詳見表3。

4 討論

CHF是多種心血管疾病發(fā)展的終末階段。目前，西醫(yī)采用“新四聯(lián)”規(guī)范化心力衰竭藥物治療模式，即血管緊張素受體腦啡肽酶抑制劑或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（angiotension converting enzyme inhibitors， ACEI）/血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑、鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抑制劑、β受體阻滯劑和鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑[13]。其中，ACEI類代表藥物纈沙坦經(jīng)臨床試驗(yàn)證明具有改善心臟結(jié)構(gòu)和功能、治療肥厚型心肌病的作用[14]。有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，纈沙坦具有明確的抗心肌纖維化的作用[15]。

CHF依據(jù)其心悸、氣喘、肢體水腫等癥狀體征，在中醫(yī)學(xué)歸屬為“心脹”“心悸”“水腫”等范疇。毛以林教授在研究古今文獻(xiàn)和臨床實(shí)踐的基礎(chǔ)上，提出CHF的主要病機(jī)觀念為宗氣下陷、脾腎陽虛、水濕內(nèi)停[6]，由此擬方心康沖劑，該方以真武湯、升陷湯以及參苓白術(shù)散合并化裁而出，具有升補(bǔ)心肺宗氣、溫補(bǔ)脾腎陽氣、利水滲濕化飲的功效，可用于CHF治療，并獲得顯著的臨床療效，前期研究該方能抗心肌纖維化、延緩心力衰竭、抗心室重構(gòu)[16]。

CHF的主要病理變化是心室重構(gòu)，心力衰竭時(shí)由于心臟負(fù)荷增加，心肌代償性肥厚，且心肌肥厚時(shí)心肌細(xì)胞數(shù)并不增多，而是心肌纖維增多，表現(xiàn)為心肌纖維化。細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積是心肌纖維化的重要原因，細(xì)胞外基質(zhì)主要是由Ⅰ型、Ⅲ型膠原構(gòu)成，其中Ⅰ型膠原占心肌膠原的80%～85%，其含量與心臟功能密切相關(guān)。心肌纖維化時(shí)膠原沉積，各型膠原比例失調(diào)，其中Ⅰ型、Ⅲ型膠原比例升高、排列紊亂[14]，心臟結(jié)構(gòu)重塑、心肌肥大、心室壁順應(yīng)性下降，最終導(dǎo)致功能障礙。因此，Ⅰ型膠原的含量與排列可以用來評(píng)估心肌纖維化的程度。

近年來，關(guān)于JAK2/STAT3信號(hào)通路參與調(diào)控多種重要臟器纖維化的報(bào)道越來越多[17-19]。其在心肌纖維化中的作用也備受重視，研究表明，JAK2/STAT3信號(hào)通路的激活是導(dǎo)致左心室心肌纖維化的重要機(jī)制之一[20]。JAK2/STAT3信號(hào)通路激活的第一步是JAK2的激活，各種配體如白細(xì)胞介素-6與JAK2結(jié)合使其磷酸化，激活后的JAK2可使其下游的STAT3磷酸化，激活后的STAT3上調(diào)成纖維細(xì)胞，促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞的增殖[21]，上調(diào)Ⅰ型膠原蛋白的合成[5]。

在本實(shí)驗(yàn)中，心臟彩超結(jié)果顯示阿霉素腹腔注射造模后大鼠LVEED、LVESD明顯升高，而LVEF、LVFS顯著下降，Masson染色顯示模型組大鼠心肌組織有明顯的纖維化改變，且心肌組織中ColⅠmRNA的表達(dá)及蛋白含量均明顯升高，纖維化的心肌組織中p-STAT3及p-JAK2蛋白含量均升高；而心康沖劑能夠明顯改善心肌纖維化，降低組織中ColⅠmRNA的表達(dá)和ColⅠ含量，作用途徑可能是通過抑制JAK2磷酸化進(jìn)而抑制STAT3的磷酸化，從而減輕心肌纖維化。通過相關(guān)分析及線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，p-STAT3、p-JAK2、ColⅠ含量與LVIDs呈正相關(guān)，且p-STAT3、p-JAK2對(duì)LVIDs的影響更大。以上結(jié)果表明，心康沖劑基于JAK2/STAT3信號(hào)通路調(diào)控，減少心肌ColⅠ的合成，從而抗心肌纖維化。

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（本文編輯? 匡靜之）