HGF/c-Met信號(hào)通路在克唑替尼誘導(dǎo)不同肺癌細(xì)胞株凋亡中的作用*

呂金益，　董芷辛，　李婭妮 ，　寧瑞玲，　宋向群，　周韶璋△

(廣西醫(yī)科大學(xué) 1附屬腫瘤醫(yī)院， 2研究生院，廣西 南寧 530021)

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HGF/c-Met信號(hào)通路在克唑替尼誘導(dǎo)不同肺癌細(xì)胞株凋亡中的作用*

呂金益1，董芷辛1，李婭妮1，寧瑞玲2，宋向群2，周韶璋2△

(廣西醫(yī)科大學(xué)1附屬腫瘤醫(yī)院，2研究生院，廣西 南寧 530021)

[摘要]目的： 觀察克唑替尼(crizotinib)誘導(dǎo)不同肺癌細(xì)胞株凋亡中HGF/c-Met信號(hào)通路的變化并探討其調(diào)控機(jī)制。方法：采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測克唑替尼對H1993(c-Met擴(kuò)增的肺腺癌細(xì)胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌細(xì)胞)和A549細(xì)胞的活力抑制情況；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測3種細(xì)胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率；采用Western blot檢測細(xì)胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信號(hào)通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平，同時(shí)觀察其下游通路關(guān)鍵蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的變化情況。結(jié)果：MTT結(jié)果表明克唑替尼作用72 h后，H1993、H2228和A549細(xì)胞株的細(xì)胞活力抑制率均呈劑量依賴性升高。流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)隨著克唑替尼作用時(shí)間的延長，細(xì)胞凋亡率呈時(shí)間依賴性增加(P<0.05)。Western blot檢測結(jié)果提示在H1993細(xì)胞株和H2228細(xì)胞株中，p-MET、p-AKT和p-ERK隨著時(shí)間的延長蛋白水平呈現(xiàn)下降趨勢。而在A549細(xì)胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在藥物作用72 h后的變化趨勢不明顯。結(jié)論：初步證實(shí)HGF/c-Met信號(hào)通路與克唑替尼誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞株H1993和H2228凋亡相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]HGF/c-Met信號(hào)通路; H1993細(xì)胞; H2228細(xì)胞; 克唑替尼; 細(xì)胞凋亡

近十年來，基于分子靶點(diǎn)的個(gè)體化治療在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)研究中取得了重大進(jìn)展，尤其是以表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)和間變淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase，ALK)為靶點(diǎn)藥物的發(fā)現(xiàn)，對NSCLC個(gè)體化治療的發(fā)展具有里程碑式的意義，分子靶向治療也成為越來越重要的研究方向。

克唑替尼(crizotinib)為針對ALK/c-Met雙靶點(diǎn)的酪氨酸激酶抑制劑，主要用于治療存在EML4-ALK融合基因的晚期NSCLC患者，且已取得顯著療效[1]。c-Met是一類原癌基因，其蛋白產(chǎn)物是肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)的受體，并具有酪氨酸激酶的活性，在與受體進(jìn)行特異結(jié)合后可激活一系列的跨膜信號(hào)通路[2]，從而促使上皮細(xì)胞出現(xiàn)增生、遷移等[3]。阻斷HGF/c-Met系統(tǒng)的配對表達(dá)或信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可作為抗腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的治療策略之一，因?yàn)樽钄嘧饔貌粌H能夠抑制腫瘤生長，還能抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[4]。HGF及其c-Met受體因在NSCLC中的發(fā)生、發(fā)展及EGFR-TKI耐藥中均有非常重要的作用[5-6]，而成為NSCLC靶向治療領(lǐng)域研究的一個(gè)重要方向。我們的研究通過克唑替尼作用在MET擴(kuò)增的肺癌細(xì)胞系H1993細(xì)胞和EML4-ALK陽性的肺癌細(xì)胞系H2228細(xì)胞，觀察克唑替尼誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡情況和HGF/c-Met通路及其下游信號(hào)的變化。

材料和方法

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1細(xì)胞人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H2228和H1993購自ATCC；人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549由廣西醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)部提供。

1.2主要試劑與儀器克唑替尼粉末制劑購于CST；RPMI-1640 培養(yǎng)基、胎牛血清和胰酶替代物購自Gibco；MTT 購自Amresco；Annexin V-PE/7AAD 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒購自BD；MET I 抗、p-MET I 抗、AKT I 抗、p-AKT I 抗、ERK I 抗和p-ERK I 抗均購自CST；BCA 試劑盒購自Merck。Western blot 儀器設(shè)備購于Bio-Rad。

