富硒對蕎麥苗抗氧化物質(zhì)含量及活性的影響

趙辰路+周文美+張建敏

摘要：采用亞硒酸鈉溶液作為富硒原料，對甜、苦2種蕎麥苗進(jìn)行富硒處理。蕎麥苗中的主要抗氧化物質(zhì)包括黃酮類化合物及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）。單因素和正交試驗(yàn)結(jié)果表明，富硒后能有效提高甜蕎麥、苦蕎麥中黃酮類化合物含量及GSH-Px活性，其中苦蕎苗富硒后的效果優(yōu)于甜蕎苗；正交設(shè)計(jì)優(yōu)化結(jié)果顯示，最佳富硒方案為生長16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、亞硒酸鈉溶液20 mg/L浸種處理。

關(guān)鍵詞：富硒；蕎麥苗；黃酮類化合物；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）

中圖分類號：S517.01 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0100-03

硒是人體必需的微量元素之一，人體缺硒可引起某些重要器官功能失調(diào)，導(dǎo)致許多嚴(yán)重疾病發(fā)生^[1]。通過對硒的補(bǔ)充，可以提高機(jī)體免疫能力，維護(hù)心臟、肝臟等重要器官的正常功能，預(yù)防老年性心腦血管疾病的發(fā)生，同時具有多種保健功能。蕎麥營養(yǎng)成分全面，有“五谷之王”的美稱。蕎麥富含淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、粗纖維、礦物元素等，同時富含類黃酮化合物。大量研究表明，蘆丁是蕎麥中起保健作用的主要功能成分，它能有效降低微血管脆性和滲透性，具有多種保健功能^[2]。蕎麥芽作為一種新興芽菜，具有良好的風(fēng)味及保健作用。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，通過對植物進(jìn)行富硒處理，能提升植物中硒含量、黃酮類化合物含量及GSH-Px活性。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

材料：市售甜蕎及苦蕎種子發(fā)芽后生長13～20 d并經(jīng)過富硒處理的蕎麥苗，干燥粉碎后，過40目篩備用。

試劑：檸檬酸三鈉、疊氮鈉、乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、二硫二硝基苯甲酸（DTNB）、谷胱甘肽（GSH）標(biāo)準(zhǔn)品、蕓香苷標(biāo)準(zhǔn)品、無水乙醇、30% 過氧化氫；試驗(yàn)提取與分析用水為超純水。

電子天平FA2004N（上海箐海儀器有限公司）、可見分光光度計(jì)722S（上海箐華科技儀器有限公司）、KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、SF-170型高速粉碎機(jī)（上海中藥機(jī)械廠）、HG-101-1電熱鼓風(fēng)干燥箱（南京盈鑫實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 黃酮類化合物含量的測定 采用分光光度計(jì)法^[3-6]測定。吸取0.2 mg/mL蕓香苷標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于6個25 mL的容量瓶中，依次編號；各加5%NaNO2溶液0.4 mL，搖勻后放置6 min，分別加入10% Al（NO3）3 溶液0.4 mL，搖勻后放置6 min；然后再各自加入 1 mol/L NaOH溶液4 mL，最后用50%乙醇定容至刻度線，搖勻，放置15 min，在波長510 nm處測定吸光度。精確稱取 1.0 g 復(fù)習(xí)蕎麥芽，加入10 mL 50%乙醇，超聲處理（240 W）在45 ℃下提取30 min，多次離心去不容物，用相同濃度乙醇定容至25 mL，吸取1.0 mL按照標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法，在波長510 nm處測定吸光度。

1.2.2 GSH-Px活性測定 采用DTNB比色法^[7-8]測定，用 13～20 d 生長期的甜蕎苗及苦蕎苗整株。取1 g 新鮮材料，加10 mL 磷酸提取液冰浴中研磨成勻漿，12 000 r/min 離心15 min，分別取200 μL 上清液置于2 支試管中，將其中1 支放在沸水浴中加熱10 min。分別向以上2 支試管中加入 400 μL GSH 溶液和200 μL 37 ℃ 預(yù)熱的H2O2溶液，迅速置于37 ℃水浴3 min，加入4 mL偏磷酸溶液，12 000 r/min 離心10 min，保留上清液，其余步驟與黃愛纓等方法^[7-8]相同。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素對蕎麥苗中黃酮類化合物含量的影響

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 按照“1.2.1”中的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法，測得對應(yīng)濃度下的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1）。

