常規(guī)氮肥及不同施加量秸稈對(duì)冬小麥田土壤理化性質(zhì)和微生物的影響

摘要：為研究秸稈配施氮肥對(duì)冬小麥農(nóng)田土壤真菌和土壤理化性質(zhì)的影響，檢測(cè)土壤理化性質(zhì)，分析土壤有機(jī)碳、全氮、速效鉀、硝態(tài)氮、銨態(tài)氮、有效磷、水溶性有機(jī)碳含量等土壤檢測(cè)指標(biāo)，利用高通量測(cè)序技術(shù)分析少量秸稈施用（S1）、大量秸稈施用（S2）、氮肥施用（NS0）、氮肥及少量秸稈施用（NS1）、氮肥及大量秸稈施用（NS2）與對(duì)照（S0）處理下冬小麥農(nóng)田土壤真菌群落結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，大量秸稈還田配施氮肥對(duì)土壤pH值影響顯著（Plt;0.05），同時(shí)促進(jìn)了土壤中有效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮的積累；在秸稈還田土壤中額外施加氮肥減少了土壤中可溶性有機(jī)碳的積累；大量秸稈還田配施氮肥降低了子囊菌門(mén)（Ascomycota）、糞殼菌綱（Sordariomycetes）菌群相對(duì)豐度；各處理真菌群落α多樣性中的Chao1指數(shù)存在邊緣顯著差異（0.05lt;Plt;0.1），真菌群落β多樣性存在顯著差異，大量秸稈還田配施氮肥顯著增加了真菌Bray-Curtis距離。綜上，大量秸稈配施氮肥顯著增加了土壤中有效磷、銨態(tài)氮積累量，并增加了土壤真菌群落Chao1指數(shù)、Bray-Curtis距離，同時(shí)降低了子囊菌門(mén)菌群和糞殼菌綱菌群相對(duì)豐度。

關(guān)鍵詞：秸稈還田；氮肥；土壤微生物；真菌；土壤理化性質(zhì)；α多樣性

中圖分類號(hào)：S512.1₊10.6" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）19-0232-07

收稿日期：2023-10-11

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：41775151）。

作者簡(jiǎn)介：李曉雨（1999—），女，浙江溫州人，碩士研究生，研究方向?yàn)檗r(nóng)田生態(tài)和土壤微生物。E-mail：13634223927@163.com。

通信作者：陳書(shū)濤，博士，副教授，主要從事生態(tài)系統(tǒng)碳氮循環(huán)與氣候變化研究。E-mail：chenstyf@aliyun.com。

秸稈施加顯著提高了農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)碳的積累，可實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)生產(chǎn)^［1］。秸稈還田具有多重效益，包括改良土壤理化性質(zhì)、保水控鹽、培肥增產(chǎn)等作用，有助于減緩耕層土壤水分的散失，降低無(wú)效蒸騰，同時(shí)增加土壤水分的有效供應(yīng)^［2-3］。研究發(fā)現(xiàn)，秸稈還田能夠增加土壤CO₂排放、水溶性有機(jī)碳含量和有機(jī)質(zhì)含量，提高麥玉輪作體系淺層土壤含水率、水分利用效率、氮肥偏生產(chǎn)力和氮肥農(nóng)學(xué)利用率^［4-5］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，秸稈還田對(duì)微生物群落結(jié)構(gòu)和功能有顯著影響，并增強(qiáng)了土壤微生物活性，改善土壤理化性質(zhì)，促進(jìn)根系的生長(zhǎng)與發(fā)育，從而增加了土壤CO₂的排放^［6-7］。而氮肥施加可以加強(qiáng)土壤通氣性、持水性等，改善土壤理化性質(zhì)，促進(jìn)植物生長(zhǎng)^［8］。有機(jī)肥的施用對(duì)微生物群落存在影響，顯著增加了微生物群落的多樣性，也略微改變了微生物群落的組成^［9］。少量研究表明，氮肥施加也對(duì)土壤細(xì)菌群落的活動(dòng)和組成有明顯的影響^［10］。

