張　揚(yáng)(連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，江蘇 連云港　222100)

?

復(fù)方中藥組方抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究

張揚(yáng)*(連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，江蘇 連云港222100)

DOI10.14009/j.issn.1672-2124.2016.02.021

摘要目的：研究復(fù)方中藥組方的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法：用復(fù)方中藥組方治療尿酸鈉誘導(dǎo)的急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠，觀測(cè)治療前后大鼠受試關(guān)節(jié)體積；用小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)、小鼠熱水甩尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)復(fù)方中藥組方對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：在對(duì)復(fù)方中藥組方的抗炎作用研究中發(fā)現(xiàn)，復(fù)方中藥組方在各時(shí)間段均有顯著減低大鼠足趾發(fā)炎程度的效果。在對(duì)復(fù)方中藥組方的鎮(zhèn)痛作用研究中發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，復(fù)方中藥組方高、中劑量組能極顯著地提高小鼠甩尾反應(yīng)潛伏期；復(fù)方中藥組方高劑量組能極顯著地降低醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：復(fù)方中藥組方有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛療效。

關(guān)鍵詞復(fù)方中藥組方； 急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎； 鎮(zhèn)痛； 抗炎

Research on Effects of Chinese Medicines Section on Anti-inflammatory and Analgesic

ZHANG Yang(Dept.of Pharmacy，People’s Hospital of Lianyungang Ganyu District，Jiangsu Lianyungang 222000，China)

ABSTRACTOBJECTIVE：To investigate the effects of Chinese medicines section(AG) on anti-inflammatory and analgesic. METHODS：The model rats with acute gouty arthritis caused by sodium urate were treated with AG，then the joint volume of tested rats were observed before and after treatment. Through the experiment of mice writhing and mice tail-flicking，the effects of AG on analgesic were detected. RESULTS：Through the research on anti-inflammatory experiment，AG could significantly decrease the degree of inflammation in rat paw in each period. Through the research on analgesic experiment，compared with blank control group，the high and middle dose groups of AG could significantly increase the response latency of mice tail-flicking; the high dose group could significantly decrease the times of writhing response. CONCLUSIONS：AG has significant and accurate anti-inflammatory and analgesic effects.

KEYWORDSChinese medicines section； Acute gouty arthritis； Analgesic； Anti-inflammatory

痛風(fēng)是一種以持續(xù)性高尿酸血癥導(dǎo)致尿酸鈉晶體在關(guān)節(jié)及其周?chē)M織沉積為特征的代謝性疾病[1-2]。尿酸鹽在滑膜組織的沉積及其引起的炎癥是急性痛風(fēng)發(fā)作的基礎(chǔ)[3-4]。國(guó)內(nèi)外用于控制急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物主要有秋水仙堿、非甾體抗炎藥等，但由于毒副作用較大限制了藥物的應(yīng)用[5-7]。連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“我院”)根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)配方研制出復(fù)方中藥組方(AG)，經(jīng)初步篩選療效較好，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)，本研究對(duì)其抗炎、鎮(zhèn)痛等指標(biāo)進(jìn)行研究，探討其防治痛風(fēng)的作用[8-9]，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料

1.1動(dòng)物

清潔級(jí)小鼠120只，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半，由揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，許可證號(hào)：SCXK蘇2014-0005；清潔級(jí)大鼠70只，體質(zhì)量180～220 g，雌性，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK浙2014-0009。

1.2藥品與試劑

AG：包括三七、冰片等成分，現(xiàn)成分及配比保密，將該復(fù)方濃縮成浸膏并干燥，1 g浸膏相當(dāng)于6.8 g生藥，三七及冰片磨成粉末入藥，各成分按照處方混合。藥物配制：臨用前用0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)研磨配制成所需濃度的均勻混懸液。吲哚美辛(山西云鵬制藥有限公司，規(guī)格：每片25 mg，批號(hào)：A140102)；痛風(fēng)舒片(湖南康普制藥有限公司，規(guī)格：每片0.32 g，批號(hào)：20131102)；冰醋酸(分析純，南京化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：13071610661)；秋水仙堿(昆明制藥集團(tuán)有限公司，規(guī)格：每片0.5 mg，批號(hào)：130823-01)；尿酸鈉(美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：121254025)。

1.3方法

1.3.1尿酸鈉晶體的制備：取194 ml蒸餾水加6 ml 1M氫氧化鈉，煮沸后加1 g尿酸鈉，用稀鹽酸至pH 7.2，攪拌冷卻，貯存于4 ℃冰箱中24 h，去上清液，用濾紙將沉淀物水份吸干，干燥即可得尿酸鈉結(jié)晶。取2 500 mg尿酸鈉結(jié)晶，加入22.5 ml的0.9%氯化鈉注射液，同時(shí)加入2.5 ml聚山梨酯-80，加熱攪拌，配成50 ml尿酸鈉混懸液(100 mg/ml)備用[10]。

