伍健萍， 王昌祿， 陳勉華， 王玉榮， 李風(fēng)娟

(天津科技大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/食品工程與生物技術(shù)學(xué)院，天津 300457)

紅曲霉液態(tài)發(fā)酵多糖工藝條件的優(yōu)化

伍健萍， 王昌祿， 陳勉華， 王玉榮， 李風(fēng)娟

(天津科技大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/食品工程與生物技術(shù)學(xué)院，天津 300457)

研究了紅曲霉產(chǎn)多糖的液態(tài)發(fā)酵條件，得出優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成為:蔗糖45 g/L，酵母粉4.5 g/L，KH2PO4·3H2O 3.5 g/L，MgSO4·7H2O 0.85 g/L．通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，得到紅曲霉N產(chǎn)多糖的優(yōu)化發(fā)酵工藝條件為:種齡30 h，接種量7.5%，發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH 5.75，裝液量162.5 mL/1 000 mL三角瓶，發(fā)酵時(shí)間84 h．在此條件下，紅曲霉液態(tài)發(fā)酵的多糖質(zhì)量濃度達(dá)999.8 mg/L，比優(yōu)化前的684.2 mg/L提高46.1%．

紅曲霉;多糖;液態(tài)發(fā)酵;條件優(yōu)化

紅曲霉(Monascus sp．)是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品——紅曲的生產(chǎn)菌種．紅曲霉接種于米飯培養(yǎng)基經(jīng)發(fā)酵后的產(chǎn)物稱為紅曲，也稱為神曲或丹曲，在我國(guó)有上千年的應(yīng)用歷史，主要用作食品發(fā)酵劑、著色劑、防腐劑、增香劑及中藥配伍．

多糖是一類由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成的天然高分子多聚物，通常是細(xì)胞表面信號(hào)識(shí)別、抗原抗體反應(yīng)、細(xì)胞間信息傳遞和感受的關(guān)鍵因子［1］，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗癌、抗氧化、抗病毒、降血糖、降血脂等藥理作用［2－10］．紅曲霉能產(chǎn)Monacolin K、GABA等多種生物活性物質(zhì)，Tian Jun等［11］于1998年發(fā)現(xiàn)了紅曲的另一種生物活性成分——紅曲多糖，對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果表明，紅曲多糖具有抗腫瘤、提高免疫力等多種功效［12－14］．目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于紅曲霉產(chǎn)多糖的研究較少，目前尚未實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)．針對(duì)紅曲多糖液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量不高的現(xiàn)狀，本文利用已篩選的1株高產(chǎn)紅曲多糖菌種，對(duì)紅曲霉搖瓶發(fā)酵產(chǎn)多糖進(jìn)行了條件優(yōu)化研究，以期為紅曲多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的基礎(chǔ)．

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)菌種

紅曲霉N(Monascus sp．N)，由天津科技大學(xué)食品生物技術(shù)研究室保存．

1.2 材料與儀器

1.2.1 主要試劑

葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、酵母粉、瓊脂粉、NaNO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4·3H2O、鉬 酸 銨、NH4Cl、NH4NO3、(NH4)2SO4，均為分析純，天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠;麥芽糖、木糖、糊精，均為分析純，北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;濃硫酸(分析純)，天津市化學(xué)試劑三廠;苯酚(分析純)，天津市永大化學(xué)試劑有限公司;甘油(分析純)，天津市化學(xué)試劑一廠．

1.2.2 主要儀器

T1000型電子天平，常熟雙杰測(cè)試儀器廠;LSB50L型立式壓力蒸氣滅菌鍋，上海華線醫(yī)用核子儀器有限公司;VS－840－2型潔凈工作臺(tái)，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司;HH．BII．600型電熱恒溫培養(yǎng)箱，天津試驗(yàn)儀器廠;MP－220型酸度計(jì)，梅特勒托利多儀器公司;ZHWY－100C型恒溫培養(yǎng)振蕩器，上海保興生物設(shè)備工程有限公司;TDL－5－A型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠;DK－S26型電熱恒溫水浴鍋，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;Aglient 8453型紫外可見分光光度計(jì)，Aglient公司．

1.3 培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)基:麥芽汁(10°Bé)，瓊脂 2%，pH 自然，121℃滅菌20 min，制備斜面．