不同秸稈利用和施肥方式對(duì)土壤性質(zhì)和微生物群落有顯著影響^［11-12］。進(jìn)一步的土壤微生物研究顯示，秸稈還田搭配微生物菌劑和平衡施肥可以促進(jìn)酶活性的提高，進(jìn)而增加土壤微生物群落的物種多樣性和個(gè)體數(shù)目^［13］。秸稈與生物炭、化肥、氨化處理聯(lián)合使用，能夠進(jìn)一步提高土壤理化性質(zhì)的改良效果。而秸稈還田與氮肥運(yùn)籌對(duì)土壤水、碳、氮量及作物產(chǎn)量存在顯著影響，短期秸稈還田配合適度氮肥投入可提高土壤有機(jī)質(zhì)含量和微生物活性，有助于提高土壤肥力^［14］。土壤生物群和微生物群是土壤資本的關(guān)鍵部分，其對(duì)有機(jī)碳的加工是陸地碳循環(huán)的關(guān)鍵過(guò)程，由于微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性存在區(qū)域性變化，因此在不同土地利用類型中，其變化也不同^［15-16］。已有多數(shù)學(xué)者對(duì)有機(jī)無(wú)機(jī)配施處理下土壤理化性質(zhì)及土壤微生物的變化做出研究^［17］，但就秸稈配施氮肥處理對(duì)土壤環(huán)境影響的研究還較少。同時(shí)，大多數(shù)關(guān)于土壤環(huán)境微生物的研究都關(guān)注在土壤細(xì)菌群落方面，對(duì)土壤真菌群落的研究仍不足。本研究將通過(guò)對(duì)土壤真菌群落的分析，深入研究氮肥和秸稈施用對(duì)土壤環(huán)境的影響，為更好地平衡農(nóng)業(yè)生產(chǎn)與環(huán)境保護(hù)之間的關(guān)系，為農(nóng)業(yè)可持續(xù)性發(fā)展做出貢獻(xiàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

田間試驗(yàn)在南京信息工程大學(xué)農(nóng)業(yè)氣象試驗(yàn)站進(jìn)行，試驗(yàn)地點(diǎn)坐標(biāo)為32°12′N、118°42′E，海拔高度為18 m。該地區(qū)多年平均溫度為15.5 ℃，降水量達(dá)到1 062 mm，多年平均日照時(shí)數(shù)為1 902.5 h，無(wú)霜期長(zhǎng)達(dá)237 d。土壤類型為黃棕壤，質(zhì)地為壤質(zhì)粘土。在耕層（0～20 cm）土壤中，pH值為6.30，容重1.54 g/cm₃，田間持水量為21.91%，土壤有機(jī)質(zhì)含量為15.36 g/kg，全氮含量為0.81 g/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用區(qū)組設(shè)計(jì)，共設(shè)置6個(gè)處理，每個(gè)處理包含4個(gè)重復(fù)，共涉及24個(gè)小區(qū)。每個(gè)小區(qū)的面積為16 m₂（4 m×4 m），相鄰地塊之間設(shè)置了1 m寬的緩沖隔離區(qū)。研究對(duì)象主要為冬小麥，選用鎮(zhèn)麥12號(hào)（冬小麥）作為試驗(yàn)材料。冬小麥的播種始于2022年11月，收獲則在2023年5月進(jìn)行。在冬小麥播種前1周，提前進(jìn)行大豆秸稈的填埋操作。大豆秸稈在粉碎后進(jìn)行人工翻埋。對(duì)于S1和NS1處理小區(qū)，每個(gè)小區(qū)施加3.75 kg大豆秸稈；而S2和NS2處理小區(qū)則各施加7 kg大豆秸稈。1周后，各小區(qū)施加0.2 kg磷酸二氫鉀。對(duì)于NS0、NS1和NS2處理小區(qū)，額外施加1.005 kg尿素，并于同一天進(jìn)行冬小麥的播種。田間管理措施遵循當(dāng)?shù)氐某Ｒ?guī)做法。

