趙曉玫 周術(shù)濤 劉雅萍 王國杰 劉漢石

(大連普瑞康生物技術(shù)有限公司 遼寧大連 116001)

有研究表明野生雪蓮具有增強(qiáng)運(yùn)動耐力、抗體力性疲勞和消除疲勞的作用,但對天山雪蓮培養(yǎng)物的抗疲勞評估的研究極少。本研究探討天山雪蓮培養(yǎng)物對小鼠的抗疲勞作用,為今后研究緩解體力疲勞保健產(chǎn)品提供資料。

1 材料與方法

1.1 樣品

雪蓮培養(yǎng)物膠囊,內(nèi)容物為淺褐色粉末。由大連普瑞康生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

選用吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供的ICR清潔級雄性小鼠,體重18～22g。生產(chǎn)許可證號:SCXK-(吉)2003-0001。

1.3 劑量選擇

廠家推薦成人(體重以60kg計(jì))每天攝入2次,每次4粒,每粒300mg(其每粒配方為天山雪蓮培養(yǎng)物12mg,淀粉288mg)定型產(chǎn)品,即為40mg/kg BW d,以廠家日推薦成人攝入量的1、10、和30倍設(shè)置灌胃劑量,即40、400、1200mg/kg BW d,各劑量組以蒸餾水稀釋,蒸餾水作陰性對照組。各組小鼠灌胃量均為0.2mL/10g BW d,連續(xù)灌胃30d。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 負(fù)重游泳試驗(yàn) 末次給予受試物30min后,置小鼠在游泳箱中游泳,水深約30cm,水溫(25±1)℃,鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡時間,作為小鼠游泳時間(min)。

1.4.2 血清尿素測定 末次給予受試物30min。在溫度為(30±0.5)℃的水中游泳90min,休息60min摘眼球采血,取血清,進(jìn)行尿素含量測定(試劑盒:北京中生生物工程技術(shù)公司提供),采用意大利產(chǎn)AUTOLAB—PM4000/3全自動生化分析儀測定。

1.4.3 肝糖原測定 末次給予受試物30min處死小鼠取肝臟,經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干,精確稱取肝臟75mg。每管加入225μL試劑盒提供的堿溶液,用簿膜封住管口,扎一透氣孔,沸水溶20min。冷卻后加入7.2mL蒸餾水,充分混勻。按試劑說明書操作加入顯色劑(試劑盒:南京市建成生物工程研究所提供),沸水浴5min,用722分光光度計(jì)在620nm波長進(jìn)行比色測定。按說明書提供的公式計(jì)算肝糖原。

1.4.4 血乳酸測定 末次給予受試物30min后采血20μL,再在溫度為(30±0.5)℃的水中不負(fù)重游泳10min,分別于游泳后立即(游泳后0min)和游泳后休息20min各采血20μL,采用山東省科學(xué)院生物研究所生產(chǎn)的生物傳感分析儀測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值(溶血劑及測定液均由該所提供)。以3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積判斷結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 10.0軟件方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

經(jīng)口給予雪蓮培養(yǎng)物膠囊30d,各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與陰性對照組比較無顯著性差異(P＞0.05),中、高劑量組游泳時間長于陰性對照組,小鼠游泳后血清尿素低于陰性對照組,且差異有顯著性(P＜0.05),說明雪蓮培養(yǎng)物膠囊能延長小鼠負(fù)重游泳時間、抑制小鼠游泳后血清尿素升高而對小鼠增重?zé)o影響。各實(shí)驗(yàn)組肝糖原含量與陰性對照組相比無顯著性差異(P＜0.05),說明雪蓮培養(yǎng)物膠囊對肝糖原儲備及小鼠增重未見影響。中高劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積與陰性對照組比較差異有顯著性(P＜0.05),說明雪蓮培養(yǎng)物膠囊能減少游泳時血乳酸的產(chǎn)生而對小鼠增重?zé)o影響。

經(jīng)口給予小鼠雪蓮培養(yǎng)物膠囊40、400、1200mg/kg BW d,連續(xù)灌胃30d,與陰性對照組比較400、1200mg/kg BW d劑量組能延長小鼠負(fù)重游泳時間,減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生,減少游泳時血乳酸的產(chǎn)生,各實(shí)驗(yàn)組對肝糖原儲備均未見影響。由此判定雪蓮培養(yǎng)物膠囊具有緩解體力疲勞功能。

3 討論

在運(yùn)動中,機(jī)體運(yùn)動能力的降低是由于體力性疲勞的出現(xiàn)所致。對抗體力性疲勞包括兩大方面,即延緩體力性疲勞的產(chǎn)生和促進(jìn)體力性疲勞的消除。運(yùn)動耐力的提高是抗疲勞能力增強(qiáng)的最有力表現(xiàn),游泳時間的長短可以反映運(yùn)動疲勞的程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,雪蓮培養(yǎng)物組小鼠游泳時問延長以及劇烈運(yùn)動后血清尿素氮、血乳酸的含量降低,正是機(jī)體耐力增加和對劇烈運(yùn)動而產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物分解能力增加的表現(xiàn),提示雪蓮培養(yǎng)物具有延緩疲勞產(chǎn)生的作用;此外,安靜后小鼠血乳酸含量降低明顯,說明機(jī)體對乳酸的分解加速,提示雪蓮培養(yǎng)物具有促進(jìn)消除疲勞的作用。

[1]趙莉,王曉玲.新疆雪蓮的化學(xué)成分、藥理作用及其臨床應(yīng)用[J].西南民族大學(xué)學(xué)報(bào),2003.

[2]朱磊,王振宇.黑木耳多糖對小鼠抗疲勞作用的研究[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2008,30(4).