陳 琦

吉林省長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院(130021)

牛黃上清膠囊是由人工牛黃、薄荷、菊花等19味中藥組成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱瀉火、散風(fēng)止痛的功效。臨床上用于治療熱毒內(nèi)盛、風(fēng)火上攻所致的頭痛眩暈、目赤耳鳴、咽喉腫痛、口舌生瘡、牙齦腫痛、大便燥結(jié)[1]。具有服用劑量少，療效肯定等優(yōu)點(diǎn)。本品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中華人民共和國(guó)藥典》(2005版)[1]中。本品中人工牛黃含有效成份膽酸，其含量的測(cè)定是控制人工牛黃質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)，但是均未收錄牛黃上清膠囊中膽酸的含量測(cè)定方法，只含膽酸的定性鑒別。為能更好地控制本制劑質(zhì)量，本文采用紫外分光光度法測(cè)定牛黃上清膠囊中膽酸的含量。

1 儀器與試劑

德國(guó)賽多利斯儀器有限公司BP211D型十萬(wàn)分之一電子天平，美國(guó)瓦里安公司紫外可見分光光度計(jì)(Cary 50 UV-Vis)，電熱恒溫水浴鍋(江蘇南通縣通海電器廠)等；膽酸標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)批號(hào)為0078-9312，牛黃上清膠囊(A藥業(yè)，批號(hào)為090813、090821、090830)，硫酸溶液(取水65mL，加濃硫酸50mL，搖勻，即得)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱取膽酸標(biāo)準(zhǔn)品25mg，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸使溶解，并加至刻度，搖勻。精密吸取5mL，置另一25mL量瓶中，加60%冰醋酸至刻度，搖勻，備用。

2.1.2 樣品溶液制備

取牛黃上清膠囊10粒，精密稱定，求得平均裝量，取內(nèi)容物研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于5粒內(nèi)容物的重量，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸適量，置70℃水浴中不斷振搖，加熱20min，取出，放冷，過(guò)濾，加60%冰醋酸至刻度，搖勻，備用。

表1 精密度考察

表2 重現(xiàn)性考察

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 mg

表4 牛黃上清片中每片膽酸的含量

2.2 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

精密吸取膽酸標(biāo)準(zhǔn)液1mL，置具塞刻度試管中，加硫酸溶液14.0mL，搖勻，置70℃水浴中加熱10min，取出放冷，以相應(yīng)的試劑為空白，掃描，200～800nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定吸收光譜。結(jié)果膽酸對(duì)照品溶液在385nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，故以385nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密吸取膽酸標(biāo)準(zhǔn)液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置具塞刻度試管中，加60%醋酸到l.0mL，再加硫酸溶液14.0mL，搖勻，置70℃水浴中加熱10min，取出放冷，照分光光度法(附錄Ⅴ)在385nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度A，以A為縱座標(biāo)，濃度C為橫座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y = 1.7993 X + 0.0135，r = 0.9996。結(jié)果表明，膽酸濃度在0.0386～0.1980mg/mL范圍內(nèi)濃度與吸收度有良好的線性關(guān)系。

2.4 精密度實(shí)驗(yàn)

取膽酸對(duì)照品溶液，按上述的方法重復(fù)測(cè)定6次吸光度的RSD為0.20%，見表1。

2.5 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別精密吸取膽酸標(biāo)準(zhǔn)液0.6mL 6份，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作，測(cè)得吸光度的RSD為0.23%，加表2。

2.6 溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)

取標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的膽酸溶液，按上述條件每間隔20min測(cè)定一次吸收度，結(jié)果表明在5h內(nèi)吸收值穩(wěn)定。

2.7 回收率測(cè)定

精密稱取樣品細(xì)粉約5粒重量及膽酸標(biāo)準(zhǔn)品約0.3mg，置25mL量瓶中，按樣品溶液制備項(xiàng)下操作，所得濾液按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下測(cè)定，結(jié)果見表3。

2.8 樣品測(cè)定

取3批樣品，按樣品溶液制備項(xiàng)下操作，平行制備3份，所得濾液按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下測(cè)定吸收度，并根據(jù)回歸方程計(jì)算每粒牛黃上清膠囊中膽酸含量(mg)，見表4。

3 討 論

按方法同時(shí)制備空白樣品溶液，在200～800nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，無(wú)紫外吸收，不干擾膽酸的含量測(cè)定，故選擇385nm波長(zhǎng)作為膽酸的含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。

牛黃上清膠囊的原標(biāo)準(zhǔn)中無(wú)膽酸的含量測(cè)定，為更好控制該品種的質(zhì)量，經(jīng)多次測(cè)定，牛黃上清膠囊中膽酸的含量限度為不低于0.34mg/片。

通過(guò)上述方法學(xué)考察，建立了牛黃上清膠囊中膽酸的含量測(cè)定方法，使其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更趨嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)完整，并且該方法簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，回收率高，能有效控制牛黃上清膠囊的質(zhì)量。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典.一部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.