周玉文, 曹雪濱
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力竭大鼠血清睪酮、皮質醇的變化及對心臟的可能影響
周玉文, 曹雪濱*
(解放軍第252醫(yī)院心內科, 保定 071000)
力竭性心臟損傷; 睪酮; 皮質醇; 大鼠
力竭性運動損傷多見于軍人及運動員,心臟損傷尤為常見。與力竭性心臟損傷可能相關的機制是多方面的,其機體生理病理變化亦是包括諸多方面,其中包括內分泌的改變,如腎上腺素、睪酮和皮質醇等。有研究表明睪酮具有保護心臟的作用,而不恰當升高的皮質醇則可導致心臟損傷。本文旨在通過大鼠力竭性游泳試驗,研究大鼠血清睪酮、皮質醇的變化及其對心臟的可能保護機制。
選擇清潔級Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠20只,體質量(180±10)g,購于軍事醫(yī)學科學院實驗中心,許可證號:SCXK-(軍)2007-004。
XH-6080r放射免疫計數(shù)器由西安核儀器廠生產(chǎn);貝克曼DXI800全自動化學發(fā)光免疫分析儀由美國貝克曼公司生產(chǎn);碘[125I]皮質醇放射免疫分析藥盒由同濟大學上海放射免疫分析技術研究有限公司生產(chǎn);睪酮測定試劑盒(化學發(fā)光法)由貝克曼庫爾特有限公司生產(chǎn)。肌酸激酶MB同工酶(creatine kinase isoenzymes MB,CK-MB)檢測試劑盒由寧波瑞源生物科技有限公司生產(chǎn);心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)檢測試劑(膠體金法)由瑞萊生物工程(深圳)有限公司生產(chǎn)。
20只健康雄性SD大鼠購進后,自由飲食,自然光照,動物室溫度(23±2)℃,分籠適應性喂養(yǎng)3d后用于實驗。20只健康雄性SD大鼠隨機分為兩組:安靜對照組(C組)、力竭運動組(E組),每組各10只。
于試驗第4天,C組麻醉大鼠留取血液標本;于試驗第1,2,3天,E組分別給予15,30,40min無負重適應性游泳訓練,第4天給予尾巴根部墜體重2%鉛塊進行一次性力竭游泳,力竭性游泳后即刻麻醉大鼠,并留取血液標本;本試驗采用高120cm、直徑70cm的塑料圓桶作為大鼠游泳槽,水深70cm以上,水溫(33±2)℃。力竭標準采用Thomas標準“經(jīng)過10s后動物仍不能返回水面”,或大鼠游泳乏力動作失去協(xié)調,取出仰臥平放地上大鼠無力翻轉,或大鼠無力抓握網(wǎng)格樣漏勺使身體完全露出水面。凡在4h內迅速力竭者,給予去除尾部負重,或把大鼠取出后放于平地讓其休息3min后,繼續(xù)進行力竭游泳直至再次力竭。
C組或E組一次性力竭游泳后即刻給予10%水合氯醛0.35~0.40ml/100g麻醉,經(jīng)腹部下腔靜脈取血,經(jīng)過37℃水浴30min,進行2500~3000r/min離心10min,分離血清并置于-20℃冰箱保存。以化學發(fā)光法、免疫分析PR-法檢測血清中的睪酮和皮質醇的含量;以膠體金法檢測cTnI含量;以日立7600-020生化分析儀檢測CK-MB活性。
應用SPSS16.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析。<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
表1結果表明,E組與C組比較血清cTnI含量、CK-MB活性明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(<0.05,<0.01),提示力竭性運動導致心肌損傷。C組大鼠血清皮質醇含量顯著小于E組,且差異具有統(tǒng)計學意義(<0.01),提示力竭運動可顯著性升高大鼠血清皮質醇水平。C組大鼠血清睪酮含量顯著大于E組,且差異具有統(tǒng)計學意義(<0.01),提示力竭運動顯著性降低大鼠血清睪酮水平。
表1 兩組大鼠血清皮質醇、睪酮、cTnI和CK-MB的比較
Group C: control group; group E: exhaustive group; cTnI: cardiac troponin I; CK-MB: creatine kinase isoenzymes MB. Compared with group C,*<0.05,**<0.01
力竭性運動可導致心臟損傷[2]。力竭性運動對血清睪酮、皮質醇有一定影響,可能參與力竭性心臟損傷。
睪酮可以通過對L型鈣離子通道和T型鈣離子通道的阻滯作用,減少鈣超載、心律失常及心肌細胞凋亡的發(fā)生[3];心肌中存在睪酮受體,睪酮可以直接作用于心肌改善心肌缺血[4],睪酮還可以通過cGMP途徑激活大電導鈣激活鉀通道保持動脈平滑肌靜息電位[5],與鈣離子通道阻滯的機制協(xié)同舒張冠狀動脈[3]改善心肌缺血。睪酮水平的升高,可上調β2腎上腺素能受體和鈣調節(jié)蛋白的表達[6],提高細胞內鈣瞬變的幅度,使心肌的收縮力增加、舒張加快。
糖皮質激素可導致心臟氧化應激損傷、心肌細胞凋亡,促進高血壓發(fā)生以及降低左室射血分數(shù)[7];降低主動脈內皮一氧化氮合酶水平,損傷血管內皮功能;增加心肌細胞的L型鈣離子電流[8];研究表明,急性心肌梗死早期糖皮質激素血清水平升高為心肌重構的獨立預測因子[9]。并且在健康人群中糖皮質激素血清水平與高敏肌鈣蛋白T血清含量密切相關[10]。
綜上所述,力竭性運動可導致大鼠心臟損傷,而血清睪酮水平降低、血清皮質醇水平升高,可能參與了力竭性心臟損傷。
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(編輯: 周宇紅)
R541.9
A
10.3724/SP.J.1264.2013.00171
2013?07?16;
2013?08?19
軍隊中醫(yī)藥科研專項課題項目資助(10zyz106)
曹雪濱, E-mail: cxb252@yahoo.com.cn
周玉文, 現(xiàn)工作單位是保定市第二醫(yī)院心內科