彭世逞，吳昊，朱陳曾，尹鵬嘉，官宇，潘興兵，董華芳**

（1.西昌學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院，四川西昌615013；2.四川省煙草公司攀枝花市公司，四川攀枝花617000）

幾種藥劑對煙草赤星病菌的抑制作用*

彭世逞1，吳昊1，朱陳曾1，尹鵬嘉1，官宇2，潘興兵2，董華芳1**

（1.西昌學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院，四川西昌615013；2.四川省煙草公司攀枝花市公司，四川攀枝花617000）

本文為了向田間防治煙草赤星病提供高效、安全的殺菌劑，在室內(nèi)研究了4種殺菌劑對赤星病病原菌的毒力試驗。結(jié)果表明：不同濃度的殺菌劑對煙草赤星病菌絲的生長抑制效果不同。40%的菌核凈WP EC50值為29．84 mg/L，抑制效果最好；50%的腈菌三唑酮EC和10%多抗霉素B WP次之，其EC50分別為33．01 mg/L和30．02 mg/L；10%的多抗霉素（寶麗安）WP的抑制效果最差，其EC50為139．42mg/L。當(dāng)濃度達(dá)到100 mg/L時，50%的腈菌三唑酮EC、10%多抗霉素BWP和40%的菌核凈WP對煙草赤星病病原菌的抑制率分別達(dá)到了57．23%、66．52%和67．44%，而10%的多抗霉素（寶麗安）WP的抑制率只有45．39%。在一定范圍內(nèi)，各種藥劑隨著濃度的增大其抑制率也隨之增大。

煙草赤星??；室內(nèi)毒力試驗；抑制率

煙草赤星病[Alternaria longipes(Ell et Ev.) Tisdale et Wadk]是我國煙草生產(chǎn)的主要真菌性病害之一[1-3]。1916年該病首次在北京近郊被發(fā)現(xiàn)，1963年在河南及山東煙區(qū)開始流行，1990年后，該病迅速發(fā)展。據(jù)報道，該病年發(fā)病面積約10萬hm2，引起我國煙葉生產(chǎn)損失居第2位，僅次于病毒病為害[4，5]。

該病是煙葉成熟后期重要的葉部病害，具有潛育期短、流行性快的特點，病斑可產(chǎn)生明顯的同心輪紋，質(zhì)脆、易破[6]，條件適宜時，短時間內(nèi)可造成大流行，給煙葉生產(chǎn)造成較大損失[7]，1989～1991年，河南省因赤星病造成煙葉損失達(dá)2300萬元/年，成為毀滅性的病害[8-10]。

鏈格孢屬真菌[Alternaria alternata(Fries) Keissler]為煙草赤星病的主要病原菌[11]，屬真菌中半知菌亞門，具有淺褐色單生或者叢生的分生孢子梗，橫膈膜為1～3個。萌發(fā)初期分生孢子顏色較淺，成熟后則變成淺褐色呈卵圓形、橢圓形、倒棍棒狀等[5]。菌絲無色透明，有分隔[6]。赤星病菌生長的溫度范圍為4℃～38℃，適宜溫度為25℃～30℃，菌絲致死溫度50℃10 min，孢子致死溫度為50℃10 min[12]。

目前，煙草赤星病菌的防治都以化學(xué)防治為主，面對市場上種類繁多的農(nóng)藥，如何做出正確的選擇是有效防治煙草赤星病菌的前提。因此本文通過對不同藥劑進(jìn)行毒力測定，以期為大田生產(chǎn)選取抑制效果較為明顯的藥劑和為煙農(nóng)提供藥劑濃度配制的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2013年9月從攀枝花米易縣普威鎮(zhèn)大田感染煙草赤星病的煙葉上分離純化的赤星病菌。