1.3 土壤采樣及分析

1.3.1 采樣

于2023年4月，對(duì)24個(gè)小區(qū)進(jìn)行土壤采樣。選擇在各個(gè)小區(qū)的中心進(jìn)行樣品采集，采用螺旋土鉆，深入到土壤表層以下10 cm的位置，獲取土壤樣品。對(duì)這些樣品進(jìn)行多項(xiàng)土壤檢測(cè)指標(biāo)的分析，包括有機(jī)碳、全氮、速效鉀、硝態(tài)氮、銨態(tài)氮、有效磷、水溶性有機(jī)碳含量以及土壤微生物等。采用環(huán)刀法，對(duì)土壤容重和土壤孔隙度等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。采集微生物高通量測(cè)序樣品，使用土鉆深入到20 cm土層，采集過(guò)程中需戴好塑膠手套，避免土壤樣品與汗液接觸，各小區(qū)分別采集75 g土壤，裝入無(wú)菌袋中。同時(shí)進(jìn)行土壤理化性質(zhì)檢測(cè)的土壤采集，各小區(qū)分別采集200 g土壤樣品，同樣轉(zhuǎn)入無(wú)菌袋中。土壤性質(zhì)測(cè)定：采用玻璃電極法測(cè)定土壤pH值，采用重鉻酸鉀氧化-外加熱法測(cè)定土壤有機(jī)碳含量，采用凱氏定氮法測(cè)定土壤全氮含量，采用氟化銨-鹽酸溶液和碳酸氫鈉溶液浸提-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷含量，采用乙酸銨浸提-火焰光度計(jì)法測(cè)定土壤速效鉀含量，采用氯化鉀浸提-紫外分光光度法測(cè)定銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量，采用去離子水浸提-碳氮分析儀法測(cè)定土壤可溶性有機(jī)碳含量^［18-19］。

1.3.2 高通量測(cè)序分析

對(duì)土壤樣品進(jìn)行基因組DNA抽提后，采用1%瓊脂糖凝膠電泳對(duì)提取的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè)。接著，根據(jù)指定的測(cè)序區(qū)域，合成帶有barcode的特異引物。每個(gè)樣本進(jìn)行4次PCR重復(fù)，隨后將同一樣本的PCR產(chǎn)物混合，并使用2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。使用AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒進(jìn)行切膠回收PCR產(chǎn)物，并通過(guò)Tris-HCl洗脫，然后再次使用2%瓊脂糖電泳進(jìn)行檢測(cè)。PCR反應(yīng)采用TransStart Fastpfu DNA Polymerase，反應(yīng)體系為20 μL。完成真菌基因的PCR擴(kuò)增后，根據(jù)電泳初步定量結(jié)果，使用QuantiFluor^TM-ST藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)和定量。隨后，按照一定比例混合PCR產(chǎn)物。最終，采用匯總的DNA產(chǎn)物構(gòu)建Illumina PE250文庫(kù)，并進(jìn)行Illumina PE250測(cè)序。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Excel 2016、R Studio和Canoco 5軟件，進(jìn)行圖表的繪制，并借助SPSS 26.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。對(duì)6個(gè)不同處理在門(mén)水平上排名前8位的土壤真菌類群以及在綱、目水平上相對(duì)豐度排名前16位的土壤真菌類群進(jìn)行了平均值分析。通過(guò)R Studio，創(chuàng)建真菌群落相對(duì)豐度的堆積柱狀圖。使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素和雙因素方差分析，以解釋不同處理下土壤理化性質(zhì)及優(yōu)勢(shì)真菌門(mén)、綱、目之間的顯著性差異。同時(shí)，通過(guò)箱線圖分析土壤在不同處理下的真菌α多樣性，包括物種數(shù)、Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)、Chao1指數(shù)、PD指數(shù)和Pielou J指數(shù)等。使用箱線圖和基于主坐標(biāo)（PCoA）的分析展示不同處理下真菌群落的β多樣性^［20］。應(yīng)用冗余度分析（RDA）來(lái)描述真菌群落與土壤理化性質(zhì)之間的相關(guān)性^［21］。