種子培養(yǎng)基:葡萄糖7%，蛋白胨3%，NaNO30.2%，MgSO4·7H2O 0.1%，pH 自然，121 ℃ 滅菌 20 min．

發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基:蔗糖4%，蛋白胨0.4%，KH2PO4·3H2O 0.3%，MgSO4·7H2O 0.08%，pH 5.0，121 ℃滅菌20 min．

發(fā)酵培養(yǎng)基:在發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，分別添加40 g/L的葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、木糖、甘油和糊精為碳源，作為碳源種類篩選培養(yǎng)基;對(duì)優(yōu)化后的蔗糖為碳源，以質(zhì)量濃度 20，25，30，35，40，45，50，55，60 g/L的培養(yǎng)基作為碳源質(zhì)量濃度優(yōu)化培養(yǎng)基．在發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，分別添加4 g/L的NaNO3、NH4Cl、蛋白胨、酵母粉、NH4NO3和(NH4)2SO4為氮源，作為氮源種類篩選培養(yǎng)基;對(duì)優(yōu)化后的酵母粉為氮源，以質(zhì)量濃度 2，2.5，3，3.5，4，4.5，5，5.5，6 g/L 的培養(yǎng)基作為氮源優(yōu)化培養(yǎng)基．

1.4 發(fā)酵方法

孢子懸浮液的制備:在紅曲霉N試管斜面中加入15 mL無菌水，用無菌小勺輕刮長(zhǎng)滿菌絲體的培養(yǎng)基斜面，得到孢子懸浮液．

種子的培養(yǎng):取紅曲霉N孢子懸浮液10 mL，接種到種子培養(yǎng)基中，1 000 mL三角瓶中裝200 mL種子培養(yǎng)基，在32℃往復(fù)式搖床中130 r/min培養(yǎng)24 h．

發(fā)酵條件優(yōu)化:按體積分?jǐn)?shù)為8%接種量，將紅曲霉N種子液接入到發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中(1 000 mL瓶中裝200 mL發(fā)酵培養(yǎng)基)，180 r/min，33℃培養(yǎng)84 h．測(cè)定不同培養(yǎng)基組成及不同發(fā)酵條件下紅曲多糖的產(chǎn)量．

1)不同碳源發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化:在發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，分別添加40 g/L的葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、木糖、甘油和糊精，考察碳源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

2)不同蔗糖濃度發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化:在前期優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，分別添加 20，25，30，35，40，45，50，55，60 g/L質(zhì)量濃度的蔗糖，考察碳源質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

3)不同氮源發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化:在前期優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，分別添加4 g/L的NaNO3、NH4Cl、蛋白胨、酵母粉、NH4NO3和(NH4)2SO4，考察氮源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

4)不同酵母粉濃度發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化:在前期優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，分別添加 2，2.5，3，3.5，4，4.5，5，5.5，6 g/L質(zhì)量濃度的酵母粉，考察氮源質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

5)不同碳氮摩爾比的優(yōu)化:培養(yǎng)基中蔗糖質(zhì)量濃度為45 g/L，含碳濃度為1.578 9 mol/L;酵母粉(ω(N)=9.0%)為4.5 g/L，含氮濃度為0.0289 mol/L，則每升培養(yǎng)基中n(C)∶n(N)為54.6∶1．在前期優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，分別選取 34.7∶1，43.7∶1，54.6∶1，68.3∶1，85.8∶1的碳氮摩爾比，考察碳氮摩爾比對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

6)不同礦質(zhì)元素的優(yōu)化:在前期優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，KH2PO4·3H2O的質(zhì)量濃度分別選用1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 g/L，MgSO4·7H2O的質(zhì)量濃度分別選用 0.60，0.65，0.70，0.75，0.80，0.85，0.90，0，95，1.00 g/L，考察礦質(zhì)元素對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響．

1.5 測(cè)定方法

1.5.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

采用苯酚－濃硫酸分光光度法［15－17］．吸取0.1 mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 mL，分別置于 25 mL 比色管中，補(bǔ)蒸餾水至2.0 mL，各加入6%苯酚溶液1.0 mL，搖勻后加入濃硫酸5 mL，立即搖勻，置沸水浴中煮沸15 min，冷卻，以試劑空白溶液為參比，1 cm比色皿，用分光光度計(jì)在490 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值．以O(shè)D490為橫坐標(biāo)、葡萄糖濃度為縱坐標(biāo)繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性回歸求得總糖的曲線方程．將待測(cè)液的OD490對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算紅曲霉發(fā)酵液的多糖含量．