2.1.2 不同生長時期蕎麥苗中黃酮類化合物的含量 在常溫環(huán)境下分別使甜蕎麥苗、苦蕎麥苗生長14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法分別測定甜蕎麥苗、苦蕎麥苗不同生長時期下的黃酮類化合物含量。由圖2可知，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甜蕎麥苗。當(dāng)苦蕎苗生長至14 d時，黃酮類化合物含量為10.117 mg/g；而甜蕎麥苗生長至14 d時黃酮類化合物含量為5.748 mg/g，隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸升高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量達(dá)到最大值，為12.584 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長 18 d 時達(dá)到最大值，為8.125 mg/g，隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸降低。

2.1.3 富硒后不同生長時期蕎麥苗中黃酮類化合物的含量 蕎麥苗在20 mg/L亞硒酸鈉溶液影響下，生長開始受到一定抑制，當(dāng)使用亞硒酸鈉溶液濃度達(dá)到40 mg/L時，生長受到較為嚴(yán)重的抑制，發(fā)芽率降低至70%左右，當(dāng)使用濃度達(dá)到 60 mg/L 時，發(fā)芽率降低至50%以下。本試驗(yàn)用濃度為 20 mg/L 的亞硒酸鈉溶液分別培養(yǎng)甜蕎麥、苦蕎麥，當(dāng)蕎麥苗生長至14～19 d時，烘干粉碎，采用分光光度法分別測定富硒后不同生長時期蕎麥苗中黃酮類化合物的含量。由圖3可知，經(jīng)過富硒后，蕎麥苗中黃酮類化合物含量有所提升，其中苦蕎麥苗中的黃酮含量提高的幅度高于甜蕎麥苗中的黃酮含量。當(dāng)富硒苦蕎苗生長至14 d時，黃酮類化合物含量為10.424 mg/g；而甜蕎麥苗生長至14 d時，黃酮類化合物含量為6.878 mg/g，隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量達(dá)到最大值，為12.847 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為 8.895 mg/g，隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸降低。

2.2 單因素對蕎麥苗中GSH-Px活性的影響

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 按照“1.2.2”中的方法繪制GSH-Px標(biāo)準(zhǔn)曲線，GSH濃度分別為0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖4）。

2.2.2 不同生長時期蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥、苦蕎麥苗不同生長時期的GSH-Px活性，結(jié)果見圖5。甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗，當(dāng)生長至13 d時，甜蕎苗GSH-Px活性為0.724 4 μmol /（g·min），而苦蕎麥苗GSH-Px活性為0.306 1 μmol /（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的GSH-Px活性也逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]隨后蕎麥苗中GSH-Px活性逐漸降低。

2.2.3 富硒后蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，生長過程中以濃度為 20 mg/L 亞硒酸鈉溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥苗、苦蕎麥苗不同生長時期下的GSH-Px活性，結(jié)果見圖6。

經(jīng)20 mg/L亞硒酸鈉溶液富硒處理的蕎麥苗GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。生長至14 d時，甜蕎麥苗GSH-Px活性為 0.739 8 μmol /（g·min），苦蕎麥苗GSH-Px活性為 0.860 1 μmol/（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的 GSH-Px 活性也逐漸增高。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol /（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol /（g·min），隨后蕎麥苗中的GSH-Px活性逐漸降低。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，對不同品種蕎麥、浸種處理、生長時間、硒使用濃度4個因素對蕎麥苗中GSH-Px活性、黃酮類化合物含量的影響進(jìn)行研究（表1、表2）。結(jié)果表明，當(dāng)亞硒酸鈉溶液濃度高于40 mg/L時對蕎麥出芽及生長產(chǎn)生了較大的抑制作用。

表2結(jié)果表明，以黃酮類化合物含量為指標(biāo)，蕎麥品種的極差最大，表明蕎麥品種的影響最大，各因素對黃酮類化合物的影響程度依次為C>B>A>D，且C因素對黃酮類化合物含量的影響達(dá)到了顯著性差異，反應(yīng)條件最佳組合為C2B4A3D1。以GSH-Px活性為指標(biāo)，富硒處理中的亞硒酸鈉溶液濃度影響最大，不同因素對GSH-Px活性的影響依次為B>A>C>D，最佳組合為B4A2C1D1，綜合考慮黃酮類化合物和GSH-Px活性2個指標(biāo)，蕎麥品種對黃酮類化合物的影響顯著，對GSH-Px活性的影響相對較小，亞硒酸鈉溶液濃度及浸種處理選擇一致的B4和D1。從蕎麥品種考慮，苦蕎黃酮類化合物含量遠(yuǎn)高于甜蕎，富硒后GSH-Px活性顯著提高。從生長天數(shù)考慮為16 d。綜合考慮，最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長時間16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為 40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

3 討論與結(jié)論

經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí)，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甜蕎麥苗，甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗。隨著生長時間延長，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量值達(dá)到最大，為12.584 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.125 mg/g；當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過富硒后，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量有所提高，苦蕎麥苗中的黃酮含量提高的幅度高于甜蕎麥苗；蕎麥苗的GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量達(dá)最大值，為12.847 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.895 mg/g。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時，GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol/（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過正交試驗(yàn)得出結(jié)論，綜合考慮富硒試驗(yàn)中最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長天數(shù)16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

參考文獻(xiàn)：

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[8]Flohe L. Assay of glutathione peroxidase[J]. Methods in Enzymelogy，1984，104：114-117.

