超微粉碎技術(shù)對(duì)肉蓯蓉有效成分含量的影響

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超微粉碎技術(shù)對(duì)肉蓯蓉有效成分含量的影響

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目的探討超微粉碎技術(shù)在肉蓯蓉粉碎中的應(yīng)用效果。方法對(duì)照組應(yīng)用普通粉碎機(jī)粉碎肉蓯蓉，實(shí)驗(yàn)組使用超微粉碎機(jī)粉碎，用HPLC法測(cè)定兩組有效成分含量。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論與普通粉碎機(jī)相比，應(yīng)用超微粉碎機(jī)粉碎肉蓯蓉的效果更佳，能夠有效提高松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量。

肉蓯蓉；超微粉碎；含量

管花肉蓯蓉為列當(dāng)科植物，具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、潤(rùn)腸通便的功效，是目前市場(chǎng)上產(chǎn)量最大，使用量最多的肉蓯蓉［1］。粉碎是中藥制劑制備的基本步驟，可促進(jìn)藥物的溶解與吸收，便于調(diào)劑和服用［2］。本研究主要對(duì)比分析普通粉碎和超微粉碎對(duì)肉蓯蓉粉碎效果的影響，為進(jìn)一步提高肉蓯蓉的開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料

選用超微粉碎機(jī)（江陰普友粉體設(shè)備有限公司），安捷倫1260型高效液相色譜儀（美國(guó)），普通粉碎機(jī)（山東臨清宏源制藥設(shè)備有限公司）。管花肉蓯蓉采自新疆喀什地區(qū)的人工植場(chǎng)，經(jīng)干燥后剪碎備用；松果菊苷、毛蕊花糖苷標(biāo)準(zhǔn)品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；甲醇、乙腈均為色譜純；醋酸為分析純。

2 方法

2.1 粉末制備

兩組稱取等量的肉蓯蓉，對(duì)照組在普通粉碎機(jī)粉碎過(guò)100目篩；實(shí)驗(yàn)組在超微粉碎機(jī)過(guò)400目篩，取出備檢。

2.2 肉蓯蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量測(cè)定

主要參照《中國(guó)藥典》（2010版）［3］，應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量，具體操作如下。

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Hypersil-C18（4.6 mm×200 mm，5μm）；流動(dòng)相：1%醋酸-乙腈-甲醇溶液（75：10：15）；柱溫：30℃；流速：0.65 ml/min；波長(zhǎng)：334 mm。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液制定 分別稱取2.0 mg毛蕊花糖苷標(biāo)準(zhǔn)品、松果菊苷標(biāo)準(zhǔn)品于10 ml的容量瓶中，加入50%甲醇溶液混合定容，用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，制成標(biāo)準(zhǔn)品溶液，存放于-4℃環(huán)境中，待用。

2.2.3 供試品溶液制定 稱取實(shí)驗(yàn)組粉末1.0 g于100 ml容量瓶中，加入50 ml 50%甲醇封口，搖勻后稱重，浸潤(rùn)30 min，超聲波處理40 min，冷卻后稱重。計(jì)算超聲處理前后的重量差，加入50%甲醇補(bǔ)給，搖勻靜置取上清液過(guò)濾制成供試品溶液。

2.2.4 方法學(xué)考察 （1）線性關(guān)系考察。吸取毛蕊花糖苷、松果菊苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液2.0 μl、4.0 μl、6.0 μl、8.0 μl、10.0 μl，采用微孔濾膜過(guò)濾后，在“2.2.1”色譜條件下測(cè)定樣品色譜峰面積，以峰面積和濃度為坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行回歸分析。結(jié)果顯示毛蕊花糖苷、松果菊苷的線性回歸方程分別為y=1 549.2x+34.16（r=0.999 8）、y=1 310.4x+25.18（r=0.999 5），提示毛蕊花糖苷、松果菊苷在0.39～4.11 μg、0.42～4.04 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

（2）精密度試驗(yàn)。精密吸取毛蕊花糖苷、松果菊苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液10.0 μl，在相同色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積并計(jì)算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，結(jié)果分別為0.30%、0.50%，均小于＜2.0%，符合藥典規(guī)定，提示儀器精密度良好。

（3）穩(wěn)定性試驗(yàn)。于2 h、4 h、8 h、12 h、24 h吸取供試品溶液，采用相同色譜條件，進(jìn)樣10 μl，測(cè)定峰面積并計(jì)算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，分別為1.78%、1.85%，提示供試品溶液在24 h內(nèi)較為穩(wěn)定。