1.5.2 樣品的測(cè)定

紅曲霉發(fā)酵液中總糖濃度的測(cè)定:苯酚－濃硫酸分光光度法．

紅曲霉發(fā)酵液中殘余蔗糖的測(cè)定:鉬藍(lán)光度法［18］．

具體測(cè)定過程:每12 h從搖床中取出一瓶紅曲霉N發(fā)酵液，取10 mL發(fā)酵液進(jìn)行抽濾．濾液加蒸餾水定容至10 mL，轉(zhuǎn)至容積為50 mL的離心管，加

4倍體積95%的工業(yè)酒精，搖勻后放冰箱中靜置12 h．4 000 r/min離心10 min，棄上清液后加10 mL蒸餾水溶解沉淀，加0.2 g活性炭，搖勻后靜置6 h去色素．4 000 r/min離心10 min，棄活性炭后得上清液，取0.1～0.5 mL上清液于比色管中(使最終稀釋液吸光值落在0.1～0.9)，以蒸餾水定容至2 mL，加入1 mL 6%的苯酚溶液搖勻后延管壁緩慢注入濃硫酸5 mL，立即搖勻，置于沸水浴中保溫15 min，冷卻至室溫后于490 nm測(cè)OD值，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總糖含量．樣品中總糖含量計(jì)算公式為:

式(1)中:X1為發(fā)酵液中總糖含量，單位為mg/L;A1為苯酚－硫酸法測(cè)樣品所得OD值;V1為吸取去色素后的上清液的體積，單位為mL．

鉬藍(lán)光度法所測(cè)殘余蔗糖濃度為X0．

紅曲霉發(fā)酵液中積累多糖的濃度計(jì)算公式為:

紅曲霉液態(tài)發(fā)酵菌體量的測(cè)定:將測(cè)多糖時(shí)剩余的發(fā)酵液抽濾，得菌體，合并測(cè)多糖時(shí)抽濾所得菌體，置60℃恒溫烘箱里直至重量不再變化，稱重．

2 結(jié)果與分析

2.1 苯酚－硫酸法測(cè)總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

回歸得到測(cè)總糖的曲線方程(見圖1)為:y=0.0856x+0.0013，R2=0.999 2．說明方程在糖質(zhì)量濃度為0.01～0.07 g/mL之間的線性關(guān)系良好，可根據(jù)該公式計(jì)算得到紅曲霉N發(fā)酵液中的總糖含量．

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig．1 Standard curve of glucose solution

2.2 紅曲霉產(chǎn)多糖的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化

2.2.1 碳源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響

紅曲霉能夠利用單糖、雙糖、多糖等多種碳源進(jìn)行生長(zhǎng)代謝．按1.4(1)方法，考察不同碳源對(duì)總糖及紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響，考慮到不同碳源定量測(cè)定的復(fù)雜性，以總糖量作為碳源篩選的指標(biāo)，結(jié)果見圖2．

圖2 碳源對(duì)紅曲霉N總糖產(chǎn)量的影響Fig．2 Effects of carbon sources on total sugar yield of Monascus sp．N

由圖2可知，以蔗糖為碳源時(shí)，紅曲霉N的總糖產(chǎn)量最高，達(dá)830.6 mg/L，同時(shí)蔗糖來源廣泛，且價(jià)格便宜，可作為較理想的生產(chǎn)用碳源．以下實(shí)驗(yàn)選用蔗糖為分批發(fā)酵時(shí)的最佳碳源．

碳源質(zhì)量濃度對(duì)產(chǎn)物的產(chǎn)量也有較大的影響．按1.4(2)方法，考察蔗糖不同質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響，分批發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3．

圖3 蔗糖的質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Fig．3 Effects of the concentration of sucrose on polysaccharide yield of Monascus sp．N