1.2 試驗藥劑

本試驗供試藥劑的具體名稱、劑型及生產(chǎn)廠家見表1。

表1 供試藥劑

1.3 試驗設(shè)計

1.3.1 培養(yǎng)基的配制

2013年9月～11月在西昌學(xué)院植物病理實驗室，經(jīng)過預(yù)備試驗最終設(shè)定的藥劑試驗濃度分別為2、5、10、20、50、100 mg/L 6個濃度梯度（與培養(yǎng)基混合后的最終濃度）。向三角瓶中裝入配制好的PDA培養(yǎng)基，定容至81 mL，高溫滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻，尚未凝固時快速將稀釋好的各不同濃度的藥劑取9 mL分別倒入三角瓶中混合均勻，依次倒入直徑為6 cm的培養(yǎng)皿中，每個處理設(shè)三次重復(fù)，加9 mL無菌水與三角瓶中的培養(yǎng)基均勻混合倒成三個培養(yǎng)皿作為空白對照，待培養(yǎng)基冷卻后，在無菌操作臺上用滅菌后的打孔器在赤星病菌落邊緣打出菌餅，并將菌餅接種到培養(yǎng)皿的中央（一個培養(yǎng)皿一個菌餅），最后將接種好的培養(yǎng)皿放入28℃的恒溫箱中培養(yǎng)。

1.3.2 抑制效果的測定

將上述的含藥培養(yǎng)基在28℃的恒溫箱中培養(yǎng)6天后，用十字交叉法測定其菌落直徑[16]，3次重復(fù)的菌落直徑平均值作為最終的結(jié)果，并計算其抑制率，公式為：抑制率（%）=[（空白對照菌落直徑-處理菌落直徑）/空白對照菌落直徑]×100%。

根據(jù)抑制率—機率值轉(zhuǎn)換表將所求出的抑制率換算成抑制率機率值，同時將濃度轉(zhuǎn)換成對數(shù)，以抑制機率值為縱坐標(biāo)，以藥劑濃度的對數(shù)為橫坐標(biāo)做回歸直線，計算出4種殺菌劑對煙草赤星病病原菌的毒力回歸方程[17]，EC50（有效中濃度）和相關(guān)系數(shù)R。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對赤星病病原菌抑制效果比較

不同濃度的4種殺菌劑對煙草赤星病菌絲的生長有不同程度的抑制作用（表2），隨著藥劑濃度的增加，菌落直徑而減小，抑制率增大。依據(jù)菌落生長直徑的大小和抑制率分析可知，40%的菌核凈WP的效果最好，10%的多抗霉素（寶麗安）WP的度的抑制作用（表2），菌落直徑隨著藥劑濃度的增加而減小，抑制率增大。從菌落生長直徑的大小和抑制率來看，40%的菌核凈WP的效果最好，10%的多抗霉素（寶麗安）WP的效果最差。當(dāng)濃度達(dá)到100 mg/L時，40%的菌核凈WP對煙草赤星病病原菌的抑制率達(dá)到了67.44%，菌落直徑為2.25 cm；抑制率與之較為接近的是10%多抗霉素BWP為66.52%，菌落直徑為2.30 cm；而10%的多抗霉素（寶麗安）WP的菌落直徑達(dá)到了3.37 cm，抑制率只有45.39%。

表2 不同供試藥劑各濃度對赤星病病原菌的抑制效果

52 10%的多抗霉素（寶麗安）WP 100 50 20 10對照組5204.70 4.83 3.37 3.77 4.43 4.63 4.90 5.28 5.67 19.42 16.46 45.39 37.50 24.35 20.41 15.14 7.580 4.1367 4.0259 4.8844 4.6814 4.3047 4.1726 3.9678 3.56750

2.2 不同藥劑對赤星病病原菌的室內(nèi)毒力比較

不同藥劑對赤星病病原菌的抑制效果各有不同，EC50的值越小，抑制效果越好。40%的菌核凈的抑制效果最好，其EC50為29.84 mg/L；50%的腈菌三唑酮EC、10%多抗霉素BWP兩者的EC50分別為33.01 mg/L、30.02 mg/L；10%的多抗霉素（寶麗安）的抑制效果最差，其EC50為139.42 mg/L，毒力回歸方程的顯著性都為極顯著，詳見表3。

