王懷蓮 王 穎（遼寧省大連市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116031）

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血小板假性減少的原因分析

王懷蓮 王 穎
（遼寧省大連市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116031）

【摘要】目的 探討乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝劑致血小板計(jì)數(shù)假性減少原因分析及避免措施。方法 采用SYSMEX XT-1800i全自動血細(xì)胞分析儀及以EDTA-K2和枸櫞酸鈉為抗凝劑的真空采血管，檢測抗凝血，對血小板計(jì)數(shù)異常偏低的標(biāo)本涂片觀察血小板分布情況，對其中與計(jì)數(shù)明顯不符的，再次用枸櫞酸鈉為抗凝劑的真空采血管采血、計(jì)數(shù)。結(jié)果 用EDTA-K2抗凝血小板計(jì)數(shù)很低，用枸櫞酸鈉抗凝血小板計(jì)數(shù)正常。血涂片鏡檢顯示血小板成堆聚集。結(jié)論 少數(shù)對 EDTA-K2敏感的患者會發(fā)生由于血小板聚集而引起血小板假性減少應(yīng)引起我們的高度重視，并做好復(fù)檢工作。

【關(guān)鍵詞】EDTA-K2；抗凝劑；血小板假性減少

血小板在體內(nèi)主要參與止血與血栓形成，在止血、血栓的病理生理過程中起著重要作用，血小板的數(shù)量異常或功能缺陷是出血性疾病或血栓性疾病重要原因，因此，血小板的數(shù)量的檢測是臨床常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一。目前各級醫(yī)療單位廣泛使用全自動血液分析儀和以乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝劑的負(fù)壓采血管，但是EDTA-K2作為抗凝劑所致的假性血小板減少逐漸增多［1］，一旦發(fā)生此現(xiàn)象，如果沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)，將會給臨床帶來嚴(yán)重的醫(yī)療隱患。因此，這種假性血小板減少應(yīng)該受到廣泛重視。

1 資料與方法

1.1 病例來源：收集2013年4月至2014年4月我院門診和住院患者28300例，發(fā)現(xiàn)血小板假性減少25例。

1.2 儀器與材料：我院檢測的患者樣本是用日本希森美康公司的SYSMEX XT-1800i全自動血液分析儀，試劑為SYSMEX進(jìn)口試劑和質(zhì)控品，奧林帕斯光學(xué)顯微鏡，貝索瑞氏染液。BD公司以EDTA-K2枸櫞酸鈉為抗凝劑的真空采血管。

1.3 檢測與分析：采用SYSMEX XT-1800i全自動血細(xì)胞分析儀，患者順利采出2 mL，1 h內(nèi)完成檢測，檢查時(shí)完全按照操作規(guī)程，參照國際血液學(xué)復(fù)檢規(guī)則血小板直方圖圖形比較，對血小板計(jì)數(shù)異常偏低的標(biāo)本涂片染色，用貝索瑞氏血細(xì)胞染色液染色，用奧林帕斯光學(xué)顯微鏡油鏡狀態(tài)下對血涂片進(jìn)行鏡檢，發(fā)現(xiàn)血小板聚集成堆的就可確定為假性血小板減少，然后讓患者分別用兩種抗凝劑的采血管采血立即送檢。用SYSMEX XT-1800i全自動血液分析儀計(jì)數(shù)血小板數(shù)量。

1.4 血小板評估方法。血小板數(shù)量的評估方法參照國際血液學(xué)復(fù)檢專家推薦的方法：既油鏡下，在血涂片分布良好的區(qū)域，一個(gè)血小板大約相當(dāng)10×109/L的血小板數(shù)量。根據(jù)此方法我們用顯微鏡觀察血涂片，把10個(gè)以上血小板的聚集就會使分析儀計(jì)數(shù)減少50%，因此界定為血小板聚集，4個(gè)以下的血小板可忽略不計(jì)。