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤理化性質(zhì)

2.1.1 土壤物理性質(zhì)

各處理之間的土壤容重、總孔度、毛管孔度、田間持水量存在顯著差異（Plt;0.05，下同）（表2）。雙因素方差分析表明，秸稈還田及秸稈還田配施氮肥顯著影響土壤容重和土壤總孔度，施加氮肥顯著影響了土壤毛管孔度（表3）。與S0樣本相比，NS1土壤容重顯著降低16.89%，NS1總孔度顯著增加18.22%。S2與NS2處理毛管孔度存在顯著差異，S1與NS1處理毛管孔度存在邊緣顯著差異（0.05lt;Plt;0.10，下同）。說(shuō)明施加氮肥有效降低了秸稈還田土壤毛管孔度，少量秸稈還田配施氮肥有效降低土壤容重、土壤總孔度。

2.1.2 土壤化學(xué)性質(zhì)

秸稈施加與氮肥施加這2個(gè)因素的雙因素方差分析結(jié)果表明，施加氮肥顯著影響了土壤pH值、全氮含量、銨態(tài)氮含量、硝態(tài)氮含量（表3）。由表2可知，S1和NS1及S2和NS2的pH值存在顯著差異。與S0相比，有效磷含量在NS1、NS2樣本中顯著增多，銨態(tài)氮、硝態(tài)氮含量在NS0、NS1、NS2樣本中顯著增加，且NS0和NS2樣本的銨態(tài)氮、硝態(tài)氮含量存在邊緣顯著差異。各處理樣品的可溶性有機(jī)碳含量單因素方差分析結(jié)果表明，S1和S2及S2和NS2之間存在邊緣顯著差異。表明相較于單施秸稈、氮肥處理，秸稈還田配施氮肥對(duì)土壤pH值的影響顯著，同時(shí)促進(jìn)了土壤中有效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮的積累，其中大量秸稈還田配施氮肥的影響效果最顯著；與低秸稈還田量土壤相比，高秸稈還田量土壤含有更多的可溶性有機(jī)碳，在秸稈還田土壤中額外施加氮肥減少了土壤中可溶性有機(jī)碳的積累。

2.2 土壤真菌群落

2.2.1 土壤真菌群落組成

冬小麥農(nóng)田土壤相對(duì)豐度最高的前3種真菌門(mén)為子囊菌門(mén)（Ascomycota）、毛霉門(mén)（Mucoromycot）、擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota），占土壤真菌門(mén)水平群落豐度55.78%（圖1-a）。6個(gè)處理門(mén)水平的最優(yōu)勢(shì)菌群均為子囊菌門(mén)，各處理相對(duì)豐度分別為S0（65.66%）、S1（74.02%）、S2（69.03%）、NS0（63.06%）、NS1（70.02%）、NS2（61.45%）。與S0相比，子囊菌門(mén)菌群在S1、S2、NS1中的相對(duì)豐度增加，而在NS0、NS2中的相對(duì)豐度降低。相對(duì)豐度最高的前3種真菌綱為糞殼菌綱（Sordariomycetes）、被孢霉綱（Mortierellomycetes）、座囊菌綱（Dothideomycetes），占土壤真菌綱水平群落豐度77.81%（圖1-b）。6個(gè)處理下綱水平的最優(yōu)勢(shì)菌群均為糞殼菌綱，各處理相對(duì)豐度分別為S0（49.82%）、S1（51.76%）、S2（48.77%）、NS0（44.61%）、NS1（46.10%）、NS2（37.25%）。與S0相比，S2、NS0、NS1、NS2相對(duì)豐度降低。相對(duì)豐度最高的前3種真菌目為被孢霉目（Mortierellales）、肉座菌目（Hypocreales）、糞殼菌目（Sordariales），占土壤真菌目水平群落豐度55.78%（圖1-c）。肉座菌目為S0、S1、S2處理目水平的最優(yōu)勢(shì)菌群，糞殼菌目為NS0處理目水平的最優(yōu)勢(shì)菌群，被孢霉目為NS1、NS2處理目水平的最優(yōu)勢(shì)菌群。表明秸稈填埋增加了土壤真菌門(mén)水平子囊菌門(mén)菌群在土壤中的相對(duì)豐度，而氮肥施加及大量秸稈還田配施氮肥降低了土壤真菌門(mén)水平子囊菌門(mén)及綱水平糞殼菌綱菌群在土壤中的相對(duì)豐度。

