輸血前交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍，李松，楊麗云，鄒娟，辛建英，楊鵑

(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

輸血前交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍，李松，楊麗云，鄒娟，辛建英，楊鵑

(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

抗體篩查輸血安全交叉配血自身抗體

輸血是一項不可替代的臨床治療手段。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展，臨床用血數(shù)量逐年增加，輸血安全成為日益關(guān)注的問題。交叉配血是在血型鑒定的基礎(chǔ)上，體外模擬血液相容性實驗，發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細胞和血清間是否存在抗原抗體反應(yīng)，是保證臨床用血安全的前提[1，2]。實際工作中，往往會發(fā)生交叉配血不相合的情況，即患者(供血者)血清可凝集供血者(患者)紅細胞。本文回顧性分析了我院2011年8月至2012年7月期間工作中遇見的交叉配血不合的病例，總結(jié)引起交叉配血不合的各種原因。

1 資料與方法

1.1 研究對象2011年8月至2012年7月的南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血患者共計24913例次，其中交叉配血不合57例。

1.2 試劑及標本微柱凝膠卡、不規(guī)則抗體篩選卡(長春博迅生物技術(shù)有限責任公司生產(chǎn))。單克隆抗-A和抗-B、抗體篩選細胞、抗體鑒定細胞、抗人球蛋白試劑(由上海血液生物醫(yī)藥公司提供)?；颊叩牟豢鼓靡宰隹贵w篩查和抗體鑒定、交叉配血用EDTA-Na2抗凝血標本。

1.3 儀器微柱凝膠卡專用離心機和孵育器由長春博迅生物技術(shù)有限責任公司提供，BaSo離心機(型號2005-1)由臺灣貝索公司生產(chǎn)。

1.4 方法紅細胞不規(guī)則抗體篩選、交叉配血、抗人球蛋白試驗均按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[3]執(zhí)行操作步驟，交叉配血同時采用鹽水介質(zhì)配血法和微柱凝膠卡配血法。微柱凝膠法交叉配血試驗嚴格按照試劑說明書操作。

2 結(jié)果

57例交叉配血不合標本中，有男性患者23例，女性患者34例。23例患者檢測出不規(guī)則抗體，Rh血型系統(tǒng)的抗體最多，有16例(16/23，69.57%，抗-E抗體10例、抗-c抗體3例、抗-cE抗體3例)；MNS血型系統(tǒng)抗體5例(5/23 21.34%，抗-M 2例和抗-s 3例)；抗-K和抗-Lea各1例。29例患者紅細胞直接抗人球蛋白實驗(DAT)陽性，其中11例患者僅DAT陽性，6例患者伴有不規(guī)則抗體(3例患者同時有不規(guī)則抗體和溫自身抗體)，6例患者體內(nèi)還同時存在冷凝集素，6例患者產(chǎn)生了溫自身抗體。9例僅存在冷凝集素影響交叉配血結(jié)果。

1例患者患慢性粒細胞性白血病，血液中白細胞增高，導致微柱凝膠交叉配血試驗主側(cè)假陽性；1例獻血員紅細胞直接抗人球蛋白陽性，與患者血清交叉配血時發(fā)生凝集。

3 討論

從本批的標本實驗結(jié)果可以看出，交叉配血出現(xiàn)凝集，主要原因是受血者自身的紅細胞被致敏，其次是受血者存在不規(guī)則抗體、受血者含冷凝集素或自身抗體。

患者體內(nèi)存在的不規(guī)則抗體針對供血者的紅細胞發(fā)生反應(yīng)，交叉配血時主側(cè)凝集。在23例不規(guī)則抗體中，血型抗體所占比例與血型系統(tǒng)頻率基本一致，Rh血型系統(tǒng)的抗體最多，有16例(16/23 69.57%)，MNS血型系統(tǒng)抗體共5例(5/23 21.34%)，與吳勇[4]等所報道的不規(guī)則抗體的頻率分布有差異，可能原因是取材范圍不同，本文中僅包含出現(xiàn)交叉配血不和的標本，而不是針對所有的就醫(yī)患者。發(fā)血時選擇不含與抗體相對應(yīng)的抗原血液給患者輸注。

