艾滋病病毒抗體檢測(cè)初篩實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制措施探微

周建德

（昆明鐵路局疾病預(yù)防控制中心 云南昆明 650011）

艾滋病病毒抗體檢測(cè)初篩實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制措施探微

周建德

（昆明鐵路局疾病預(yù)防控制中心 云南昆明 650011）

目的：為提高艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè)實(shí)驗(yàn)精度，降低誤檢或漏檢率，提高檢測(cè)工作質(zhì)量。方法：我實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照《艾滋病檢測(cè)質(zhì)量管理工作指南》開(kāi)展艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性符合標(biāo)準(zhǔn)，工作質(zhì)量得到提高。結(jié)論：必須關(guān)注影響艾滋病初篩檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素，采取有效的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制措施，從而提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平及工作能力。

艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè) 質(zhì)量控制 措施探微

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，不同地區(qū)及人們之間交流的逐漸增加，艾滋病防治形勢(shì)日漸嚴(yán)峻，病情監(jiān)測(cè)與抗體檢測(cè)工作任務(wù)逐漸加重，而確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性是HIV抗體檢測(cè)工作的首要要求［1］。然而HIV抗體檢測(cè)實(shí)際工作中，其檢測(cè)結(jié)果卻受到實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、工作人員能力、態(tài)度等因素的影響。因此我們有必要探討提高HIV抗體檢測(cè)初篩實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)控制措施。具體報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1 試劑［2］我實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中采用的試劑有英科新創(chuàng)試劑（廈門(mén)英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)）和珠海麗珠試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)）。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室采用的2種試劑經(jīng)過(guò)國(guó)家衛(wèi)生部批準(zhǔn)注冊(cè)并且均在規(guī)定的有效期內(nèi)使用，質(zhì)量可靠。

1.1.2 血清來(lái)源 本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)血清均來(lái)源于昆明鐵路公安處看守所羈押人員。

1.1.3 儀器設(shè)備 本實(shí)驗(yàn)室用到的儀器有：酶標(biāo)儀、移液器、洗板機(jī)、生物安全柜、恒溫水浴箱等；所有儀器均經(jīng)過(guò)云南省計(jì)量測(cè)試技術(shù)研究院校準(zhǔn)合格并在有效期內(nèi)使用。

1.2 操作及質(zhì)量控制措施

1.2.1 弱陽(yáng)性外部對(duì)照質(zhì)控血清制備 混合HIV抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性或陰性的正常人血清，對(duì)其進(jìn)行離心過(guò)濾處理3000轉(zhuǎn)/min，離心15min；隨后進(jìn)行過(guò)濾除菌處理（0.2μm生物濾膜）；然后在56攝氏度下持續(xù)加熱30min完成熱滅活處理。用抗體陰性正常血清稀釋抗體強(qiáng)陽(yáng)性血清，稀釋度保持在OD值處于2-3倍Cut-off值范圍內(nèi)。批量植被后分裝塑料試管保存在-70℃冰箱內(nèi)備用。

1.2.2 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)步驟進(jìn)行艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè)。

1.2.3 質(zhì)控措施

1.2.3.1 室內(nèi)設(shè)施與環(huán)境控制 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)完全符合《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作規(guī)范》的要求，并具備清潔區(qū)、污染區(qū)、半污染區(qū)等獨(dú)立區(qū)域。實(shí)驗(yàn)室溫度嚴(yán)格控制在18-23攝氏度之間。另外，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合BSL-2要求。

1.2.3.2 儀器設(shè)備控制 檢測(cè)用到的實(shí)驗(yàn)設(shè)備應(yīng)齊全，各類(lèi)防護(hù)設(shè)施用品完備；酶標(biāo)儀、溫度計(jì)、移液器、高壓滅菌器等儀器需每年進(jìn)行1次強(qiáng)制性檢定并在有效期內(nèi)使用。

1.2.3.3 人員控制 實(shí)驗(yàn)室至少要具備三名以上專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員，其中：具有中級(jí)技術(shù)職稱(chēng)且有2年以上本工作經(jīng)驗(yàn)的人員至少1名。并且所有人員都需接受相應(yīng)的省級(jí)技術(shù)培訓(xùn)并取得資格證書(shū)；每2年至少接受一次省級(jí)技術(shù)規(guī)范復(fù)訓(xùn)。另外，專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員還應(yīng)取得壓力容器作業(yè)資格證書(shū)，具備高壓滅菌器操作資格。