2.2.2 土壤真菌群落α多樣性

由圖2可知，與S0相比，S1、S2、NS0的物種數(shù)增多，NS1、NS2的物種數(shù)降低；與S0相比，除NS1樣本，其余處理樣本Chao1指數(shù)均有所增加，增加幅度為S2（13.42%）gt;S1（6.72%）gt;NS0（1.55%）gt;NS2（1.13%）；與S0相比，各處理Shannon指數(shù)、Pielou J、PD指數(shù)均有所增加，Simpson指數(shù)變化不顯著。真菌α多樣性中，Chao1指數(shù)處理S0和S1之間存在邊緣顯著差異。整體而言，秸稈還田配施氮肥一定程度上降低了土壤真菌群落物種數(shù)，同時(shí)增加了Chao1指數(shù)、Shanon指數(shù)、Simpson指數(shù)、Pielou J指數(shù)、PD指數(shù)，表明秸稈還田配施氮肥一定程度上增加了真菌群落α多樣性。

2.2.3 土壤真菌群落β多樣性

各處理真菌群落β多樣性存在顯著差異。與S0樣本相比，NS2樣本的真菌Bray-Curtis距離顯著降低，且S0和S1、NS1存在邊緣顯著差異性，S1、NS2和NS1存在邊緣顯著差異性。表明秸稈還田配施氮肥對(duì)真菌Bray-Curtis距離具有顯著影響，大量秸稈還田配施氮肥顯著增加了土壤真菌Bray-Curtis距離（圖3）。真菌基于Bray-Curtis距離的PCoA表明，真菌的群落結(jié)構(gòu)在PC1的解釋度為18%，PC2的解釋度為14%，累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到32%。從圖4中各樣點(diǎn)的分布情況可以明顯看出，6種處理的樣點(diǎn)分布呈現(xiàn)較大的分散性，這表明秸稈還田、氮肥施加以及秸稈還田配施氮肥顯著地改變了土壤微生物群落的結(jié)構(gòu)。

2.3 土壤真菌群落組成與土壤理化性質(zhì)的關(guān)系

真菌群落組成與土壤理化性質(zhì)的RDA分析結(jié)果（圖5）顯示，第1軸的解釋率為93.53%，第2軸的解釋率為5.34%，該結(jié)果表明前2軸足以反映不同處理土壤真菌群落與理化性質(zhì)之間的關(guān)系 并主要由第1軸決定。真菌優(yōu)勢(shì)目RDA結(jié)果中的物種被孢霉目、肉座菌目、糞殼菌目、格孢腔菌目（Pleosporales）、白冬孢酵母目（Leucosporidiales）、小叢殼目（Glomerellales）、刺盾炱目（Chaetothyriales）、柔膜菌目（Helotiales）與土壤理化性質(zhì)之間存在相關(guān)關(guān)系，貢獻(xiàn)值較大的土壤理化性質(zhì)的解釋率從大到小排序分別為田間持水量（39.3%）gt;pH值（36.2%）gt;有機(jī)質(zhì)含量（12.4%）gt;全氮含量（9.6%）gt;有效磷含量（2.5%）。表明土壤田間持水量、pH值、有機(jī)質(zhì)、全氮、有效磷含量對(duì)土壤真菌群落組成的影響最大。