表3 不同藥劑對赤星病病原菌的毒力回歸方程

3 結(jié)論與討論

根據(jù)試驗可知，4種殺菌劑對赤星病病原菌的抑制效果不同，并且殺菌劑對赤星病病原菌的抑制率隨著殺菌劑濃度的增大而增加，根據(jù)試驗菌落生長情況和抑制率比較可知，40%的菌核凈WP的效果最好，在藥劑濃度為100 mg/L時菌落直徑為2.25 cm，抑制率達(dá)到67.44%；10%多抗霉素B WP次之，在藥劑濃度為100 mg/L時菌落直徑為2.3 cm，抑制率為66.52%；10%的多抗霉素（寶麗安）WP的效果最差，在藥劑濃度為100 mg/L菌落直徑為3.37 cm，抑制率才45.39%。依據(jù)李永平試驗，40%的菌核凈500倍液的防效很好[10]，這與本次的試驗結(jié)果相符，此外50%的撲海因可濕性粉劑1500倍液、代森錳鋅等也有較好的防效。

以EC50為依據(jù)，則10%的多抗霉素（寶麗安）WP的EC50最大為139.42 mg/L,其抑制效果最差，抑制效果最好的是40%的菌核凈，其EC50是29.84 mg/ L，這與分析抑制率的結(jié)論一致。

室內(nèi)試驗的最終目的是要應(yīng)用于大田，而這些藥劑的大田防效又是如何？需要結(jié)合各個煙區(qū)的陽光、氣候、溫度等環(huán)境條件施用再觀察，室內(nèi)毒力試驗結(jié)論只為大田煙草赤星病的化學(xué)防治提供一定的依據(jù)。因本次試驗藥劑選用范圍有限，試驗結(jié)果也存在一定的局限性。同時，生產(chǎn)上單一施用菌核凈防治煙草赤星病容易產(chǎn)生抗藥[18]，依據(jù)本次試驗進(jìn)一步的研究設(shè)想為幾種殺菌劑互配劑對煙草赤星病病原菌在大田的抑制效果測定。

注釋及參考文獻(xiàn)：

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Contrast Inhibition Efficacy of Some Fungicides on TobaccoAlternariaAlternate Pathogenic Bacteria

PENG Shi-cheng1，WU Hao1，ZHU Chen-zeng1，YIN Peng-jia1，GUAN Yu2，PAN Xing-bing2, DONG Hua-fang1
(1.School of Agricultural Science,Xichang College,Xichang,Sichuan 615013; 2.Panzhihua Tobacco Company of Sichuan Province,Panzhihua,Sichuan 617000）

Toxicities of four fungicides to Alternaria alternate pathogenic bacteria was studied in order to select its control chemicals.The results showed that the four fungicides at different levels could inhibit pathogenic mycelium growth of Alternaria alternate.The inhibit effect of 40%Dimethachlon WP was best with the EC50 of 29.84 mg/L.The 50%Nitrile bacteria triadimefon EC and 10%Polyoxins B WP were better,and the EC50 were 33.01 mg/L and 30.02 mg/L.While the inhibition effect of 10%Polyoxins(Polaroid Ann)WP was worst,the EC50 was only 139.42 mg/L.The bacteriostasis rates of 50%Nitrile bacteria triadimefon EC,10%Polyoxins B WP and 40% Dimethachlon WP were respectively 57.23%,66.52%and 67.44%,when ethephon concentration was 100 mg/L. While the inhibition rate of 10%Polyoxins(Polaroid Ann)WP was only 45.39%.Various fungicides inhibition rate also increase with the increase of concentration.

tobacco Alternaria alternate；indoor toxicity test；inhibition ratio

S435.72

A

1673-1891（2015）03-0001-03

2015-05-27

四川省煙草公司攀枝花市公司重點項目“翠碧系列品種選育與應(yīng)用”(項目編號：PZHYC20130016)。

彭世逞（1964-），男，四川金堂人，教授，主要從事煙葉生產(chǎn)技術(shù)研究。**為通信作者董華芳副教授。