2方法

2.1細(xì)胞培養(yǎng)按腫瘤貼壁細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)方法培養(yǎng)H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞與A549細(xì)胞至良好狀態(tài)。

2.2MTT法檢測細(xì)胞活力按培養(yǎng)H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞至對數(shù)生長期，按(2～6)×103cells/well的密度接種于96孔板，預(yù)設(shè)置6個(gè)濃度，每個(gè)濃度設(shè)置4個(gè)復(fù)孔，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，按濃度梯度加入藥物，把細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)72 h后，吸凈孔內(nèi)液體，加入MTT繼續(xù)培養(yǎng)4 h后再加入二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)，充分振蕩10 min，在492 nm波長下測量吸光度，分別計(jì)算出克唑替尼對H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞的IC50，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

2.3流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和周期分布情況取生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞，以每孔4×105、6×105、8×105個(gè)細(xì)胞數(shù)量分別接種于6孔板中，培養(yǎng)24 h，其中H1993細(xì)胞加入克唑替尼濃度為200 nmol/L，H2228細(xì)胞加入300 nmol/L血清培養(yǎng)液，將按每孔4×105個(gè)接種的細(xì)胞培養(yǎng)72 h、按每孔6×105個(gè)接種的細(xì)胞培養(yǎng)48 h、按每孔8×105個(gè)接種的細(xì)胞培養(yǎng)24 h，以細(xì)胞凋亡試劑盒說明書收集細(xì)胞并染色后用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡率，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

2.4Western blot檢測克唑替尼對MET/AKT/ERK信號(hào)通路相關(guān)信號(hào)蛋白表達(dá)的影響收集長滿瓶的H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞，用RIPA裂解液提取細(xì)胞總蛋白，所得總蛋白經(jīng)10%聚丙烯酰胺凝膠電泳轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯(polyvinylidene difluoride，PVDF)膜上。MET I 抗稀釋度1∶1 000，p-MET I 抗稀釋度1∶1 000，AKT I 抗稀釋度1∶2 000，p-AKT I 抗稀釋度1∶1 500，ERK I 抗稀釋度1∶1 000，p-ERK I 抗稀釋度 1∶1 500，兔、鼠 II 抗稀釋度1∶2 000，以β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)為內(nèi)參照。ECL發(fā)光底物顯色，掃描分析條帶，以條帶灰度確定蛋白表達(dá)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各組計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析，各組均數(shù)間的兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)和LSD法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1MTT比色法檢測克唑替尼對H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞株生長的影響

MTT實(shí)驗(yàn)計(jì)算得出克唑替尼對H1993細(xì)胞的IC50為179 nmol/L，對H2228細(xì)胞的IC50為335 nmol/L。A549細(xì)胞對克唑替尼的處理不敏感，給予10倍H2228細(xì)胞的藥物劑量未能求出IC50。H1993細(xì)胞、H2228細(xì)胞和A549細(xì)胞的增殖抑制率都隨著克唑替尼藥物濃度的升高相應(yīng)增加，且呈劑量依賴性,見圖1。

2流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡及周期分布

根據(jù)MTT所得IC50作為藥物濃度，3組細(xì)胞未經(jīng)過處理時(shí)凋亡率無顯著差異，H1993細(xì)胞經(jīng)克唑替尼作用24 h、48 h和72 h的凋亡率分別為(15.3±2.1)%、(27.2±1.6)%和46.5±1.8)%;H2228細(xì)胞經(jīng)克唑替尼作用24 h、48 h和72 h的凋亡率為(13.7±0.8)%、(25.3±1.6)%和43.5±3.2)%;A549細(xì)胞經(jīng)克唑替尼作用72 h的凋亡率為(15.64±0.61)%。藥物作用后的H1993細(xì)胞和H2228細(xì)胞凋亡率較A549細(xì)胞和未加藥處理組明顯增加(P<0.05)，且隨時(shí)間延長凋亡率增加，表明H1993細(xì)胞和H2228細(xì)胞相對于A549細(xì)胞來說對克唑替尼更為敏感，見圖2。

Figure 1.Crizotinib inhibited the viability of 3 cell lines of NSCLC. H1993, H2228 and A549 cells were treated with crizotinib at different concentrations (200 nmol/L and 300 nmol/L) for 72 h. The inhibitory rates were determined by the MTT assay. Mean±SD.n=3.