2.2 單因素對蕎麥苗中GSH-Px活性的影響

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 按照“1.2.2”中的方法繪制GSH-Px標(biāo)準(zhǔn)曲線，GSH濃度分別為0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖4）。

2.2.2 不同生長時期蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥、苦蕎麥苗不同生長時期的GSH-Px活性，結(jié)果見圖5。甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗，當(dāng)生長至13 d時，甜蕎苗GSH-Px活性為0.724 4 μmol /（g·min），而苦蕎麥苗GSH-Px活性為0.306 1 μmol /（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的GSH-Px活性也逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]隨后蕎麥苗中GSH-Px活性逐漸降低。

2.2.3 富硒后蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，生長過程中以濃度為 20 mg/L 亞硒酸鈉溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥苗、苦蕎麥苗不同生長時期下的GSH-Px活性，結(jié)果見圖6。

經(jīng)20 mg/L亞硒酸鈉溶液富硒處理的蕎麥苗GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。生長至14 d時，甜蕎麥苗GSH-Px活性為 0.739 8 μmol /（g·min），苦蕎麥苗GSH-Px活性為 0.860 1 μmol/（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的 GSH-Px 活性也逐漸增高。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol /（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol /（g·min），隨后蕎麥苗中的GSH-Px活性逐漸降低。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，對不同品種蕎麥、浸種處理、生長時間、硒使用濃度4個因素對蕎麥苗中GSH-Px活性、黃酮類化合物含量的影響進(jìn)行研究（表1、表2）。結(jié)果表明，當(dāng)亞硒酸鈉溶液濃度高于40 mg/L時對蕎麥出芽及生長產(chǎn)生了較大的抑制作用。

表2結(jié)果表明，以黃酮類化合物含量為指標(biāo)，蕎麥品種的極差最大，表明蕎麥品種的影響最大，各因素對黃酮類化合物的影響程度依次為C>B>A>D，且C因素對黃酮類化合物含量的影響達(dá)到了顯著性差異，反應(yīng)條件最佳組合為C2B4A3D1。以GSH-Px活性為指標(biāo)，富硒處理中的亞硒酸鈉溶液濃度影響最大，不同因素對GSH-Px活性的影響依次為B>A>C>D，最佳組合為B4A2C1D1，綜合考慮黃酮類化合物和GSH-Px活性2個指標(biāo)，蕎麥品種對黃酮類化合物的影響顯著，對GSH-Px活性的影響相對較小，亞硒酸鈉溶液濃度及浸種處理選擇一致的B4和D1。從蕎麥品種考慮，苦蕎黃酮類化合物含量遠(yuǎn)高于甜蕎，富硒后GSH-Px活性顯著提高。從生長天數(shù)考慮為16 d。綜合考慮，最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長時間16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為 40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

3 討論與結(jié)論

經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí)，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甜蕎麥苗，甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗。隨著生長時間延長，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量值達(dá)到最大，為12.584 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.125 mg/g；當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過富硒后，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量有所提高，苦蕎麥苗中的黃酮含量提高的幅度高于甜蕎麥苗；蕎麥苗的GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量達(dá)最大值，為12.847 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.895 mg/g。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時，GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol/（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過正交試驗(yàn)得出結(jié)論，綜合考慮富硒試驗(yàn)中最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長天數(shù)16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

參考文獻(xiàn)：

[1]Moskovitz J，Stadtman E R. Selenium-deficient diet enhances protein oxidation and affects methionine sulfoxide reductase （MsrB） protein level in certain mouse tissues[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2003，100（13）：7486-7490.

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[8]Flohe L. Assay of glutathione peroxidase[J]. Methods in Enzymelogy，1984，104：114-117.