由圖3可知，蔗糖質(zhì)量濃度的不同對(duì)紅曲多糖產(chǎn)量有較大影響，蔗糖質(zhì)量濃度低于45 g/L時(shí)，紅曲多糖產(chǎn)量隨蔗糖質(zhì)量濃度的增加而增加，最高可達(dá)718.4 mg/L，而蔗糖質(zhì)量濃度高于45 g/L時(shí)，不利于紅曲多糖的生產(chǎn)．以下實(shí)驗(yàn)選用45 g/L的蔗糖為分批發(fā)酵時(shí)的較佳碳源質(zhì)量濃度．

2.2.2 氮源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響

氮源是影響紅曲霉生長(zhǎng)代謝的一個(gè)重要因素，按1.4(3)方法，考察不同氮源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響，結(jié)果見圖4．

圖4 氮源對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Fig．4 Effects of nitrogen sources on polysaccharide yield of Monascus sp．N

由圖4可知，在上述6種氮源中，酵母粉利于紅曲多糖的產(chǎn)生．因?yàn)楹线m的氮源濃度既可保證菌體的生長(zhǎng)代謝，又可避免菌體量過大或過小從而影響多糖的合成，因此有必要考察不同氮源質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響，按1.4(4)方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖5．

圖5 酵母粉的質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Fig．5 Effects of concentration of yeast extract powder on polysaccharide yield of Monascus sp．N

由圖5可知，隨酵母粉質(zhì)量濃度的增加，紅曲多糖產(chǎn)量逐步上升，當(dāng)酵母粉質(zhì)量濃度為4.5 g/L時(shí)，紅曲多糖產(chǎn)量達(dá)最高為793.6 mg/L．當(dāng)酵母粉濃度繼續(xù)增高，利于菌體的生長(zhǎng)但多糖產(chǎn)量卻下降．以下實(shí)驗(yàn)選用4.5 g/L的酵母粉為分批發(fā)酵時(shí)的較佳氮源質(zhì)量濃度．

2.2.3 碳氮摩爾比對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響

碳氮摩爾比對(duì)微生物的生長(zhǎng)和產(chǎn)物形成常有很大的影響，碳氮摩爾比不當(dāng)會(huì)妨礙菌絲對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收．碳氮摩爾比偏小，會(huì)導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)旺盛，造成菌體提前衰老自溶;碳氮摩爾比偏大，菌體則會(huì)生長(zhǎng)緩慢，產(chǎn)率下降．不同的真菌對(duì)碳源和氮源的要求不同，本實(shí)驗(yàn)在原有碳氮摩爾比基礎(chǔ)上研究碳氮的摩爾比對(duì)紅曲多糖發(fā)酵的影響．

按1.4(5)方法，考察不同碳氮摩爾比對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表1．

表1 碳氮摩爾比對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Tab．1 Effects of ratio of n(C)∶n(N)on polysaccharide yield of Monascus sp．N

由表1 可知，n(C)∶n(N)為 54.6∶1時(shí)，紅曲多糖的產(chǎn)量最高達(dá)793.5 mg/L．以下實(shí)驗(yàn)選用54.6∶1為分批發(fā)酵時(shí)的較佳碳氮物質(zhì)的量比．

2.2.4 礦質(zhì)元素對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響

菌體在生長(zhǎng)代謝時(shí)需一定量的礦質(zhì)元素，其中P、S、K、Mg 4種礦質(zhì)元素必須通過外界添加才可達(dá)到菌體生長(zhǎng)所需濃度．對(duì)于這幾種元素來源，首選KH2PO4·3H2O 和 MgSO4·7H2O，它們可以同時(shí)提供這4種元素．因此，有必要通過實(shí)驗(yàn)確定KH2PO4·3H2O和MgSO4·7H2O的最宜添加量，按1.4(6)方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖6和圖7．

圖6 KH2PO4·3H2O的質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Fig．6 Effects of concentration of KH2PO4·3H2O on polysaccharide yield of Monascus sp．N

由圖6可知，當(dāng)KH2PO4·3H2O為3.5 g/L時(shí)，紅曲多糖產(chǎn)量達(dá)到最高，為 815.4mg/L．MgSO4·7H2O的優(yōu)化選用3.5 g/L為分批發(fā)酵時(shí)KH2PO4·3H2O的較佳質(zhì)量濃度．

由圖7可知，當(dāng)MgSO4·7H2O為0.85 g/L時(shí)，紅曲多糖產(chǎn)量達(dá)到最高為829.6 mg/L．以下實(shí)驗(yàn)選用0.85 g/L為分批發(fā)酵時(shí)MgSO4·7H2O的較佳質(zhì)量濃度．