圖1不同濃度的克唑替尼分別處理3種細(xì)胞72 h后的細(xì)胞活力抑制率

Figure 2.The apoptosis rates of the H1993, H2228 and A549 cells after treated with crizotinib at different time points. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsA549.

圖2經(jīng)克唑替尼處理H1993、H2228和A549細(xì)胞后不同時(shí)點(diǎn)的細(xì)胞凋亡率

3Western blot檢測克唑替尼對MET信號(hào)通路相關(guān)信號(hào)蛋白表達(dá)的影響

檢測克唑替尼誘導(dǎo)H1993、H2228和A549細(xì)胞株凋亡中的蛋白變化。200 nmol/L克唑替尼處理c-Met擴(kuò)增的H1993細(xì)胞，300 nmol/L 克唑替尼處理EML4-ALK陽性肺腺癌細(xì)胞株H2228細(xì)胞。在H1993細(xì)胞株中我們發(fā)現(xiàn)，經(jīng)克唑替尼處理72 h后，MET總蛋白表達(dá)較未處理組降低，且其下游信號(hào)分子p-AKT、p-ERK和p-MET的蛋白水平在藥物作用24 h后明顯降低，并隨時(shí)間延長不斷下降，在72 h處p-MET的蛋白水平在三者之中最低。在H2228細(xì)胞株中，MET、AKT和ERK總蛋白表達(dá)無明顯變化，但其下游信號(hào)分子p-AKT、p-ERK和p-MET的蛋白水平在藥物作用48 h后有明顯下降的趨勢，在72 h時(shí)水平最低。而在相對不敏感肺癌細(xì)胞株A549中MET總蛋白及其下游信號(hào)分子p-AKT、p-ERK和p-MET在藥物作用72 h后的蛋白水平變化趨勢不明顯,見圖3。

Figure 3.The protein levels in the 3 cell lines treated with crizotinib at different time points (24 h, 48 h and 72 h) determined by Western blot. Mean±SD.n=3.*P<0.05vscontrol group (0 h).

圖3經(jīng)克唑替尼處理后的H1993、H2228和A549細(xì)胞在不同時(shí)點(diǎn)的蛋白檢測結(jié)果

討論

c-Met為原癌基因，是MET蛋白的編碼基因。MET蛋白的配體為肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)，正常的HGF/c-Met通路能調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育及組織損傷修復(fù)，而異常的信號(hào)激活可促進(jìn)細(xì)胞增殖、減少凋亡，同時(shí)使血管生成增多，腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移行為增加[7]。c-Met與HGF結(jié)合引起c-Met胞質(zhì)內(nèi)酪氨酸殘基的自身磷酸化，從而進(jìn)一步激活下游幾個(gè)重要的通路：PI3K-AKT信號(hào)通路、RAS-MAPK信號(hào)通路和STAT3通路[8]。在肺癌中，c-Met往往呈現(xiàn)出高表達(dá)的狀態(tài),而且提示與腫瘤的惡性程度有關(guān)[9]?？诉蛱婺釣獒槍LK/c-Met雙靶點(diǎn)的酪氨酸激酶抑制劑，其作用于c-Met的機(jī)制主要是通過抑制c-Met激酶與ATP結(jié)合及兩者結(jié)合之后的自身磷酸化而發(fā)揮作用。Zou等[10]通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)MET抑制劑克唑替尼能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、減少細(xì)胞增殖及抑制血管生成； Okamoto等[11]應(yīng)用克唑替尼對c-Met陽性與陰性的胃癌細(xì)胞進(jìn)行研究，結(jié)果顯示在c-Met陽性的胃癌細(xì)胞中c-Met信號(hào)通路AKT蛋白一同受到抑制進(jìn)而誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞的凋亡，而在c-Met陰性的胃癌細(xì)胞中卻未觀察到這一現(xiàn)象。鄭時(shí)玉等[12]在乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中采用RNA干擾技術(shù)使c-Met沉默后發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的克隆形成、周期、遷移、侵襲能力都受到抑制。本研究中亦發(fā)現(xiàn)在使用克唑替尼作用c-Met擴(kuò)增的H1993細(xì)胞和EML4-ALK陽性細(xì)胞株H2228時(shí),其細(xì)胞抑制百分率呈濃度依賴性，細(xì)胞凋亡率隨時(shí)間的延長而增加，兩者相對于A549細(xì)胞和不加藥對照組的凋亡率差異明顯。這與以上學(xué)者研究結(jié)果相一致。在本研究中我們還發(fā)現(xiàn)c-Met水平的下降，可以推測克唑替尼是通過抑制MET蛋白來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。另外，Ou等[13]報(bào)道1例存在c-Met擴(kuò)增而非ALK融合基因的NSCLC患者使用克唑替尼后獲得快速持續(xù)的緩解，提示克唑替尼在臨床上可能作為一種c-Met抑制劑，但仍需要進(jìn)一步研究。