（4）重復(fù)性試驗(yàn)。稱取適量樣品，按照“2.2.3”方法制備6份供試品溶液，采用“2.2.1”色譜條件，進(jìn)樣10 μl，以峰面積計(jì)算毛蕊花糖苷、松果菊苷的RSD，分別為0.84%、0.55%，提示本方法具有較好的重復(fù)性。

（5）回收率試驗(yàn)。稱取0.5 g已知含量的樣品，依次加入一定量的毛蕊花糖苷、松果菊苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按“2.2.3”方法制備溶液，在同樣色譜條件下進(jìn)樣10 μl，對(duì)峰面積進(jìn)行測(cè)定并計(jì)算回收率，結(jié)果由表1可知，該方法測(cè)得的毛蕊花糖苷、松果菊苷平均回收率分別為98.6%、100.5%，RSD值均小于2%，提示該法較為準(zhǔn)確，可應(yīng)用于毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量測(cè)定。

表1 肉蓯蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷回收率

（6）測(cè)定樣品含量。分別稱取兩組粉末各1.0 g，按“2.2.3”方法制備4份供試品溶液，在“2.2.1”色譜條件下進(jìn)樣分析，對(duì)峰面積進(jìn)行測(cè)定并分別計(jì)算毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)測(cè)定，實(shí)驗(yàn)組毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量比較 （）

表2 兩組毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量比較 （）

注：a與對(duì)照組比較，P＜0.05

4 討論

管花肉蓯蓉具有補(bǔ)腎陽(yáng)、益精血、潤(rùn)腸的功效，藥用價(jià)值較高，有“沙漠人參”的美稱，備受人們所青睞。相關(guān)研究報(bào)道［4］，肉蓯蓉中的主要成分苯乙醇總苷具有抗氧化、提高免疫力、治療不孕、加強(qiáng)記憶力等藥理作用。因此，有效地提取肉蓯蓉的有效成分制成多種劑型，有助于提高藥物的功效。

以往一般應(yīng)用浸漬法、煎煮法、索氏提取法等提取肉蓯蓉有效成分，這些方法提取時(shí)間長(zhǎng)，溶液需求量大，提取效率較低［5］。近年隨著制藥技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了微波提取法、超微粉碎法等，大大提高了肉蓯蓉有效成分的提取率［6］?，F(xiàn)為進(jìn)一步探討普通粉碎與超微粉碎的差異，本研究取等量的肉蓯蓉分別進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組毛蕊花糖苷、松果菊苷的含量高于對(duì)照組（P＜0.05），提示與普通粉碎相比，超微粉碎的粉碎效果更佳。在實(shí)際制藥過(guò)程中可發(fā)現(xiàn)，普通粉碎所需提取時(shí)間更長(zhǎng)或溶劑劑量更多，大大浪費(fèi)了制藥資源［7］；而超微粉碎后的粉末屬于微粉的范疇（微米級(jí)范圍），增加了肉蓯蓉粉末的表面積和孔隙率，更有利于松果菊苷、毛蕊花糖苷的溶出，進(jìn)而提高了肉蓯蓉的生物利用度和治療效果［8］。

綜上，與普通粉碎機(jī)相比，應(yīng)用超微粉碎機(jī)粉碎肉蓯蓉的效果更佳，提高松果菊苷、毛蕊花糖苷的溶出度。

［1］王運(yùn)濤，王興軍. 山東省東營(yíng)檉柳接種管花肉蓯蓉獲得成功［J］.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，47（8）：157.

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［3］國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典［S］. 一部. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010. 附錄 XIX 194.

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Effect of Superfine Pulverizing on the Contents of Effective Constituents of Cistanche Deserticola Ma

LU Ailian1CHEN Qingpei21 Pharmacy Department，Ningkang Hospital，Nanping Fujian 353000，China，2 Xiamen Medicine Research Institute，Xiamen Fujian 361000，China

ObjectiveTo explore the effect of superfine pulverizing on the contents of effective constituents of Cistanche Deserticola Ma.MethodsThe contents of the active ingredient was compared between ordinary and superfine pulverization.ResultsActeoside，echinacoside contents in the experimental group were higher than control group（P＜0.05）.ConclusionCompared with ordinary grinder，superfine crusher can effectively improve echinacoside acteoside contents.

Cistanche deserticola ma，Superfine pulverizing，Contents

R284

A

1674-9316（2016）24-0127-03

10.3969/j.issn.1674-9316.2016.24.074

1 福建省南平市寧康醫(yī)院藥劑科，福建 南平 353000；2 福建省廈門(mén)市醫(yī)藥研究所，福建 廈門(mén) 361000