慈洪麗姜啟鳳滕 娟

藥物支架系統(tǒng)藥物含量測試方法研究報告

慈洪麗1姜啟鳳2滕 娟2

目的為流通池法測定體外釋放度提供含量測試的方法驗證。方法使用含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）溶液作為介質(zhì)劑，雷帕霉素在該介質(zhì)劑中的含量測試的方法學驗證。結(jié)果準確度、專屬性、線性和范圍、精密度、檢測限和定量限均可滿足中國藥典要求，且在（37±2）℃時的穩(wěn)定性較好。結(jié)論雷帕霉素含量測定可以采用含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）溶液作為介質(zhì)，進行流通池法體外釋放度的測試。

雷帕霉素；藥物體外釋放；流通池；體外釋放度

雷帕霉素是一種免疫抑制劑，主要作用是抑制血管內(nèi)皮增生，起到防止血管再狹窄的作用[1]。目前國內(nèi)外藥物支架多采用該藥物與載體結(jié)合，在血管內(nèi)有一個逐漸釋放的過程，因而釋放度是保證產(chǎn)品安全有效性的一項重要檢測[2]。到目前為止，國內(nèi)對支架中使用此類藥物仍未建立起統(tǒng)一的質(zhì)量標準和分析檢測方法，藥物涂層支架的體外釋放測試方法一般為靜態(tài)條件下，用25%的乙醇溶液作為釋放介質(zhì)[3]，筆者認為該方法的缺陷在于介質(zhì)的選擇上，乙醇是一種有機溶劑，雷帕霉素在乙醇中易溶，乙醇溶液的濃度對雷帕霉素的溶解度有很大的影響。因此配制乙醇溶液的準確度是非常關鍵的，所操作過程中易造成一定的誤差，而釋放介質(zhì)采用與人體血液酸堿度比較接近的PBS溶液相對來說是比較合理的。

1 儀器與材料

1.1 儀器島津2550UV恒溫水浴箱。

1.2 材料雷帕霉素對照品（Lot No.HBHX200917，純度96.8%）、雷帕霉素（Lot No.090401由華北制藥集團新藥研究開發(fā)責任有限公司生產(chǎn)）。介質(zhì)為含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）緩沖溶液，以下稱PBS溶液。

2 驗證過程

2.1 溶液的制備因雷帕霉素不能直接溶于PBS溶液中，所有樣品制備時需先用大約0.5ml的無水乙醇進行溶解，然后再加入PBS溶液即可。測試結(jié)果表明，14天內(nèi)在（37±2）℃的條件下，雷帕霉素在PBS溶液中是穩(wěn)定的。

2.2 方法適應性

2.2.1 專屬性取PBS溶液作為空白液，雷帕霉素PBS溶液作為樣品液，在200～350nm下進行紫外掃描，雷帕霉素在278nm下有最大吸收，空白液無吸收。

2.2.2 線性和范圍標準曲線制備：精密稱取5mg雷帕霉素對照品，用PBS溶液做溶劑，使成濃度為50μg/ml的標準溶液，精密量取上述標準溶液適量于具塞試管中，加入適量的PBS溶液，制成濃度為0、2.5、5、10、15、20、25、30μg/ml的雷帕霉素標準液。標準曲線的回歸方程為y=0.0556x-0.0019相關系數(shù)R2=0.9999。測試結(jié)果：在0～30μg/ml的雷帕霉素濃度范圍內(nèi)，吸光度-濃度的線性關系良好，由此可知，此定量分析方法是可行的。

2.2.3 準確度通過測試已知量雷帕霉素的回收率來評價測試方法準確度，用PBS溶液配制3個濃度（每個濃度3個樣品）的雷帕霉素溶液，測試樣品的濃度，計算回收率及其RSD。結(jié)果：平均回收率為96.5%，RSD為0.42%，均符合要求。

2.2.4 精密度（重復性）連續(xù)6次測試10.19μg/ml雷帕霉素標準液的濃度，測試結(jié)果是9.76、9.80、9.83、9.78、9.76、9.79（μg/ml），相對標準差為0.24%。

2.2.5 檢測限和定量限檢測限（DL）和定量限（QL）是根據(jù)響應值的標準差（σ）和標準曲線的斜率（S）來計算的。通過幾份空白樣品的分析，然后計算其響應值的標準差，測出分析背景響應值的大小。測得的空白樣品響應值的標準差為0.0023。

用該方法進行雷帕霉素含量測試的檢測限為0.14（μg/ml），定量限為0.41（μg/ml）。

2.3 穩(wěn)定性取濃度約為19.56μg/ml的雷帕霉素的PBS溶液于具塞玻璃容器中，置入（37±2）℃恒溫水浴中，分別在0天、1天、2天、7天、14天測試溶液的濃度，測試結(jié)果分別為19.51、19.42、19.49、19.30、19.44（μg/ml），濃度無變化，RSD為0.42%，符合要求。

3 結(jié)論

采用PBS溶液做介質(zhì)，進行體外釋放測試方法是穩(wěn)定的、適用的，專屬性、線性關系良好、精密度、準確度均符合國家標準要求。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典二部ISBN978-7-75067-4438-6附錄XIX A藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導原則[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社出版,2010.

[2] 李昕躍,馬斌.金屬支架藥物涂層釋放量的比較[J].大連大學學報,2004,25(6).

[3] 陳玉成,熊素彬,幸浩洋,等.雷帕霉素緩釋涂層支架在模擬心臟泵血狀態(tài)下的體外釋藥研究[J].中國藥學雜志,2008(09).

R927.2

A

1673-5846(2013)02-0069-02

1 威海市立醫(yī)院，山東威海 264209

2 山東吉威醫(yī)療制品有限公司，山東威海 264209