黑胡椒的浸出物測(cè)定實(shí)驗(yàn)研究

阿依努爾·阿不來(lái)提 吐?tīng)枌O阿衣·克力木 庫(kù)爾班江·艾買提

(新疆喀什維吾爾醫(yī)醫(yī)院，新疆 喀什 844000)

黑胡椒為胡椒科植物胡椒pipernigrum L.的干燥近成熟或成熟果實(shí)，秋末至次春果實(shí)呈暗綠色時(shí)采收、曬干為黑胡椒。是一種常用中藥和維藥。有生干生熱，消失開胃，通氣除脹，止咳化痰，補(bǔ)腦止痛等功能。主要用于濕寒性或黏液質(zhì)性疾病，胃寒納差，消化不良，脘腹氣張，咳嗽痰多，腦虛頭疼，牙痛等癥。其檢查項(xiàng)目中《中國(guó)藥典》僅對(duì)胡椒收載了性狀(黑胡椒和白胡椒)、鑒別、檢查、含量測(cè)定。而未對(duì)胡椒的浸出物測(cè)定做出規(guī)定。為完善胡椒檢測(cè)項(xiàng)目、確定胡椒類質(zhì)量安全、有效、確定、可控。我們就照《藥典》胡椒檢查項(xiàng)目對(duì)黑胡椒的浸出物進(jìn)行測(cè)定。為胡椒的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)且填充研究的空白。

1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑:黑胡椒(新疆采摘)，黑胡椒標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品鑒定所購(gòu)買)，95%乙醇(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)，無(wú)水乙醇(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)，甲苯(上海曹楊二中化工廠)，乙酸乙酯(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)，丙酮(天津市東麗區(qū)大華莊鎮(zhèn)歡坨村)，薄層層析硅膠(青島海洋化工廠)，藥用凡士林(白，城都是制藥廠)，羧甲基纖維素鈉CMCNa(實(shí)驗(yàn)試劑，天津市福晨化學(xué)試劑廠)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器:超聲波清洗器(SG3300H型，上海冠特超聲儀器有限公司)，水浴鍋(HH.S21－4北京長(zhǎng)安科學(xué)儀器廠)，干燥箱(202型電熱恒溫干燥箱)，電子天平(BS10002型，浙江永康市正恒電子有限公司)，薄層層析展開缸(P－200*100型，上海信宜儀器有限公司)，硅膠板(青島海洋化工廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 水溶性浸出物測(cè)定法(測(cè)定用的供試品粉碎、使能通過(guò)二號(hào)篩、并混合均勻)。

2.1.1 冷浸法:取供試品約4g、精密稱定、置250ml的錐形瓶中精密加水100ml密塞、冷浸，前6小時(shí)內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再靜置18小時(shí)，用干燥濾器迅速濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液20ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量%。

2.1.2 熱浸法:取供試品4g、精密稱定、置100ml的錐形瓶中，精密加水100ml，密塞稱定重量、靜置1小時(shí)后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰并保持微沸1小時(shí)。放冷后，取下錐形瓶、密塞、再稱定重量、用水補(bǔ)足減失的重量、搖勻，用于燥濾器濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中、在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，置干燥中卻30分鐘、迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算供試品中水溶性浸出物的含量% 。

2.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:見(jiàn)表1。

表1 兩種方法試驗(yàn)結(jié)果

2.2 薄層層析:取本品浸膏0.5g，加無(wú)水乙醇5ml，超聲處理30分鐘，過(guò)濾，濾液作為供試品溶液。另取胡椒堿對(duì)照品，置棕色量瓶中，加無(wú)水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法“中國(guó)藥典”一部附錄ⅥB試驗(yàn)，吸取上述各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯－丙酮(7:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光和紫外燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。

2.2.1 結(jié)果:展開劑:甲苯－乙酸乙酯－丙酮(7:2:1)，顯色劑:10%硫酸乙醇溶液，點(diǎn)樣:(從左到右－1標(biāo)準(zhǔn)品2熱浸法提取)供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，相同顏色(黃綠色熒光)的斑點(diǎn)。

通過(guò)薄層層析該斑點(diǎn)清晰，集中，無(wú)干擾，經(jīng)空白對(duì)照液試驗(yàn)，認(rèn)為從定性角度看，完全可以控制該藥材真?zhèn)巍?/p>

3 討論

浸出物測(cè)定(determination of extractive)以藥材浸出物的含量作為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定，一般用于該藥材的活性成分或指標(biāo)性成分不清或含量很低或尚無(wú)精確的定量方法時(shí)采用。本次實(shí)驗(yàn)中，利用熱浸法和冷浸法提取黑胡椒的浸膏，再利用薄層色譜法(TLC)檢測(cè)。薄層板在紫外燈下，在365nm下檢視較好。方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可完善胡椒類檢測(cè)項(xiàng)目和質(zhì)量控制很有意義。

［1］中華人民共和國(guó)藥典［S］.2010年1部.227

［2］蔣傳中，李志萍，鄧寒霜.丹參浸出物與灰分測(cè)定實(shí)驗(yàn)研究［J］.西北藥學(xué)雜志，2004，4.

［3］新疆維吾爾自治區(qū)中藥維吾爾藥飲片炮制規(guī)定，新疆人民出版社(K)，2010－12，83－84

［4］劉勇民，維吾爾藥志［M］.新疆科技衛(wèi)生出版社，1999，364－367