陳 燕,趙娟紅,張洪專(zhuān),張 康,王 娟

(山東醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校附屬醫(yī)院,山東 臨沂 276000)

上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)是最常見(jiàn)的卵巢癌組織學(xué)亞型,占卵巢惡性腫瘤的95% 以上[1]。85% 的晚期卵巢癌血清CA125升高,并且與分期呈相關(guān)性,然而,早期卵巢癌CA125升高不到50%,尋找敏感、特異的診斷標(biāo)記物來(lái)監(jiān)測(cè)卵巢癌病情至關(guān)重要。分子伴侶素(Tcomplexprotein-1ringcomplex,TRiC,又稱(chēng)CCT)是普遍存在于細(xì)胞內(nèi)的高度保守的基因家族產(chǎn)物,由8個(gè)同源基因編碼的蛋白質(zhì)亞基(TCP1.CCT2-CCT8)在每個(gè)環(huán)中精確排列組成的大型雙環(huán)復(fù)合物,主要參與蛋白質(zhì)的折疊和空間結(jié)構(gòu)的形成[2]。研究表明,TCP1在許多腫瘤組織中表達(dá)升高[3-6],與腫瘤發(fā)生發(fā)展及不良預(yù)后相關(guān)。本研究通過(guò)分析TCP1在EOC中的表達(dá),探討其診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2022年1月本院收治的52例EOC 患者。納入標(biāo)準(zhǔn):均經(jīng)術(shù)后病理組織學(xué)確診;均為初診,術(shù)前未接受過(guò)放化療和激素治療。排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他良、惡性女性生殖系統(tǒng)疾病;合并消化道腫瘤或其他系統(tǒng)的良惡性腫瘤。52例患者,年齡32～68 歲,平均(51.23±11.21)歲;國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期[2]:Ⅰ期9例,Ⅱ期11例,Ⅲ期18例,Ⅳ期14例;高、中分化(G1、G2)16例,低分化(G3)36例。另選取同期卵巢良性病變患者60例為良性組,年齡23～56歲,平均(50.82±10.04)歲。兩組患者一般資料相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具可比性。

1.2 方法 TCP1檢測(cè):將兩組病變組織用石蠟包埋,切4～5μm 厚切片,經(jīng)過(guò)烘干、脫蠟和水化,在檸檬酸鈉緩沖液中抗原修復(fù)15 min;3%過(guò)氧化氫孵育10 min后洗滌3次;加入封閉液繼續(xù)孵育10 min阻斷非特異性結(jié)合。加入TCP1 抗體(1∶200),4℃孵育過(guò)夜,洗滌3次后與二抗(1∶300)室溫孵育結(jié)合。再次洗滌,DAB顯色,蘇木素復(fù)染,常規(guī)脫水,透明,封片,閱片。顯微鏡下隨機(jī)選取5個(gè)視野,按照染色強(qiáng)度和細(xì)胞陽(yáng)性率進(jìn)行評(píng)分。CA125檢測(cè):抽取所有受試者空腹外周靜脈血4～5 m L,用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)卵巢癌組患者血清CA125水平。

1.3 指標(biāo)評(píng)定 TCP1:染色強(qiáng)度評(píng)分:無(wú)色為0分,淡黃色為1分,黃色為2分,棕黃色為3分;細(xì)胞染色陽(yáng)性率評(píng)分:每張切片在高倍鏡視野下連續(xù)計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于5%的為0分,5%～25%為1分,26%～50%為2分,51%～75%為3分,76%～100%為4分。將染色強(qiáng)度和染色陽(yáng)性率兩項(xiàng)得分相乘作為免疫組化得分,＜4 分為T(mén)CP1陰性,≥4 分為T(mén)CP1 陽(yáng)性。CA125 正常值范圍0～35 U/m L,以超過(guò)正常值上限為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 兩組TCP1的表達(dá)情況 TCP1蛋白主要位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),在上皮性卵巢癌組織中大量表達(dá),陽(yáng)性率高于良性組;CA125水平也高于良性組。見(jiàn)表1。

