尹靖凱，盧正義，張媛媛，崔培，喬秀亭，程鎮(zhèn)燕

葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉生長和體色的影響

尹靖凱，盧正義，張媛媛，崔培，喬秀亭，程鎮(zhèn)燕通信作者

（天津農(nóng)學院 水產(chǎn)學院 天津市水產(chǎn)生態(tài)與養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300392）

為研究葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉的著色效果，在基礎飼料中分別添加200 mg/kg的葉黃素和葉黃素酯，將270尾平均體重26.03±0.07 g的黃金錦鯉分成3個處理組，每組3個重復，每個水箱30尾魚，養(yǎng)殖試驗持續(xù)42 d。結果表明：與對照組相比，添加葉黃素和葉黃素酯后對生長沒有顯著影響（＞0.05），但添加葉黃素酯可使魚體更加修長，顯著提高了錦鯉體長/體高比值 （＜0.05）。與對照組相比，添加葉黃素減少了魚體內水分，增加了脂肪含量（＜0.05）；3個處理組之間魚體蛋白含量無顯著差異（＞0.05）。添加葉黃素和葉黃素酯對錦鯉的紅度（）和亮度（）沒有顯著影響（＞0.05），但顯著提高了魚體的黃度（），添加葉黃素和葉黃素酯14 d后，魚體的黃度值即可達到與42 d相似的效果。與葉黃素相比，葉黃素酯對黃金錦鯉著色效果更快、更顯著。

葉黃素；葉黃素酯；錦鯉；生長；體色

黃金錦鯉（）屬鯉形目，鯉科，鯉亞科，鯉屬，有“水中活寶石”的美稱，具有很高的觀賞和飼養(yǎng)價值[1]。體色是評價觀賞魚品質的重要依據(jù)之一，魚體內類胡蘿卜素、葉黃素等色素在皮膚積累能直接影響體表的顏色，且觀賞魚體內大部分色素不能自身合成，需要從飼料中獲得，因此對于飼料添加劑和增色飼料的研究顯得尤為重要[2]。目前對鮭鱒魚類肌肉的色澤問題研究表明，在飼料中添加蝦青素可使鮭鱒魚類肌肉呈現(xiàn)出紅色，能滿足市場需求[3]。

類胡蘿卜素分為胡蘿卜素類和葉黃素類，其中蝦青素和葉黃素均屬葉黃素類[4]。目前，葉黃素已作為一種天然的飼料添加劑在家禽和水產(chǎn)中被廣泛應用，相關研究表明其具有一定的抗氧化能力，能抑制一些自由基的活性，增強體質和免疫能力[5-6]。孫學亮等[7]發(fā)現(xiàn)在飼料中適量添加葉黃素能明顯增強血鸚鵡（）的體表黃度和抗氧化酶活性；宋雪璐等[8]研究表明，在飼料中添加適量濃度的葉黃素可有效改善七彩神仙魚（）體表的黃度，對魚體內肝臟組織的總抗氧化能力起到增強作用，若添加過量，則會使生長機能減弱。葉黃素酯是一種重要的類胡蘿卜素脂肪酸酯，在代謝過程中可轉化為葉黃素作為增色劑，添加在魚類飼料當中，可改善魚類的體色狀況，且葉黃素酯對于光、氧的穩(wěn)定性也優(yōu)于葉黃素，不易降解氧化[9]；故本試驗選取葉黃素和葉黃素酯兩種著色劑，比較其對黃金錦鯉生長和體色的影響，為生產(chǎn)上優(yōu)化黃金錦鯉著色飼料配方提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料設計與制作

在基礎飼料中分別添加1.0%的葉黃素（純度2%）和0.2%的葉黃素酯（純度10%），即添加量均為200 mg/kg。所有原料粉碎后，過60目篩，均勻混合后由飼料擠壓機壓制成直徑約為2.0 mm的硬顆粒沉性飼料，晾干備用。試驗飼料配方和營養(yǎng)成分詳情如表1。

表1 試驗飼料配方及組成（風干基礎） %

原料組成對照組葉黃素組葉黃素酯組 豆粕25.0025.0025.00 雙低菜粕15.0015.0015.00 發(fā)酵豆粕5.005.005.00 進口魚粉10.0010.0010.00 進口雞肉粉5.005.005.00 面粉15.0015.0015.00 麩皮8.408.408.40 膨潤土7.006.006.80 葉黃素2%10.001.000.00 葉黃素酯10%10.000.000.20 防霉劑0.100.100.10 豆油6.006.006.00 氯化膽堿0.200.200.20 鹽0.300.300.30 磷酸二氫鈣2.002.002.00 預混料21.001.001.00 營養(yǎng)成分分析 蛋白質35.4134.0735.24 脂肪8.168.358.23 粗灰分14.4014.0613.82

