羅清平

（石門(mén)縣人民醫(yī)院，湖南 常德 415300）

不規(guī)則抗體篩查在臨床輸血中的應(yīng)用研究

羅清平

（石門(mén)縣人民醫(yī)院，湖南 常德 415300）

目的 探討微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)在臨床輸血不規(guī)則血型抗體篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì) 4125 份血清樣本采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查。結(jié)果 本次研究共篩查出不規(guī)則血型抗體患者 72 例（1.75%），經(jīng)微柱凝膠抗人球蛋白法采用鑒定譜細(xì)胞1～11 號(hào)進(jìn)行不規(guī)則抗體的特異性鑒定，其中抗 D26 例，抗 E27 例，抗 E、抗 C8 例，抗 C6 例，抗 Ce5 例；在 72 例陽(yáng)性患者中，男 26 例，均有輸血史；女 46 例，其中 15 例有妊娠史，18 例有輸血史，13 例既有妊娠史又有輸血史。結(jié)論 采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行不規(guī)則血型抗體篩查可有效檢出常見(jiàn)的不規(guī)則血型抗體，從而最大程度地避免輸血并發(fā)癥的發(fā)生，方法簡(jiǎn)便易行，值得臨床推廣。

輸血；不規(guī)則血型抗體；微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)；篩查

紅細(xì)胞不規(guī)則抗體（irregular antibodies）?？蓪?dǎo)致輸入的紅細(xì)胞存活期縮短甚至可引起致命的免疫溶血性輸血反應(yīng)[1]。因此，篩選和鑒定不規(guī)則抗體是避免免疫溶血性輸血反應(yīng)、保證臨床輸血安全的有效措施，尤其是對(duì)孕婦或患有腫瘤、自身免疫性疾病、嚴(yán)重消耗性疾病以及多次輸血的患者顯得更為重要[2]。為探討微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)在臨床輸血不規(guī)則血型抗體篩查中的應(yīng)用價(jià)值。2009年1月至2011年12月，我院對(duì)4125份血清樣本采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，獲得了滿意的篩查效果，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 檢測(cè)對(duì)象

本組檢測(cè)對(duì)象共4125例，男2180例，女1945例，年齡2～79歲，均為符合臨床輸血適應(yīng)癥的輸血患者，其中孕婦483例，腫瘤及其他嚴(yán)重消耗性疾病患者685例，合并有自身免疫性疾病患者282例，單次輸血量為200～2600mL。

1.1.2 儀器與試劑

微柱凝膠專(zhuān)用孵育器、BYL型血型血清學(xué)多用離心機(jī)及抗人球蛋白微柱凝膠卡、不規(guī)則抗體篩查細(xì)胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型）等均由長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)公司提供；鑒定譜細(xì)胞1～11號(hào)由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。

1.2 方法

所有操作均嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]中的方法進(jìn)行，所有受檢者均于清晨8點(diǎn)采用促凝管抽取靜脈血5mL后常溫下靜置30min，在其完全凝固后，低速離心2min，分離出血清并剔除其中的纖維蛋白。取抗人球蛋白微柱凝膠篩檢卡按使用說(shuō)明做好標(biāo)記，分別向3個(gè)微柱凝膠管中加入0.8%Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型不規(guī)則抗體篩查細(xì)胞試劑各50μL后，再立即分別加入待檢血清50μL，在免疫微柱孵育器內(nèi)孵育15min后，放入BYL型血型血清學(xué)多用離心機(jī)內(nèi)以900r/min離心2min，再以1500r/min離心3min，取出肉眼判斷結(jié)果。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽(yáng)性（+）：紅細(xì)胞相互凝集，懸浮于凝膠柱上端或中間；陰性（-）：游離篩檢紅細(xì)胞沉降到凝膠柱底部。最后，對(duì)初篩抗體陽(yáng)性的標(biāo)本采用1～11號(hào)鑒定譜細(xì)胞進(jìn)行對(duì)照，以判定不規(guī)則抗體的特異性，二者相符則為該種抗體陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