AKT是PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的關(guān)鍵分子，能激活下游底物mTOR及其下游p7056K、4E-BP1等信號(hào)因子，還能夠通過磷酸化Bcl-2、Fox家族蛋白等來抑制細(xì)胞凋亡。ERK通路是目前研究較為深入的MAPK通路，ERK被酪氨酸激酶激活成p-ERK后進(jìn)入細(xì)胞核，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、c-Myc等的磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞增殖及對藥物誘導(dǎo)后的抗凋亡作用[14-15]。p-AKT及p-ERK是HGF/c-Met信號(hào)通路活化的主要標(biāo)志，因此在本研究中我們采用Wes-tern blot的方法對MET蛋白和下游的AKT、ERK及其活化形式的信號(hào)蛋白進(jìn)行檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示H1993細(xì)胞和H2228細(xì)胞在克唑替尼的作用下，MET、AKT和ERK蛋白的活化形式p-MET和p-AKT和p-ERK的蛋白水平隨著時(shí)間的推移，均有不同程度下調(diào)，在72 h達(dá)到最低點(diǎn)。H1993細(xì)胞發(fā)生下調(diào)的時(shí)點(diǎn)早于H2228的下調(diào)時(shí)點(diǎn)，這可能與H1993細(xì)胞的c-Met擴(kuò)增特性相關(guān)。而陰性對照A549細(xì)胞的MET、AKT和ERK總蛋白及其活化的p-MET、p-AKT和p-ERK蛋白均無明顯受抑制作用，推測在本研究中，克唑替尼能通過抑制c-Met的活化形式p-MET來下調(diào)p-AKT和p-ERK磷酸化水平，從而抑制AKT和ERK通路促進(jìn)細(xì)胞存活、抵抗凋亡的作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。這個(gè)研究結(jié)果也與Tanizaki等[16]和Kogita等[17]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。

與此同時(shí)，在實(shí)驗(yàn)過程中我們也觀察到，在藥物作用72 h后，p-Met的表達(dá)基本被完全抑制，而其下游的信號(hào)蛋白p-AKT和p-ERK并未完全被抑制，我們推測在HGF/c-Met信號(hào)通路中可能還有其它的通路參與AKT、ERK信號(hào)通路的激活。已經(jīng)有研究證實(shí)[18]c-Met可以通過p53信號(hào)通路抑制肺癌細(xì)胞的凋亡。Belalcazar等[19]研究發(fā)現(xiàn)c-Met信號(hào)通路與EGFR和HER3部分下游信號(hào)通路相通，存在“cross-talk”現(xiàn)象。Breindel等[20]也發(fā)現(xiàn)EGFR信號(hào)可以誘導(dǎo)MET的磷酸化， EGFR-MET的“cross-talk”現(xiàn)象不是直接發(fā)生的，而是由MET水平和中介信號(hào)通過ERK聯(lián)合發(fā)生。在EGFR野生型或突變的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，抑制EGFR或ERK的信號(hào)通路可以減少M(fèi)ET的活化和蛋白水平表達(dá)。不過，具體是哪些信號(hào)通路或其它轉(zhuǎn)錄因子參與其中還有待更進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來證實(shí)。綜上所述，我們可以認(rèn)為HGF/c-Met通路在調(diào)控腫瘤細(xì)胞的生長方面有重要作用。

我們的研究為克唑替尼作為MET靶點(diǎn)的抑制劑在臨床上的應(yīng)用提供了證據(jù)。但由于克唑替尼誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制復(fù)雜，不清楚的地方仍有很多。進(jìn)一步研究HGF/c-Met信號(hào)的下游通路BIM和survivin，或?qū)GF/c-Met信號(hào)通路關(guān)鍵基因進(jìn)行敲除，檢測HGF/c-Met信號(hào)通路上各關(guān)鍵蛋白的表達(dá)水平和活化水平，明確通路上各蛋白之間的關(guān)系，可望更好闡明HGF/c-Met信號(hào)通路在肺癌細(xì)胞系凋亡中所起的作用。

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[20]Breindel JL, Haskins JW, Cowell EP, et al. EGF receptor activates MET through MAPK to enhance non-small cell lung carcinoma invasion and brain metastasis[J]. Cancer Res,2013,73(16):5053-5065.