注：1本試驗采用純度為2％的葉黃素，由晨光生物科技集團股份有限公司生產(chǎn)提供；采用的葉黃素酯純度為10％，來自西安岳達生物科技股份有限公司；2購買自帝斯曼（中國）有限公司

1.2 試驗過程

1.2.1 試驗用魚養(yǎng)殖及管理

本試驗采用的黃金錦鯉均來自天津市金水族水產(chǎn)養(yǎng)殖公司。暫養(yǎng)7 d后，將平均體長為12.75±1.96 cm，平均體重26.03±0.07 g的黃金錦鯉270 尾，隨機分配在9個帶有循環(huán)系統(tǒng)的水箱內，每個水箱放30尾。養(yǎng)殖期間，每天按照體重的1%～3%投喂3次（8:30、12:30、16:30）。在養(yǎng)殖期間定期檢測水質，保持水溫20～25 ℃，溶解氧濃度6～7 mg/L，pH 7.5～8.2左右，養(yǎng)殖周期為42 d。

1.2.2 樣品收集

投喂試驗結束后（42 d），所有魚饑餓24 h，采用MS-222麻醉，稱重，計數(shù)，測量形體指標（體長、體高）。隨機取5尾魚，解剖取肝臟，內臟團，并稱重。另取5尾魚做全魚體成分分析，于-80 ℃冰箱中保存。

1.2.3 生長指標測定

存活率（，%）＝100×N/N；

增重率（，%）＝100×（W-W）/W；

飼料系數(shù)（）＝/（W-W）；

肥滿度（，%）＝100×W/L；

內臟指數(shù)%（，%）＝100×W/W；

形體指數(shù)＝（）/（）

式中：W為試驗開始時魚體重（g）；W為試驗結束時魚體重（g）；為飼料攝入量干重（g）；W為肝胰臟質量（g）；L為試驗結束時魚體長（cm）；為試驗天數(shù)（d）；N為終末存活尾數(shù)；N為初始放養(yǎng)尾數(shù)；W為內臟團質量；體高（）魚體最高處垂直直線長度；體長（）吻前段到尾鰭基部的水平直線長度（cm）。

1.2.4 魚體和飼料組分測定

魚體及飼料樣品常規(guī)營養(yǎng)成分分析根據(jù)AOAC（1990）標準方法進行，即采用常壓恒溫烘干法、550 ℃灼燒法、凱氏定氮法及索氏抽提法測定水分、灰分、粗蛋白質及粗脂肪。

1.2.5 皮膚色差測定

試驗分別于養(yǎng)殖0、14、28、42 d，每缸隨機取3尾魚，于側線和背鰭之間體表部分，用色差計（WSC-S colorimeter）來測量體表的色差值，記錄體表的紅度（*）、黃度（*）和亮度（*）值。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

所有數(shù)據(jù)均用平均值±標準差（±..）表示，采用SPSS 17.0軟件中單因子方差分析進行方差分析，采用Tukey法進行組間多重比較，顯著性水平設為0.05。

2 試驗結果

2.1 葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉生長性能的影響

根據(jù)表2可知，與對照組相比，飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉的成活率、增重率、餌料系數(shù)都沒有顯著影響（＞0.05），但是添加葉黃素酯后顯著影響了錦鯉部分形體指標，表現(xiàn)為顯著提高了錦鯉體長/體高的比值（＜0.05），添加葉黃素后錦鯉體長/體高的比值也有一定提高，但與對照組相比差異不顯著。添加葉黃素和葉黃素酯對魚體的肥滿度和內臟指數(shù)沒有影響 （＜0.05）。

表2 葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉生長和形體指標的影響

組別對照組葉黃素葉黃素酯 成活率/% 98.33±1.67 98.33±1.67 96.97±1.67 初始體重/g 26.17±0.08 25.83±0.08 26.08±0.08 末期體重/g 32.47±0.16 32.03±0.18 32.12±0.47 增重率/%124.73±3.09123.06±1.19123.37±2.44 餌料系數(shù) 1.32±0.05 1.34±0.03 1.36±0.05 體長/體高 4.04±0.12a 4.21±0.29a 4.58±0.46b 肥滿度/% 2.01±0.31 2.10±0.51 2.09±0.33 內臟指數(shù)/% 8.44±0.89 8.20±0.37 7.35±0.42