表1 兩組TCP1、CA125表達(dá)水平的比較

2.2 EOC患者TCP1表達(dá) 與臨床病理特征的關(guān)系FIGO 分期Ⅲ、Ⅳ期患者比Ⅰ、Ⅱ期患者TCP1的表達(dá)陽(yáng)性率高,低分化患者比高分化患者TCP1的表達(dá)陽(yáng)性率高;在年齡和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面TCP1的表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見(jiàn)表2。

表2 TCP1表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系

2.3 TCP1 聯(lián)合CA125 對(duì)EOC 的診斷價(jià)值TCP1與血清CA125聯(lián)合檢測(cè)敏感度為88.46%,特異性為88.33%,高于TCP1、血清CA125單項(xiàng)檢測(cè)。見(jiàn)表3。

表3 TCP1、CA125及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)EOC的診斷結(jié)果

3 討論

卵巢癌是婦科中具有高度侵襲性和致命性的腫瘤。由于該病缺乏有效的篩查手段且早期臨床癥狀不明顯,患者確診時(shí)多為中晚期,即使進(jìn)行了手術(shù)和化療,仍有75%的患者出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā),其中又有20%發(fā)展為耐藥性。所以,闡明該病潛在的生物學(xué)機(jī)制,對(duì)開(kāi)發(fā)有效的新型抗癌藥物十分必要。

研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑產(chǎn)生耐藥性后,細(xì)胞中的TRiC m RNA 的表達(dá)增加了4倍以上[3]。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn),TRiC 多種亞基在腫瘤樣本中過(guò)表達(dá),并在腫瘤的發(fā)生與發(fā)展中扮演著重要的角色。TCP1 通過(guò)AKTGSK3B 路和ERK 路穩(wěn)定c Myc癌蛋白,促進(jìn)c-Myc向促增值基因的轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而促進(jìn)胰腺癌和肝癌細(xì)胞的增殖[5-6]。Sun等[7]研究顯示,在含TCP1亞基的大腸癌患者預(yù)后不良與CD4+T 細(xì)胞、B 細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞等免疫浸潤(rùn)減少有關(guān),表明TCP1可能通過(guò)調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞浸潤(rùn),進(jìn)而在調(diào)節(jié)抗腫瘤免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用。Chang等[8]研究發(fā)現(xiàn)TCP1 過(guò)表達(dá)時(shí)可以通過(guò)促進(jìn)AKTGSK3β-β-catenin和XIAP-Survivin 通路恢復(fù)腫瘤的化學(xué)抗性和細(xì)胞遷移/侵襲,導(dǎo)致耐藥和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的發(fā)生。另外,TRiC的a亞基TCP1通過(guò)調(diào)控PI3K 信號(hào)通路促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖,對(duì)患者預(yù)后至關(guān)重要[9]。

TCP1在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制研究較少。本研究發(fā)現(xiàn),TCP1 的表達(dá)隨著卵巢病變的惡性程度而升高,病理分級(jí)與臨床分期直接影響TCP1在卵巢癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率。表明TCP1表達(dá)上調(diào)使得卵巢癌細(xì)胞更具侵襲性。另外,結(jié)合CA125聯(lián)合檢查,可以提高卵巢癌腫瘤標(biāo)記物的陽(yáng)性篩查率,靈敏度和特異度均比單一檢查時(shí)增高。

綜上所述,TCP1 在EOC 患者組織中異常表達(dá),檢測(cè)其在腫瘤組織中的表達(dá)水平,可對(duì)疾病的診斷做出預(yù)測(cè)。TPC1有望成為卵巢癌患者預(yù)后的新的生物學(xué)標(biāo)記物。本研究尚有不足之處:樣本量不夠大,尚需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究證實(shí);僅收集卵巢上皮性癌作為標(biāo)本,對(duì)卵巢癌其他分類(lèi)未做試驗(yàn)統(tǒng)計(jì),下一步研究可以納入實(shí)驗(yàn)組,進(jìn)一步驗(yàn)證其臨床價(jià)值。