圖7 MgSO4·7H2O的質(zhì)量濃度對(duì)紅曲霉N多糖產(chǎn)量的影響Fig．7 Effects of concentration of MgSO4·7H2O on polysaccharide yield of Monascus sp．N

2.3 紅曲霉產(chǎn)多糖的液態(tài)發(fā)酵工藝條件優(yōu)化

采用正交試驗(yàn)方法．以上述優(yōu)化的培養(yǎng)基成分為基礎(chǔ)，進(jìn)行了發(fā)酵工藝條件的單因素實(shí)驗(yàn)，基于單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以種齡、接種量、培養(yǎng)基初始pH和裝液量進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)．

正交試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見表2．

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表Tab．2 Factors and levels of orthogonal design

正交試驗(yàn)結(jié)果與分析見表3．

由表3可知，較優(yōu)水平為5號(hào)組合，即A2B2C3D1;按照極差R的大小確定各因素的主次順序，為A＞C＞B＞D，即種齡＞培養(yǎng)基初始pH＞接種量＞裝液量，種齡對(duì)紅曲多糖的產(chǎn)量影響最大，然后是培養(yǎng)基初始pH，其次是接種量，最后是裝液量;根據(jù)k值分析得出的較佳組合為A2B2C3D3，未出現(xiàn)在9組試驗(yàn)中．經(jīng)驗(yàn)證，A2B2C3D1組合更優(yōu)于 A2B2C3D3組合．因此紅曲霉N液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)多糖的優(yōu)選工藝條件為:種齡30 h，接種量7.5%，發(fā)酵培養(yǎng)基初始 pH 5.75，1 000 mL三角瓶裝液量162.5 mL，發(fā)酵時(shí)間84 h．在此條件下，紅曲霉N搖瓶液態(tài)發(fā)酵的多糖質(zhì)量濃度達(dá)999.8 mg/L，比優(yōu)化前的684.2 mg/L高46.1%．

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果分析Tab．3 Experiment arranged by orthogonal design and results

3 結(jié)論

根據(jù)實(shí)驗(yàn)得出紅曲霉N優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基為:蔗糖 45 g/L、酵母粉 4.5 g/L、KH2PO4·3H2O 3.5 g/L、MgSO4·7H2O 0.85 g/L．優(yōu)化后的發(fā)酵工藝條件為:種齡30 h，接種量7.5%，發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH 5.75，1 000 mL三角瓶裝液量162.5 mL，發(fā)酵時(shí)間84 h．在此條件下，紅曲霉搖瓶液態(tài)發(fā)酵的多糖質(zhì)量濃度達(dá)999.8 mg/L，比優(yōu)化前的 684.2 mg/L高46.1%．

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(責(zé)任編輯:檀彩蓮)

Optimization of Liquid Fermentation Conditions of Polysaccharide by Monascus sp．

WU Jian-ping， WANG Chang-lu， CHEN Mian-hua， WANG Yu-rong， LI Feng-juan
(Key Laboratory of Food Nutrition and Safety，Ministry of Education/College of Food and Biology Engineering，Tianjin University of Science＆ Technology，Tianjin 300457，China)

The liquid state fermentation conditions of polysaccharide by Monascus sp．were investigated．The optimized culture medium was as follows，sucrose 45 g/L，yeast extract powder 4.5 g/L，KH2PO4·3H2O 3.5 g/L，MgSO4·7H2O 0.85 g/L．The fermentation conditions were optimized by single factor experiment and orthogonal test．The optimal fermentation conditions were as follows，seed culture age of 30 h，inoculation volume of 7.5%，initial pH of 5.75，liquid medium volume of 162.5 mL in 1 000 mL conical flask，and the fermentation lasted for 84 h．The highest yield of polysaccharide could be up to 999.8 mg/L，which was 46.1%higher than that of original yield of 684.2 mg/L．

Monascus sp．;polysaccharide;liquid state fermentation;conditional optimization

TS201.2;Q815

A

1671-1513(2012)06-0057-06

2012-02-27

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31171729)．

伍健萍，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù);

王昌祿，男，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事食品生物技術(shù)方面的研究．通訊作者．