本次研究共篩查出不規(guī)則血型抗體患者72例（1.75%），經(jīng)微柱凝膠抗人球蛋白法采用鑒定譜細(xì)胞1～11號(hào)進(jìn)行不規(guī)則抗體的特異性鑒定，其中抗D26例，抗E27例，抗E、抗C8例，抗C6例，抗Ce5例；在72例陽(yáng)性患者中，男26例，均有輸血史；女46例，其中15例有妊娠史，18例有輸血史，13例既有妊娠史又有輸血史。

3 討 論

紅細(xì)胞抗體分為天然抗體和免疫性抗體兩種。人體血清中抗-A和抗-B抗體是人類(lèi)最重要的天然抗體，為無(wú)明確抗原刺激產(chǎn)生的抗體。由外來(lái)的類(lèi)似血型抗原物質(zhì)免疫所產(chǎn)生的抗體，稱(chēng)為不規(guī)則血型抗體或免疫性抗體，主要存在于患有腫瘤、自身免疫性疾病、嚴(yán)重消耗性疾病以及多次輸血的患者中[4]，不規(guī)則血型抗體特異性結(jié)合紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原并由此引起快速免疫反應(yīng)為其最主要的生物學(xué)功能[5]，可致溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)可危及患者生命[6,7]。因此，對(duì)需要輸血治療的患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，有助于選擇正確的血液，從而防止因輸注含有某種不規(guī)則抗體的血液而發(fā)生的輸血反應(yīng)。

Rh血型是ABO血型系統(tǒng)之后抗原抗體最為復(fù)雜的血型系統(tǒng)，5種抗原的抗原性強(qiáng)弱依次為D＞E＞C＞c＞e[8]?？笵主要通過(guò)Rh血型不合的輸血和妊娠產(chǎn)生，抗D的產(chǎn)生可引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，并可能導(dǎo)致受血者新生兒或胎兒死亡；而多次輸血的患者則容易因產(chǎn)生抗E而導(dǎo)致溶血；抗c僅能通過(guò)免疫產(chǎn)生，在Rh血型系統(tǒng)中，其重要性僅次于抗D和抗E[9]。輸血時(shí)在做好ABO血型分型的同時(shí)必須做好Rh血型分型，做到同型輸血，以免產(chǎn)生不規(guī)則抗體而導(dǎo)致不良輸血反應(yīng)?？谷饲虻鞍孜⒅z試劑卡采用六支微柱型管，包括反應(yīng)腔和凝膠分離柱兩個(gè)部分，管中填充葡聚糖凝膠和抗人球蛋白(多抗）。當(dāng)受檢血清中含有某種不規(guī)則抗體時(shí)，則與已知血型抗原的篩檢細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，并在抗人球蛋白試劑的橋聯(lián)作用下，紅細(xì)胞相互凝集，通過(guò)多用離心機(jī)的低速離心，利用凝膠的空間位阻效應(yīng)，凝集后的紅細(xì)胞懸浮于凝膠柱上端或中間，即為陽(yáng)性；反之，未發(fā)生凝集反應(yīng)的游離篩檢紅細(xì)胞則沉降到凝膠柱底部，即為陰性[3]?？谷饲虻鞍孜⒅z試驗(yàn)方便快捷，標(biāo)本用量少，靈敏度高，容易判斷，結(jié)果穩(wěn)定可靠[10]，易標(biāo)準(zhǔn)化，適用于進(jìn)行臨床常規(guī)不規(guī)則抗體篩查。臨床需要注意的是，由于篩檢用的鑒定譜細(xì)胞不可能包含所有抗原，無(wú)法檢出低頻率抗原的相應(yīng)抗體，因此不規(guī)則抗體篩查陰性并不等于完全不存在不規(guī)則抗體，此外，對(duì)ABO血型的誤判也不能通過(guò)抗體篩查進(jìn)行糾正查出[11]。所以，即使不規(guī)則抗體篩查陰性，還必須采用能快速檢測(cè)出不完全抗體的方法進(jìn)行交叉配血，以確保輸血萬(wàn)無(wú)一失。

綜上所述，采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行不規(guī)則血型抗體篩查可有效檢出常見(jiàn)的不規(guī)則血型抗體，從而最大程度地避免輸血并發(fā)癥的發(fā)生，方法簡(jiǎn)便易行，值得臨床推廣。

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