注：同行中標有不同字母者表示組間有顯著性差異（＜0.05），標有相同字母者表示組間無顯著性差異（＞0.05）

2.2 飼料添加葉黃素和葉黃素酯對錦鯉體成分的影響

與對照組相比，飼料中添加葉黃素顯著影響了魚體水分和粗脂肪含量，魚體的水分低于對照組，但粗脂肪含量顯著高于對照組（＜0.05），對魚體的粗蛋白和灰分沒有顯著影響。添加葉黃素酯后，魚體的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分與對照組相比均沒有顯著差異（＞0.05）（表3）。

表3 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對錦鯉的體成分影響（W/W）

組別水分粗蛋白粗脂肪 對照組74.16±0.39a13.75±0.197.83±0.31b 葉黃素組72.29±0.58b14.34±0.379.86±0.37a 葉黃素酯組73.41±0.23ab14.49±0.287.99±0.29b

注：同列中標有不同字母者表示組間有顯著性差異 （＜0.05），標有相同字母者表示組間無顯著性差異（＞0.05）

2.3 葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉體色的影響

由表4可知，錦鯉體表的紅度*值都呈現(xiàn)負值（正值代表紅色，負值代表綠色），說明黃金錦鯉的體表并未向紅色系伸展。添加葉黃素和葉黃素酯后，體表紅度與對照組無顯著差異，對魚體的亮度（）也沒有顯著影響（＞0.05）。添加葉黃素和葉黃素酯顯著提高了魚體的黃度（*），各組的黃度值隨著養(yǎng)殖周期延長顯著提高（＜0.05），同一處理組之間14 d、28 d、42 d魚體的黃度值沒有顯著差異，但均顯著高于初始值，即添加葉黃素和葉黃素酯2周后，魚體的黃度值即可達到與42 d相似的效果。

表4 葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉體表紅度（a*）、黃度（b*）和亮度（L*）的影響

組別初始14d28d42d 體表a*值 對照組-2.69±0.10-3.42±0.86-3.20±0.67-3.83±0.27 葉黃素組-2.75±0.10-3.82±0.92-3.96±0.25-4.52±0.17 葉黃素酯組-2.73±0.09-4.44±0.56-4.18±0.03-4.18±0.40 體表b*值 對照組20.81±1.61b25.07±2.58aC25.42±3.00aB26.93±1.55aB 葉黃素組20.59±0.35b29.84±2.27aB30.43±1.66aA34.05±1.20aA 葉黃素酯組20.08±0.38b31.45±1.89aA30.89±1.39aA36.98±0.86aA 體表L*值 對照組84.61±0.9085.13±0.2185.16±0.8482.53±1.91 葉黃素組83.93±1.1282.64±3.0384.29±1.1579.36±0.58 葉黃素酯組84.22±1.1485.73±1.7183.14±1.2177.43±0.91

注：表中同行數(shù)值右上角標不同小寫字母代表同組之間不同周次內影響顯著（＜0.05）；同列標大寫字母的代表同一周次內不同組之間的顯著影響（＜0.05）；標有相同字母的代表組內或組間無顯著影響（＞0.05）

3 討論

3.1 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉生長和形體指標的影響

相關研究結果表明，添加50～200 mg/kg葉黃素對七彩神仙魚的增重率無顯著影響[8]；在血鸚鵡上的研究也表明飼料中添加0.5％葉黃素與0.3％維生素E混合物對魚體的生長指標無顯著影響[7]。本研究也發(fā)現(xiàn)添加1%葉黃素和2%葉黃素酯對黃金錦鯉的生長性能（成活率、增重率、餌料系數(shù)）無顯著影響。但也有學者認為24.2～1 700.0 mg/kg的天然葉黃素能夠提高飼料的利用率，對黃顙魚生長有促進作用[10]，這與本試驗研究結果不同，可能是養(yǎng)殖的品種不同，觀賞魚與食用魚生長速度、消化酶活性都不盡相同的原因導致的，王魯波等[10]認為天然葉黃素能夠促進黃顙魚生長很可能是由于添加濃度范圍能夠顯著刺激黃顙魚某些胃腸道消化酶發(fā)揮活性，從而提高了飼料的利用率和營養(yǎng)物質的消化率，而表現(xiàn)出了明顯促生長效果。