2.2 單因素對蕎麥苗中GSH-Px活性的影響

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 按照“1.2.2”中的方法繪制GSH-Px標(biāo)準(zhǔn)曲線，GSH濃度分別為0、20、40、60、80、100 μmol/L，以GSH濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖4）。

2.2.2 不同生長時期蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥、苦蕎麥苗不同生長時期的GSH-Px活性，結(jié)果見圖5。甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗，當(dāng)生長至13 d時，甜蕎苗GSH-Px活性為0.724 4 μmol /（g·min），而苦蕎麥苗GSH-Px活性為0.306 1 μmol /（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的GSH-Px活性也逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、 0.597 7 μmol/（g·min）]隨后蕎麥苗中GSH-Px活性逐漸降低。

2.2.3 富硒后蕎麥苗中GSH-Px活性的變化 在常溫環(huán)境下甜蕎麥、苦蕎麥生長14～19 d，生長過程中以濃度為 20 mg/L 亞硒酸鈉溶液水培富硒，烘干粉碎后，采用分光光度法測定甜蕎麥苗、苦蕎麥苗不同生長時期下的GSH-Px活性，結(jié)果見圖6。

經(jīng)20 mg/L亞硒酸鈉溶液富硒處理的蕎麥苗GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。生長至14 d時，甜蕎麥苗GSH-Px活性為 0.739 8 μmol /（g·min），苦蕎麥苗GSH-Px活性為 0.860 1 μmol/（g·min），隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的 GSH-Px 活性也逐漸增高。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol /（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol /（g·min），隨后蕎麥苗中的GSH-Px活性逐漸降低。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，對不同品種蕎麥、浸種處理、生長時間、硒使用濃度4個因素對蕎麥苗中GSH-Px活性、黃酮類化合物含量的影響進(jìn)行研究（表1、表2）。結(jié)果表明，當(dāng)亞硒酸鈉溶液濃度高于40 mg/L時對蕎麥出芽及生長產(chǎn)生了較大的抑制作用。

表2結(jié)果表明，以黃酮類化合物含量為指標(biāo)，蕎麥品種的極差最大，表明蕎麥品種的影響最大，各因素對黃酮類化合物的影響程度依次為C>B>A>D，且C因素對黃酮類化合物含量的影響達(dá)到了顯著性差異，反應(yīng)條件最佳組合為C2B4A3D1。以GSH-Px活性為指標(biāo)，富硒處理中的亞硒酸鈉溶液濃度影響最大，不同因素對GSH-Px活性的影響依次為B>A>C>D，最佳組合為B4A2C1D1，綜合考慮黃酮類化合物和GSH-Px活性2個指標(biāo)，蕎麥品種對黃酮類化合物的影響顯著，對GSH-Px活性的影響相對較小，亞硒酸鈉溶液濃度及浸種處理選擇一致的B4和D1。從蕎麥品種考慮，苦蕎黃酮類化合物含量遠(yuǎn)高于甜蕎，富硒后GSH-Px活性顯著提高。從生長天數(shù)考慮為16 d。綜合考慮，最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長時間16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為 40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

3 討論與結(jié)論

經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí)，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甜蕎麥苗，甜蕎麥苗的GSH-Px活性高于苦蕎麥苗。隨著生長時間延長，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量值達(dá)到最大，為12.584 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.125 mg/g；當(dāng)生長至17 d時，甜蕎麥苗、苦蕎麥苗中GSH-Px活性都達(dá)到最大值，分別為0.847 7、0.597 7 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過富硒后，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量有所提高，苦蕎麥苗中的黃酮含量提高的幅度高于甜蕎麥苗；蕎麥苗的GSH-Px活性發(fā)生了較大變化，苦蕎麥苗的GSH-Px活性普遍高于甜蕎麥苗。隨著生長天數(shù)增加，蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸增高。當(dāng)生長至17 d時，苦蕎麥苗中黃酮類化合物含量達(dá)最大值，為12.847 mg/g；甜蕎麥苗中黃酮類化合物含量則在生長18 d時達(dá)到最大值，為8.895 mg/g。當(dāng)苦蕎苗生長至16 d時，GSH-Px活性達(dá)到最大值，為1.020 5 μmol/（g·min），當(dāng)甜蕎苗生長至18 d時GSH-Px活性達(dá)到最大值，為0.986 4 μmol/（g·min）。隨后蕎麥苗中的黃酮類化合物含量及GSH-Px活性逐漸降低。

經(jīng)過正交試驗(yàn)得出結(jié)論，綜合考慮富硒試驗(yàn)中最佳組合應(yīng)為A2B4C2D1，即生長天數(shù)16 d、亞硒酸鈉溶液培養(yǎng)濃度為40 mg/L、蕎麥品種為苦蕎、20 mg/L亞硒酸鈉溶液浸種處理。

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