2 結(jié) 果

本實(shí)驗(yàn)觀察28300例患者，發(fā)現(xiàn)血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少的病例66例，并對其中的57例追蹤分析，可以確定以EDTA-K2為抗凝劑引起血小板假性減少的25例，可以看出EDTA-K2抗凝劑引起的血小板假性減少的發(fā)生率為0.12%。這25例患者用EDTA-K2抗凝劑的采血管采血，血小板計(jì)數(shù)明顯減少；用枸櫞酸鈉抗凝劑真空采血管采血，計(jì)數(shù)血小板數(shù)量為正常。用兩種抗凝劑所采的血標(biāo)本進(jìn)行涂片，瑞氏染色，油鏡下觀察EDTA-K2為抗凝劑的血涂片血小板大量聚集，每堆10個(gè)以上，以枸櫞酸鈉抗凝劑的血涂片血小板均勻分布在血涂片中。另外隨著時(shí)間的延長，血小板聚集的情況會越來越嚴(yán)重，團(tuán)塊會越來越大，而以枸櫞酸鈉抗凝劑的標(biāo)本隨著時(shí)間的延長聚集很弱，對血液分析儀計(jì)數(shù)影響甚微。還有2例是因采血不當(dāng)導(dǎo)致血小板被活化，聚集的假性血小板減少；另外2例是產(chǎn)生了冷凝集，將標(biāo)本置于37 ℃水浴30 min，馬上用儀器檢測血小板數(shù)量，結(jié)果為正常；制作血涂片觀察聚集情況，血涂片血小板均勻分布，無聚集。

3 結(jié) 論

EDTA-K2作為全血細(xì)胞分析的抗凝劑，已經(jīng)被ICSH認(rèn)定，并在臨床廣泛應(yīng)用［2］。但是經(jīng)常導(dǎo)致血小板發(fā)生聚集，這與血小板表面存在著隱匿性抗原相關(guān)，這樣使得在血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定中黏附在一起的血小板被視為非血小板而不被計(jì)數(shù)，導(dǎo)致血小板假性減少，而且大量成堆的血小板聚在一起，超過了血小板計(jì)數(shù)閾值設(shè)定的范圍，因此不被認(rèn)作血小板。我們可以采取改用其他抗凝劑的方法來消除EDTA-K2對血小板的作用，枸櫞酸鹽被認(rèn)為是解決EDTA依賴型假性血小板減少的主要方法之一。此外，對于EDTA依賴性血小板聚集導(dǎo)致的血小板減少可以手工計(jì)數(shù)血小板加以矯正，同時(shí)可通過血小板直方圖來協(xié)助。

EDTA依賴性血小板減少癥（PTCP）是一種發(fā)生于體外的EDTA誘導(dǎo)的血小板非穩(wěn)固性聚集，臨床表現(xiàn)為無出血現(xiàn)象的重型假性血小板減少癥［3］。PTCP可能與血漿中存在的抗血小板抗體或抗心磷脂抗體等自身抗體有關(guān)，但無任何病理、生理意義，也與特殊藥物使用有關(guān)，多發(fā)生在腫瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病。

EDTA依賴性血小板減少癥（PTCP）如果實(shí)驗(yàn)室不及時(shí)糾正檢驗(yàn)結(jié)果，無故增加患者不必要的輔助檢查，將會導(dǎo)致臨床誤診、誤治。這就要求檢驗(yàn)人員，一定要有高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)。對臨床上無任何出血癥狀與體征、凝血機(jī)制正常而血小板計(jì)數(shù)明顯減少者，建議改用枸櫞酸鈉抗凝或手工計(jì)數(shù)血小板，并結(jié)合血涂片檢查，不能完全依賴全自動血細(xì)胞分析儀的檢測結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

［1］ 王明慧.EDTA依賴性假性血小板減少癥的臨床分析［J］.中國醫(yī)藥指南，2014，5（13）:317-318.

［2］ 李麗紅，金玲，李威， 等.我院56例EDTA依賴性假性血小板減少病例分析及臨床處理［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2013，17（12）:2232-2234.

［3］ 胡先泳，陳峻.EDTA依賴性假性血小板減少癥血小板檢測［J］.血栓與止血，2013，19（5）:227-230.

中圖分類號：R558

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）12-0054-01