1.3.2急性痛風(fēng)性大鼠關(guān)節(jié)炎模型的建立及實(shí)驗(yàn)方法：取大鼠70只，體質(zhì)量180～220 g，雌性，按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、秋水仙堿組、痛風(fēng)舒片組及AG高、中、低劑量組。分別灌胃給藥，1日1次，連續(xù)14 d，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組大鼠灌胃等量的CMC-Na。于末次給藥后30 min，在空白對(duì)照組注射0.1 ml的0.9%氯化鈉注射液，在其他各組每只大鼠右后足踝關(guān)節(jié)內(nèi)注入0.1 ml尿酸鈉溶液(按Coderre[3]等經(jīng)典方法略作改進(jìn)，用6號(hào)注射針在受試大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)背側(cè)，從45°方向插入脛骨肌膜內(nèi)側(cè)，將0.1 ml尿酸鈉溶液注入到踝關(guān)節(jié)腔，形成急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型)。給藥前測(cè)各鼠右踝關(guān)節(jié)下0.5 mm直徑。致炎后每1 h用足趾容積測(cè)量?jī)x測(cè)各鼠右踝關(guān)節(jié)容積1次，連續(xù)測(cè)5 h，以致炎前、后測(cè)定差值為關(guān)節(jié)腫脹程度。足趾腫脹率(%)=致炎后足趾容積(ml)/致炎前足趾容積(ml)-1×100%。腫脹抑制率(%)=1-給藥組腫脹率平均值(%)/模型組腫脹率平均值(%) ×100%。

1.3.3熱水所致小鼠甩尾實(shí)驗(yàn)：取清潔級(jí)小鼠60只，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半，按隨機(jī)數(shù)字表法分為6組，每組10只，分別為空白對(duì)照組，吲哚美辛組，痛風(fēng)舒片組及AG高、中、低劑量組。灌胃給藥，給藥容積為0.2 ml/10 g，對(duì)照組小鼠灌胃等容積的0.5%CMC-Na溶液，1日1次，連續(xù)7 d。末次給藥后30 min，以(55±1)℃的恒溫?zé)崴疄橹峦丛?，在給藥后0.5 h用秒表測(cè)每只小鼠用藥前尾尖 5 cm 浸入熱水持續(xù)時(shí)間(以甩尾為終點(diǎn))作為基礎(chǔ)痛閾。計(jì)算其痛閾的提高率，并將給藥前后甩尾潛伏期進(jìn)行t檢驗(yàn)評(píng)價(jià)藥效，見(jiàn)表1。痛覺(jué)提高閾(%)=1-給藥組甩尾潛伏期/空白對(duì)照組甩尾潛伏期×100%。

1.3.4醋酸所致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)：取清潔級(jí)小鼠60只，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半，按隨機(jī)數(shù)字表法分為6組，每組10只，分別為空白對(duì)照組，吲哚美辛組，痛風(fēng)舒片組，AG高、中、低劑量組。連續(xù)灌胃7 d，對(duì)照組小鼠灌胃給藥等容積的0.5% CMC-Na溶液。末次灌胃后30 min，腹腔注射0.7%冰醋酸0.1 ml/10 g。觀察每組小鼠15 min內(nèi)平均扭體反應(yīng)次數(shù)，從而計(jì)算鎮(zhèn)痛率。鎮(zhèn)痛率(%)=1-給藥組平均扭體次數(shù)/空白對(duì)照組平均扭體次數(shù)×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1各組大鼠關(guān)節(jié)腫脹情況比較

AG對(duì)尿酸鈉所致大鼠關(guān)節(jié)炎腫脹的影響見(jiàn)表1。

2.2各組小鼠對(duì)熱水所致小鼠甩尾反應(yīng)的比較

6組小鼠對(duì)熱水所致小鼠甩尾反應(yīng)的情況見(jiàn)表2。

2.3各組小鼠醋酸所致扭體反應(yīng)次數(shù)的比較

6組小鼠醋酸所致扭體反應(yīng)次數(shù)的12]情況見(jiàn)表3。

3討論

近年來(lái)，由于經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)展、飲食結(jié)構(gòu)的改變以及人類(lèi)壽命的增長(zhǎng)，痛風(fēng)的發(fā)病率日益提高，成為當(dāng)今世界中年男性的常見(jiàn)病[13]，大量的研究結(jié)果證明，中醫(yī)藥治療痛風(fēng)有肯定療效[14-15]。AG是我院研究開(kāi)發(fā)的治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的中藥復(fù)方，配方包括三七、冰片等，對(duì)痛風(fēng)有較好的治療效果。為闡明該復(fù)方的藥效學(xué)基礎(chǔ)，本研究對(duì)其進(jìn)行了抗炎鎮(zhèn)痛方面的實(shí)驗(yàn)研究。