3 討論

3.1 氮肥及不同施加量秸稈對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響

秸稈還田配施氮肥顯著降低了土壤容重，這與Luo等的研究結(jié)果^［22］相一致。此外，本研究發(fā)現(xiàn)與大量秸稈還田配施氮肥處理相比，少量秸稈配施氮肥處理對(duì)土壤容重影響更顯著，這可能是由于該處理下土壤結(jié)構(gòu)性更好；與單施秸稈處理相比，秸稈還田配施氮肥降低了土壤毛管孔度。在秸稈還田條件下，增施氮肥有助于改善土壤理化性質(zhì)^［23-24］。常規(guī)氮肥施加以及秸稈還田配施氮肥均顯著降低了土壤pH值，其中大量秸稈還田配施氮肥處理對(duì)土壤pH值影響效果更強(qiáng)，這與以往研究結(jié)果一致。Zhou等的研究表明，施加氮肥處理土壤pH值呈下降趨勢(shì)^［25］；王菲等研究也表明，普通復(fù)合肥降低了土壤的pH值^［26］。與單施氮肥相比，秸稈還田配施氮肥對(duì)提高土壤中有效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、可溶性有機(jī)碳等的含量效果更顯著，這與Zhao等指出的氮肥加秸稈改良對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響大于單獨(dú)氮添加的結(jié)果^［27］一致。本研究發(fā)現(xiàn)大量秸稈還田配施氮肥處理對(duì)促進(jìn)土壤有效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮積累最顯著，這可能是由于大量秸稈還田能夠提供更豐富的有機(jī)質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而刺激土壤微生物的活動(dòng)，加速微生物對(duì)秸稈和氮肥的分解，進(jìn)而促進(jìn)土壤速效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮的積累。

3.2 氮肥及不同施加量秸稈對(duì)土壤真菌群落的影響

本研究發(fā)現(xiàn)，施加氮肥有效降低了門(mén)水平最優(yōu)勢(shì)菌群子囊菌門(mén)、綱水平最優(yōu)勢(shì)菌群糞殼菌綱在土壤中的相對(duì)豐度，同時(shí)增施秸稈增加了最優(yōu)勢(shì)菌群群落豐度降低幅度，這與邢亞薇等的研究結(jié)果^［28］一致。氮肥施加條件下，土壤真菌門(mén)、綱水平最優(yōu)勢(shì)菌群相對(duì)豐度與秸稈還田量呈正相關(guān)。這可能是由于氮肥為真菌提供氮源，秸稈還田提供豐富的有機(jī)質(zhì)，改善土壤理化性質(zhì)和生物活性，為子囊菌門(mén)、糞殼菌綱菌群繁殖提供更適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。

氮肥施加條件下，大量秸稈還田對(duì)土壤真菌群落物種數(shù)的降低效果顯著。這可能是由于高秸稈還田率會(huì)增加土壤有機(jī)質(zhì)含量和碳氮比，可能導(dǎo)致真菌之間資源的競(jìng)爭(zhēng)加劇，同時(shí)秸稈配施氮肥可能改變土壤環(huán)境條件，不利于部分對(duì)環(huán)境變化敏感的菌群生長(zhǎng)。本研究發(fā)現(xiàn)，秸稈還田配施氮肥增加了土壤群落α多樣性中的Chao1指數(shù)、Shanon指數(shù)、Pielou J指數(shù)、PD指數(shù)，其中大量秸稈還田配施氮肥對(duì)Chao1指數(shù)影響顯著。秸稈還田配施氮肥對(duì)真菌群落β多樣性的影響顯著，這與武曉森等的研究結(jié)果^［29-30］一致。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，施加等量常規(guī)氮肥條件下，大量秸稈還田配施氮肥處理對(duì)土壤真菌Bray-Curtis距離的影響最顯著，這可能是由于大量秸稈還田能夠提供更豐富的碳源，同時(shí)改變土壤碳氮比，進(jìn)而影響真菌群落組成和多樣性。