在錦鯉鑒賞中，體型指標最受關注，如常用肥滿度、臟體比、體長/體高、體重/體長等來評價錦鯉形體狀態(tài)，肥滿度表示魚體的肥瘦程度，臟體比則表示身體健康狀況，體長比體高則表示錦鯉體型，錦鯉常見的兩種體型為長紡錘形和寬紡錘形，其中長紡錘形的錦鯉更具有觀賞價值[11-12]。本試驗發(fā)現(xiàn)，相比對照組和葉黃素組，添加葉黃素酯后顯著提高了錦鯉體長/體高比值，使其體型更加修長，但目前關于黃金錦鯉形態(tài)鑒賞方面，還沒有具體的評判標準規(guī)定形體指標的一些理想范圍。

3.2 飼料添加葉黃素和葉黃素酯對錦鯉體成分的影響

魚體營養(yǎng)成分可直接體現(xiàn)魚類營養(yǎng)價值的高低。本試驗發(fā)現(xiàn)飼料中加入葉黃素和葉黃素酯提高了蛋白含量，但與對照組相比無顯著影響，這一點與王魯波等[10]發(fā)現(xiàn)飼料中添加75 mg/kg天然葉黃素可顯著提高黃顙魚的蛋白累積量這一結論不同，可能是由于試驗中所添加的天然葉黃素刺激黃顙魚某些蛋白酶發(fā)揮活性，從而提高了飼料的蛋白利用率。本試驗中魚體的脂肪含量上升，可能是由于葉黃素和葉黃素酯具有抗氧化功能，有效減少機體用于抵抗外界應激的能量消耗，增加機體內營養(yǎng)物質儲存，提高了魚體的營養(yǎng)成 分[13]，具體原因還有待進一步探討。

3.3 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉體色的影響

在有鰭魚類中蝦青素和葉黃素是分布最為廣泛的類胡蘿卜素，其在體表積累會使體表展現(xiàn)出不同的顏色[14]。已有研究表明，在飼料中添加葉黃素和螺旋藻的混合物后，雜交黃顙魚的黃度及飽和度有明顯升高的趨勢，紅度值有所下降但無明顯趨勢[15]；單獨添加適量濃度的葉黃素也可增強黃顙魚的體表顏色[10]；飼料添加200～300 mg/kg葉黃素會顯著提高金魚[16]、七彩神仙魚[14]體表黃度。本試驗也發(fā)現(xiàn)葉黃素或葉黃素酯添加量為200 mg/kg時黃金錦鯉呈現(xiàn)出黃度（*）值顯著增加，說明黃金錦鯉可積累葉黃素在體表呈現(xiàn)出黃色。添加葉黃素和葉黃素酯后，隨著養(yǎng)殖周期延長，黃金錦鯉體表的黃度逐漸升高，體表的紅度逐漸降低，但無顯著影響，對亮度無顯著效果。

本試驗還發(fā)現(xiàn)，添加葉黃素和葉黃素酯后，魚體體表的黃度均顯著高于對照組，但黃度值在28 d、42 d與14 d沒有顯著差異，說明葉黃素和葉黃素酯能快速讓魚體著色。在第14天時，葉黃素酯組著色效果略高于葉黃素組，可能是由于葉黃素以與脂肪酸結合的形式存在，穩(wěn)定性更強[17]，不易氧化分解。本試驗還發(fā)現(xiàn)葉黃素和葉黃素酯組魚體的黃度在28 d和42 d沒有顯著差異，可能是由體內兩種色素積累達到限度所致。

4 結論

本試驗條件下，添加200 mg/kg的葉黃素和葉黃素酯對黃金錦鯉的生長性能無顯著影響；但添加葉黃素酯顯著提高了錦鯉體長/體高比值，使錦鯉更加修長，提高觀賞價值。

葉黃素和葉黃素酯對錦鯉的紅度（*）和亮度（*）沒有顯著影響，但顯著提高了魚體的黃度（*），添加葉黃素和葉黃素酯14 d后，魚體的黃度值即可達到與42 d相似的效果。

葉黃素和葉黃素酯均能提高黃金錦鯉的體色，且葉黃素酯對黃金錦鯉著色效果更快、更顯著。

[1] 黃永裕，盧錫琴，張麗莉，等. 飼料中添加類胡蘿卜素對櫻花蝦體色的影響[J]. 飼料研究，2020，3（5）：28-31.

[2] 李建光，胡世然，劉霆. 四種增色劑對錦鯉的生長、形體、體色和抗氧化能力的影響[J]. 中國飼料，2009，（16）：33-36，44.

[3] 冷向軍，李小勤. 水產(chǎn)動物著色的研究進展[J]. 水產(chǎn)學報，2006（1）：138-143.

[4] 韓星星，王秋榮，葉坤，等. 葉黃素和蝦青素對大黃魚體色及抗氧化能力的影響[J]. 漁業(yè)研究，2018，40（2）：104-110.