通過(guò)尿酸鈉所致大鼠關(guān)節(jié)炎腫脹實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組在1 h的足趾腫脹率有顯著提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在2～4 h的足趾腫脹率有極顯著提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明造模是成功的，形成了大鼠關(guān)節(jié)炎模型。與模型對(duì)照組相比，秋水仙堿組在1～5 h均可極顯著的降低由尿酸鈉所致大鼠足跖腫脹發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；痛風(fēng)舒組在2 h可以顯著的降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在3～5 h均可極顯著地減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；AG高劑量組在1～2 h均可顯著地降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在3～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；AG中劑量組在3～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；AG低劑量組在3 h可顯著的降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在4～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

通過(guò)熱水所致小鼠甩尾試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，吲哚美辛組和AG高劑量組均能極顯著的提高小鼠甩尾反應(yīng)潛伏期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；痛閾提高率分別為33.33%和28.95%，痛風(fēng)舒片組和AG中劑量組均能顯著提高小鼠甩尾反應(yīng)潛伏期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，痛閾提高率分別為27.19%和23.25%。

±s)

注：與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無(wú)相關(guān)數(shù)據(jù)

Note：vs. model control group，*P<0.05，**P<0.01；vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

±s)

注：與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無(wú)相關(guān)數(shù)據(jù)

Note：vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

±s)

注：與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無(wú)相關(guān)數(shù)據(jù)

Note：vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

通過(guò)醋酸所致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，吲哚美辛組和AG高劑量組均能極顯著的降低醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，鎮(zhèn)痛率分別為42.76%和36.40%，痛風(fēng)舒片組能顯著的降低醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，鎮(zhèn)痛率為20.14%。

綜上所述，AG有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用，其療效相比于西藥陽(yáng)性藥較弱，相比于中藥陽(yáng)性藥痛風(fēng)舒片較強(qiáng)，有進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)的價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]Merry R Sherman, Mark GP Saifer, Fernando Perez Ruiz. PEG-u ricase in them a agemen t of treatment resistant gout and hyperricemia[J].Advanced Drug Delivery Reviews,2008,60(1)：59-68.

[2]范江華，范江諾，張學(xué)順，等.痛風(fēng)發(fā)生因素分析與預(yù)防對(duì)策[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8(6)：18-20.

[3] Coderre TJ,Wall PD.Ankle joint urate arthritis in rats provided useful tool for the evaluation of analgesic and anti-arthritic agents[J].Pharm Biochem Behav，1988,29(2):461.

[4]崔炎，王平，張榜，等.急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎與血尿酸及尿酸鹽結(jié)晶的關(guān)系[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2014，20(5):501-503.

[5]林杰.不同劑量秋水仙堿治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的效果比較[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2014，21(5)：80-83.

[6]羅偉軍，楊雪梅，陶怡.中西醫(yī)結(jié)合治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7(11)：28-29.

[7]陳珺秋.小劑量秋水仙堿與非甾體類(lèi)藥物聯(lián)合治療痛風(fēng)急性關(guān)節(jié)炎的療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10(28)：137-138.

[8]于泓，袁良東，姚觀平，等.抗痛風(fēng)膠囊對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠的抗炎作用及機(jī)制探討[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(6):283-286.

[9]周麗雅，李欣，姜春霞.痛風(fēng)通絡(luò)方對(duì)尿酸鈉誘導(dǎo)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的抗炎鎮(zhèn)痛研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2014，41(10)：2237-2239.

[10]Coderre TJ,Wall PD.Ankle joint oratearthritis in ratian alternative animal model of arthritis to that produced by freunds cdjuvant [J].Pain,1987(28):379.

[11]徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001:911.

[12]陳奇，鄧文龍，張世瑋，等.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993:378.

[13]王昱，張卓莉.痛風(fēng)難治的原因和治療現(xiàn)狀[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志，2014，6(10)：11-15.

[14]臧力學(xué).慢性尿酸性腎病的中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，2006，13(2)：136.

[15]鄢妘.痛風(fēng)病的中藥治療及其機(jī)制研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010，6(11):164-166.

(收稿日期：2015-11-09)

中圖分類(lèi)號(hào)R932

文獻(xiàn)標(biāo)志碼A

文章編號(hào)1672-2124(2016)02-0198-03

*主管藥師。研究方向：藥學(xué)、醫(yī)改、農(nóng)村公共衛(wèi)生。 E-mail：gyxwsjdcb@126.com