1.2.3.4 檢測(cè)方法控制 嚴(yán)格按照2009版《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作規(guī)范》進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3.5 檢測(cè)質(zhì)量控制 ①?lài)?yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)設(shè)立陽(yáng)性和陰性血清對(duì)照；②嚴(yán)格按照規(guī)范制備外部對(duì)照質(zhì)控血清；③根據(jù)外部對(duì)照質(zhì)控血清的測(cè)定數(shù)據(jù)建立質(zhì)控圖，并對(duì)質(zhì)控圖進(jìn)行仔細(xì)分析與總結(jié)，且存檔保存質(zhì)控圖。

1.2.3.6 實(shí)驗(yàn)室管理控制 必須建立嚴(yán)格的生物安全管理制度和實(shí)驗(yàn)室管理制度，且各項(xiàng)操作均需具備規(guī)范的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。在進(jìn)行日常管理時(shí)應(yīng)該嚴(yán)格樣品接收登記記錄、檢測(cè)原始記錄、酶標(biāo)儀打印記錄、廢棄物消毒記錄、儀器維護(hù)與使用記錄、儀器維修與檢定記錄等工作，不能遺漏任何一項(xiàng)，同時(shí)每天填寫(xiě)實(shí)驗(yàn)室工作日志。而且，酶標(biāo)儀打印記錄與樣品結(jié)果報(bào)告必須保持一致。另外，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的所有檔案均需要保存15年以上，并且要確保檔案文件的完整性。

2 結(jié)果

檢測(cè)過(guò)程中未出現(xiàn)異常，質(zhì)控血清測(cè)定值未超過(guò)±2s；且質(zhì)控血清測(cè)定值均勻散落在均值兩側(cè)，未出現(xiàn)連續(xù)幾個(gè)值（3-5個(gè)）落于一側(cè)的狀況；另外，不存在連續(xù)幾個(gè)值（5-7個(gè)）按照同一方向分布的情況發(fā)生。

3 討論

艾滋病病毒抗體初篩檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中導(dǎo)致檢測(cè)工作質(zhì)量失控的原因，根據(jù)以往的實(shí)踐研究可以發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致質(zhì)量失控的常見(jiàn)原因有：酶標(biāo)儀等實(shí)驗(yàn)室儀器未能定期檢定；移液器等需要校準(zhǔn)的儀器未能及時(shí)校準(zhǔn)；實(shí)驗(yàn)室溫度過(guò)高或者過(guò)低，超出規(guī)定范圍；溫育時(shí)間不準(zhǔn)確，過(guò)長(zhǎng)或者過(guò)短；實(shí)驗(yàn)室所用電源電壓不穩(wěn)致使儀器出現(xiàn)波動(dòng)；實(shí)驗(yàn)所用試劑質(zhì)量不合格或超過(guò)試劑有效期使用；試劑批號(hào)出現(xiàn)變化等等［3］。

一旦實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中出現(xiàn)以上問(wèn)題，我們必須要終止檢測(cè)，及時(shí)采取措施糾正問(wèn)題，并再進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)。然而在檢測(cè)中做好質(zhì)量控制管理才是確保檢測(cè)工作質(zhì)量的關(guān)鍵。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室工作，我們發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該做好的室內(nèi)質(zhì)量控制管理措施主要有以下三點(diǎn)：

第一，嚴(yán)格按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》等有相關(guān)部門(mén)制定的規(guī)章制度，結(jié)合自身實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況建立嚴(yán)格、規(guī)范、全面、系統(tǒng)的質(zhì)量管理體系。對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、工作人員、儀器、檢測(cè)流程等進(jìn)行嚴(yán)格管理要求。

第二，檢測(cè)必須要建立質(zhì)控圖，有質(zhì)控圖才能保證在檢測(cè)中及時(shí)對(duì)失控原因進(jìn)行查找糾正，降低假陽(yáng)性及假陰性結(jié)果出現(xiàn)機(jī)率，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

第三，實(shí)驗(yàn)室工作人員要及時(shí)積極參加市級(jí)及以上規(guī)格的技術(shù)培訓(xùn)活動(dòng)及能力驗(yàn)證考核，不斷提高自己的工作能力水平，充實(shí)自己的工作經(jīng)驗(yàn)。

［1］袁彬，吳蘭，王玲，等.艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制影響因素［J］.中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)，2014，（16）：131-132.

［2］常艷萍.基層艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制［J］.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（連續(xù)型電子期刊），2015，（32）：136-136.

［3］胡倫文，雷少華.探討艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化建設(shè)和管理［J］.中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2015，（5）：97-98.

R18

A

1674-2060（2016）02-0079-01