受者紅細胞結(jié)合了不完全抗體時，直接抗人球蛋白結(jié)果呈陽性。交叉配血時，受者紅細胞與供血者血漿反應(yīng)，非特異性地將血漿中的蛋白質(zhì)(免疫球蛋白、補體)吸附到表面而致敏，經(jīng)微柱凝膠卡離心時，被吸附物質(zhì)與柱中含有的抗人球蛋白試劑結(jié)合，發(fā)生凝集反應(yīng)。直接抗人球蛋白陽性伴有自身抗體或不規(guī)則抗體時，可表現(xiàn)為主側(cè)、次側(cè)均出現(xiàn)凝集反應(yīng)。分別對受血者紅細胞和血清處理以去除自身抗體對交叉配血的干擾：(1)受血者紅細胞做放散試驗，放散掉紅細胞表面吸附的自身抗體；(2)用受血者自身紅細胞進行吸收試驗，去除血清中的自身抗體。本文中有11例僅有直接抗人球蛋白陽性，6例直抗陽性伴有自身抗體，3例直抗陽性患者同時伴有自身抗體和不規(guī)則抗體。由于直接抗人球蛋白陽性的患者多為免疫性溶血性貧血患者，因此，建議輸注洗滌紅細胞以緩解臨床癥狀。

冷凝集是由冷凝集素在低溫時與紅細胞膜相關(guān)抗原結(jié)合，而導致的紅細胞凝集。溫度較低時，紅細胞表面膜物質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生改變，顯露某些抗原決定簇，與相應(yīng)的冷凝集素相結(jié)合，而隨著溫度的升高，紅細胞膜物質(zhì)的構(gòu)型恢復(fù)，阻礙了冷凝集素與抗原決定簇的結(jié)合，凝集逐漸消失。患者血清有自身冷抗體時，采用的處理方法是將患者紅細胞經(jīng)37℃生理鹽水洗滌3～4次，患者血清用標準O型紅細胞4℃進行冷抗體吸收，將處理之后的紅細胞和血清再進行相關(guān)試驗，可排除冷凝集的干擾。9例僅有冷凝集素的患者，經(jīng)上述處理后，鹽水法和微柱凝膠配血法均未見凝集。6例伴有直接抗人球蛋白陽性的患者給予洗滌紅細胞輸注。血液發(fā)放后，囑咐臨床輸注之前，將血液制品在室溫放置復(fù)溫，緩慢輸注，輸血過程密切觀察。

1例新生兒患者標本交叉配血主側(cè)陽性，經(jīng)再次確認血型，排除患者存在自身抗體或冷凝集，證實配血不合原因是獻血員紅細胞直接抗人球蛋白陽性。

1例慢性粒細胞性白血病患者，血液中白細胞63×109/L，紅細胞1.21×1012/L，交叉配血前患者EDTA抗凝血液經(jīng)1300 g離心1min處理，交叉配血時鹽水法相合，微柱凝膠交叉配血試驗主側(cè)凝集。由于血液中白細胞增高，經(jīng)常規(guī)離心后，血漿中混有大量的白細胞。由于白細胞平均體積大于紅細胞并且其變形能力僅為紅細胞的1/1000，離心時，交叉配血反應(yīng)體系中的細胞在微柱凝膠中下移，白細胞不能全部通過微孔進而將微孔堵塞導致游離的紅細胞不能順利通過微孔到達底部，在反應(yīng)單元中出現(xiàn)假陽性[5]。僅有主側(cè)出現(xiàn)假凝集而次側(cè)沒有出現(xiàn)的可能原因是混入紅細胞懸液的白細胞被稀釋(紅細胞懸液濃度0.5%～0.8%)，數(shù)量不足以影響結(jié)果。將患者EDTA抗凝血液經(jīng)1770 g離心5 min再次處理后，血漿中的白細胞被沉淀，微柱凝膠交叉配血法相合。

在發(fā)血過程中，交叉配血可因多種因素而不合，發(fā)生不合時，應(yīng)積極從各方面查找原因，并排除可能對配血結(jié)果產(chǎn)生干擾的因素，及時為臨床提供安全的血液治療。有輸血史或妊娠史的患者術(shù)前應(yīng)做血清抗體篩查，存在不規(guī)則抗體者預(yù)先配血以減少術(shù)中的取血時間。

[1]何子毅,劉赴平,車嘉琳.電子交叉配血的現(xiàn)狀和展望[J].臨床輸血與檢驗,2009,11(4):380-381.

[2]胡飄萍,交叉配血不合原因分析及處理[J],實驗與檢驗醫(yī)學, 2013,31(1):59-60.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006,253-266.

[4]吳勇,吳遠軍,陳寶嬋.紅細胞血型不規(guī)則抗體的檢測和分析[J].臨床輸血與檢驗,2010,10(14):343-346.

[5]夏兵,戴書萍,裴寶芹.慢性粒細胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽性1例[J].中國輸血雜志,2011,24(2):152-153.

R457.1

B

1674-1129(2013)03-0280-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.034

江西省衛(wèi)生廳科技計劃(編號20133048)