4 結(jié)論

秸稈還田配施氮肥對(duì)土壤理化性質(zhì)存在顯著影響，少量秸稈配施氮肥可顯著降低土壤容重和總孔度，大量秸稈還田配施氮肥顯著降低土壤pH值。秸稈還田模式下增施氮肥可顯著促進(jìn)土壤中速效磷、銨態(tài)氮、硝態(tài)氮的積累，同時(shí)影響土壤真菌群落組成。大量秸稈配施氮肥施用降低了土壤真菌門(mén)、綱水平優(yōu)勢(shì)種的相對(duì)豐度和物種數(shù)，增加了真菌群落多樣性，顯著影響Chao1指數(shù)以及Bray-Curtis距離。

參考文獻(xiàn)：

［1］Liu C，Lu M，Cui J，et al. Effects of straw carbon input on carbon dynamics in agricultural soils：a meta-analysis［J］. Global Change Biology，2014，20（5）：1366-1381.

［2］陳 盛，黃 達(dá)，張 力，等. 秸稈還田對(duì)土壤理化性質(zhì)及水肥狀況影響的研究進(jìn)展［J］. 灌溉排水學(xué)報(bào)，2022，41（6）：1-11.

［3］高日平，趙沛義，韓云飛，等. 秸稈還田與氮肥運(yùn)籌對(duì)土壤水碳氮耦合及作物產(chǎn)量的影響［J］. 土壤，2021，53（5）：952-960.

［4］秦 越，李彬彬，武蘭芳. 不同耕作措施下秸稈還田土壤CO₂排放與溶解性有機(jī)碳的動(dòng)態(tài)變化及其關(guān)系［J］. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2014，33（7）：1442-1449.

［5］趙政鑫，王曉云，李府陽(yáng)，等. 秸稈還田配施穩(wěn)定性氮肥對(duì)麥玉輪作水氮利用的影響［J］. 農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào)，2023，54（6）：350-360.

［6］劉 軍，黃金花，楊志蘭，等. 長(zhǎng)期連作及秸稈還田棉田土壤呼吸變化特征［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2015，24（5）：791-796.

［7］Zhao Z B，He J Z，Geisen S，et al. Protist communities are more sensitive to nitrogen fertilization than other microorganisms in diverse agricultural soils［J］. Microbiome，2019，7（1）：33.

［8］李 榮，勉有明，侯賢清，等. 秸稈還田配施氮肥對(duì)土壤性質(zhì)及玉米水氮利用效率的影響［J］. 作物學(xué)報(bào)，2023，49（10）：2820-2832.

［9］Sun R B，Guo X S，Wang D Z，et al. Effects of long-term application of chemical and organic fertilizers on the abundance of microbial communities involved in the nitrogen cycle［J］. Applied Soil Ecology，2015，95：171-178.

［10］Enwall K，Nyberg K，Bertilsson S，et al. Long-term impact of fertilization on activity and composition of bacterial communities and metabolic guilds in agricultural soil［J］. Soil Biology and Biochemistry，2007，39（1）：106-115.

［11］Chen Z M，Wang H Y，Liu X W，et al. Changes in soil microbial community and organic carbon fractions under short-term straw return in a rice-wheat cropping system［J］. Soil and Tillage Research，2017，165：121-127.

［12］劉驍蒨，涂仕華，孫錫發(fā)，等. 秸稈還田與施肥對(duì)稻田土壤微生物生物量及固氮菌群落結(jié)構(gòu)的影響［J］. 生態(tài)學(xué)報(bào)，2013，33（17）：5210-5218.