(責(zé)任編輯： 陳妙玲， 羅森)

阻斷BMK1通路可通過調(diào)控BNIP3和BNIP3L抑制腫瘤干細(xì)胞

腫瘤干細(xì)胞(CSCs)具有干細(xì)胞相關(guān)的許多特性，并被認(rèn)為可操控腫瘤的發(fā)生。盡管靶向CSCs具有開發(fā)新藥物的巨大潛力，但由于目前缺乏有效的藥物靶點(diǎn)和合適的藥理學(xué)制劑，其發(fā)展仍有很大障礙。Song等的研究結(jié)果表明，BMK1的磷酸化不僅與胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞有關(guān)，也與CSCs有關(guān)。通過表達(dá)MEK5D激活BMK1，可增強(qiáng)CSCs的自我更新(微球體形成實(shí)驗(yàn)證實(shí)之)、增殖(克隆形成實(shí)驗(yàn)證實(shí)之)和成瘤能力，而BMK1抑制劑XMD8-92能抑制上述過程。RNA測序和微陣列分析結(jié)果表明，抑制BMK1顯著增強(qiáng)了細(xì)胞死亡過程中的重要蛋白BNIP3和BNIP3L的表達(dá)。用shRNA沉默BNIP3和BNIP3L削弱了BMK1抑制劑XMD-8-92對CSCs微球體形成和克隆形成能力的抑制作用。以上結(jié)果說明BMK1對維持CSCs的“干性”起到關(guān)鍵性作用，提示BMK1有可能成為針對CSCs的藥物靶標(biāo)。

Oncotarget, 2015, 6(32):33279-33289(黃雪)

Role of HGF/c-Met signaling pathway in crizotinib-induced apoptosis of different lung carcinoma cell lines

Lü Jin-yi1, DONG Zhi-xin1, LI Ya-ni1, NING Rui-ling2, SONG Xiang-qun2, ZHOU Shao-zhang2

(1AffiliatedTumorHospital,2PostgraduateCollege,GuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China.E-mail:zhoushaozhang@qq.com)

[ABSTRACT]AIM: To investigate the role of HGF/c-Met signaling pathway in crizotinib-induced apoptosis of different lung carcinoma cell lines and to analyze its potential regulatory mechanisms. METHODS: EML4-ALK positive cell line H2228, c-Met proliferation cell line H1993 and control cell line A549 were treated with crizotinib at different doses for different time periods. The viability of the cell lines was measured by MTT assay. The apoptosis was analyzed by flow cytometry with PI staining. The protein levels of MET and phosphorylated MET (p-MET) of HGF/c-Met signaling pathway as well as its down-stream key proteins AKT, ERK, p-AKT and p-ERK in the cell lines before and after crizotinib treatment were examined by Western blot. RESULTS: The growth of H1993, H2228 and A549 cell lines was inhibited after crizoti-nib treatment for 72 h in a dose-dependent manner. Apoptotic rates of H1993 cells and H2228 cells were increased with the crizotinib concentration and exposure time. Down-regulation of p-MET, p-AKT and p-ERK at protein levels in H1993 cells and H2228 cells after exposure to crizotinib for 72 h was confirmed by Western blot. No obvious change of the related-proteins of HGF/c-Met signaling pathway was found in A549 cell line. CONCLUSION: HGF/c-Met signaling pathway may contribute to crizotinib-induced apoptosis of H1993 cells and H2228 cells, which provides the experimental basis for MET-targeting treatment of lung cancer.

[KEY WORDS]HGF/c-Met signaling pathway; H1993 cells; H2228 cells; Crizotinib; Apoptosis

doi:10.3969/j.issn.1000- 4718.2016.03.010

[中圖分類號(hào)]R730.23

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

通訊作者△Tel： 0771-5334955; E-mail: zhoushaozhang@qq.com

*[基金項(xiàng)目]國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81260357; No.81060188)

[收稿日期]2015- 11- 04[修回日期] 2015- 12- 23

[文章編號(hào)]1000- 4718(2016)03- 0445- 06

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