[5] 王魯波，薛敏，王嘉，等. 天然葉黃素在魚類飼料中的應用[J]. 飼料工業(yè)，2012，30（12）：5-6.

[6] 趙典惠，吳秀麗，曾胡龍.天然葉黃素在水產(chǎn)飼料中的研究與應用[J]. 當代水產(chǎn)，2019，44（1）：94-96.

[7] 孫學亮，季延斌，白東清，等. 葉黃素混合物對血鸚鵡魚生長、體色和生理機能的影響[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學學報，2016，38（6）：743-749.

[8] 宋雪璐，李小勤，陳再忠，等. 葉黃素對七彩神仙魚生長和體色的影響[J]. 水產(chǎn)學報，2017，41（4）：567-570.

[9] 焦麗娟，賈新超，田洪，等. 葉黃素和葉黃素酯穩(wěn)定性對比[J]. 食品工業(yè)，2019，40（11）：178-180.

[10] 王魯波，薛敏，王嘉. 天然葉黃素對黃顙魚生長性能和皮膚著色的影響[J]. 水產(chǎn)學報，2012，36（7）1102-1110.

[11] 王廣軍. 錦鯉的質量判斷標準[J]. 北京水產(chǎn)，2000 （5）：50.

[12] 胡菊，李夢榮，馮彩，等. 錦鯉和龍鳳鯉的形態(tài)差異分析[J]. 河南水產(chǎn)，2019（3）：20-23.

[13]姚金明，陳秀梅，劉明哲，等. 蝦青素對大鱗副泥鰍幼魚生長，體成分及抗氧化指標的影響[J]. 西北農(nóng)林科技大學學報（自然科學版），2020，48（1）：9-15，32.

[14] 宋雪璐. 蝦青素、葉黃素和?；悄懰徕c在七彩神仙魚飼料中的應用研究[D]. 上海：上海海洋大學，2018.

[15] 劉翠，劉昊昆，朱曉鳴，等. 飼料中添加螺旋藻和葉黃素對黃顙魚“黃優(yōu)一號”生長、抗氧化能力和體色異常調控的比較研究[J]. 水生生物學報，2021，28（4）：1-21.

[16] 冷向軍，石英，李小勤. 飼料中添加蝦葉黃素對金魚的體色的影響[J]. 浙江大學學報，2010，36（2）：168-174.

[17] 李大婧，方桂珍，劉春泉，等. 葉黃素酯和葉黃素穩(wěn)定性的研究[J]. 林產(chǎn)化學與工業(yè)，2007（1）：112-116.

Effects of lutein and lutein ester on growth and body color of golden Koi,

Yin Jingkai, Lu Zhengyi, Zhang Yuanyuan, Cui Pei, Qiao Xiuting, Cheng ZhenyanCorresponding Author

（Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300392, China）

This experiment was conducted to study the effects of lutein and lutein ester on the growth and body color of Koi,. 200 mg/kg lutein and lutein ester were supplemented to the basal diet, and270 golden Koi with an average weight of 26.03±0.07 g were divided into three groups. Each group had three replicates. There were 30 fish in each tank. The culture experiment lasted for 42 d. The results showed that the addition of lutein and lutein ester had no significant effect on the growth of fish compared with the control group（＞0.05）, but the addition of lutein ester significantly improved the body indexes（body length/body height）of Koi（＜0.05）. After adding lutein, the body moisture content of fish decreased significantly, but the lipid content was significantly higher than that of the control group（＜0.05）. There was no significant difference in protein content among the treatment groups. The addition of lutein and lutein ester had no significant effect on the redness（）and brightness （）of Koi（＞0.05）, but significantly improved the yellowness（*）, the yellowness of each group increased gradually with the extension of the experiment period（＜0.05）. Generally, after adding lutein and lutein ester for 14 d, the yellowness value of fish could reach a similar effect as that of 42 d. Compared to the lutein, lutein ester had a faster and more significant coloring effect on golden koi.

lutein; lutein esters; Koi,; growth; body color

1008-5394（2023）02-0027-04

10.19640/j.cnki.jtau.2023.02.006

S963.73

A

2022-05-19

天津市科技幫扶提升項目（20ZYCGSN00360）；天津市規(guī)劃和自然資源局（ML2020－HP－F059）

尹靖凱（1999—），男，碩士在讀，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料研究。E-mail：2279719144@qq.com。

程鎮(zhèn)燕（1981—），女，副教授，博士，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料研究。E-mail：chengzhenyan2005@126.com。

責任編輯：張愛婷