［13］錢海燕，楊濱娟，黃國(guó)勤，等. 秸稈還田配施化肥及微生物菌劑對(duì)水田土壤酶活性和微生物數(shù)量的影響［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2012，21（3）：440-445.

［14］Tecon R，Or D. Biophysical processes supporting the diversity of microbial life in soil［J］. FEMS Microbiology Reviews，2017，41（5）：599-623.

［15］Spohn M，Klaus K，Wanek W，et al. Microbial carbon use efficiency and biomass turnover times depending on soil depth：implications for carbon cycling［J］. Soil Biology and Biochemistry，2016，96：74-81.

［16］黃 健，朱旭炎，陸 金，等. 獅子山礦區(qū)不同土地利用類型對(duì)土壤微生物群落多樣性的影響［J］. 環(huán)境科學(xué)，2019，40（12）：5550-5560.

［17］王 楷，史 雷，馬 龍，等. 有機(jī)無(wú)機(jī)配施下西北旱區(qū)麥田土壤N₂O的排放特征及微生物特性［J］. 環(huán)境科學(xué)，2021，42（12）：6038-6046.

［18］魯如坤. 土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法［M］. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社，1999：159-160.

［19］李太魁，郭戰(zhàn)玲，寇長(zhǎng)林，等. 提取方法對(duì)土壤可溶性有機(jī)碳測(cè)定結(jié)果的影響［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2017，26（11）：1878-1883.

［20］Li B，Zhang X X，Guo F，et al. Characterization of tetracycline resistant bacterial community in saline activated sludge using batch stress incubation with high-throughput sequencing analysis［J］. Water Research，2013，47（13）：4207-4216.

［21］Xiong W，Song Y Q，Yang K M，et al. Rhizosphere protists are key determinants of plant health［J］. Microbiome，2020，8（1）：27.

［22］Luo J Y，Huang W X，Zhang Q，et al. Distinct effects of hypochlorite types on the reduction of antibiotic resistance genes during waste activated sludge fermentation：insights of bacterial community，cellular activity，and genetic expression［J］. Journal of Hazardous Materials，2021，403：124010.

［23］龐黨偉，陳 金，唐玉海，等. 玉米秸稈還田方式和氮肥處理對(duì)土壤理化性質(zhì)及冬小麥產(chǎn)量的影響［J］. 作物學(xué)報(bào)，2016，42（11）：1689-1699.

［24］張斯梅，顧克軍，張傳輝，等. 麥秸全量還田下減氮施肥對(duì)粳稻產(chǎn)量形成和氮素吸收利用的影響［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2023，39（2）：360-367.

［25］Zhou J，Jiang X，Zhou B K，et al. Thirty four years of nitrogen fertilization decreases fungal diversity［J］. Soil Biology amp; Biochemistry，2016，95：135 -143.

［26］王 菲，袁 婷，谷守寬，等. 有機(jī)無(wú)機(jī)緩釋復(fù)合肥對(duì)不同土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響［J］. 環(huán)境科學(xué)，2015，36（4）：1461-1467.

［27］Zhao S C，Qiu S J，Xu X P，et al. Change in straw decomposition rate and soil microbial community composition after straw addition in different long-term fertilization soils［J］. Applied Soil Ecology，2019，138：123-133.

［28］邢亞薇，李春越，劉 津，等. 長(zhǎng)期施肥對(duì)黃土旱塬農(nóng)田土壤微生物豐度的影響［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2019，30（4）：1351-1358.

［29］武曉森，杜廣紅，穆春雷，等. 不同施肥處理對(duì)農(nóng)田土壤微生物區(qū)系和功能的影響［J］. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2014，20（1）：99-109.

［30］徐學(xué)池，蘇以榮，王桂紅，等. 秸稈還田配施氮肥對(duì)喀斯特農(nóng)田微生物群落及有機(jī)碳礦化的影響［J］. 環(huán)境科學(xué)，2019，40（6）：2912-2919.