淋巴瘤患兒血清鐵調(diào)素、IL-6的水平變化及意義

穆慢慢，徐學(xué)聚，孫繪霞，張園，陳佩佩

(1鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，鄭州450052；2鄭州市兒童醫(yī)院)

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淋巴瘤患兒血清鐵調(diào)素、IL-6的水平變化及意義

穆慢慢1，徐學(xué)聚1，孫繪霞2，張園1，陳佩佩1

(1鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，鄭州450052；2鄭州市兒童醫(yī)院)

摘要：目的觀察淋巴瘤患兒血清中鐵調(diào)素(Hepcidin)和白細(xì)胞介素6(IL-6)水平變化，并探討其臨床意義。方法 選取初治并排除骨髓浸潤的淋巴瘤患兒69例，分為貧血組15例、非貧血組54例，另選取健康體檢兒童15例作為正常對照組。用ELISA法檢測淋巴瘤患兒及正常對照組兒童血清Hepcidin和IL-6水平，分析血清Hepcidin和IL-6水平與貧血的關(guān)系。結(jié)果貧血組、非貧血組、正常對照組血清Hepcidin水平分別為(38.93±14.12)、(31.26±11.01)、(21.99±5.14)ng/mL，IL-6水平分別為(12.13±1.92)、(10.23±1.67)、(8.59±1.01)pg/mL，3組血清Hepcidin和IL-6水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。貧血組Hepcidin水平與血紅蛋白水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.765,P=0.003), Hepcidin水平與IL-6呈正相關(guān)(r=0.657,P=0.014)。結(jié)論 淋巴瘤貧血患兒血清Hepcidin、IL-6水平升高，二者在兒童淋巴瘤相關(guān)貧血中發(fā)揮重要作用。

關(guān)鍵詞：淋巴瘤，兒童；貧血；鐵調(diào)素；白細(xì)胞介素6

淋巴瘤是原發(fā)于淋巴結(jié)和(或)結(jié)外淋巴組織的惡性腫瘤，是兒童常見的惡性腫瘤，貧血是其常見并發(fā)癥[1]；其中慢性病貧血(ACD)最為常見，炎性細(xì)胞因子所引起的鐵代謝異常在ACD機(jī)制中起至關(guān)重要的作用。鐵調(diào)素(Hepcidin)可以通過抑制鐵的吸收及單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)鐵的釋放對鐵代謝起負(fù)性調(diào)控作用，白細(xì)胞介素6(IL-6)是刺激Hpcidin合成的最主要炎性因子，可通過刺激Hpcidin的合成調(diào)節(jié)鐵的代謝，導(dǎo)致貧血的發(fā)生。本研究探討淋巴瘤患兒血清Hpcidin、IL-6水平與貧血的關(guān)系，以進(jìn)一步揭示淋巴瘤相關(guān)性貧血的發(fā)病機(jī)制。

1資料與方法

1.1臨床資料2011年12月～2013年12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院、鄭州市兒童醫(yī)院共收治的淋巴瘤患兒69例。入選標(biāo)準(zhǔn)：①依據(jù)病理(細(xì)胞)形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)和細(xì)胞、分子遺傳學(xué)確診為淋巴瘤；②經(jīng)骨髓細(xì)胞學(xué)檢查明確無骨髓浸潤。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有明確引起貧血的其他疾病，如新近和活動性出血、血液系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重心肝腎功能損害，合并其他腫瘤；②淋巴瘤合并骨髓浸潤。根據(jù)WHO貧血標(biāo)準(zhǔn)[2]將69例患兒分為貧血組15例(男12例、女3例，年齡8個月～12歲、平均6.19歲)和非貧血組54例(男37例、女17例，年齡1～13歲、平均6.57歲)。同期選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科門診健康體檢兒童15例(男9例、女6例，年齡1～12歲、平均6.71歲)作為正常對照組。以上患兒及健康兒童均未接受補鐵、重組人促紅細(xì)胞生成素及輸血治療。各組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2檢測方法早晨采集3組空腹外周靜脈血5 mL,取2 mL測定血紅蛋白水平，另3 mL離心(3 000 r/min)20 min，取上清，-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用ELISA法檢測Hepcidin、IL-6水平，依據(jù)說明書進(jìn)行操作。

2結(jié)果

2.13組血清Hepcidin、IL-6水平比較3組血清Hepcidin、IL-6水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；貧血組Hepcidin及IL-6水平高于非貧血組和正常對照組，非貧血組高于正常對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1　3組血清Hepcidin、IL-6水平比較

注：與非貧血組、正常對照組比較，*P<0.05；與正常對照組比較，**P<0.05。

2.2 血清Hepcidin、IL-6水平與貧血的關(guān)系淋巴瘤貧血患兒血清Hepcidin水平與血紅蛋白水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.765,P=0.003)，血清Hepcidin水平與IL-6水平呈正相關(guān)(r=0.657,P=0.014)。

3討論

貧血是淋巴瘤常見并發(fā)癥，但在臨床診療中往往忽視貧血對患者的影響。郭春寶等[3]研究顯示，50%的淋巴瘤貧血患兒沒有接受貧血治療。貧血時組織和細(xì)胞缺氧，可抑制正常組織和細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化、凋亡和壞死，可致腫瘤細(xì)胞發(fā)生適應(yīng)性改變，導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展和腫瘤治療抵抗[4]。初治淋巴瘤患兒的貧血主要原因為ACD。ACD的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前認(rèn)為是由原發(fā)疾病啟動的免疫反應(yīng)所介導(dǎo)；激活的免疫細(xì)胞主要是單核-巨噬細(xì)胞和CD3+T細(xì)胞分泌多組炎性細(xì)胞因子，誘發(fā)了肝臟Hepcidin水平升高及鐵代謝異常、紅系造血前體細(xì)胞增殖受損、促紅細(xì)胞生成素生成減少及反應(yīng)鈍化、紅細(xì)胞壽命縮短等，從而導(dǎo)致貧血[5]。大量研究表明，IL-6在ACD的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。鐵代謝異常是ACD的突出特點，Hepcidin是鐵代謝的核心激素。

Hepcidin是2000年由Krause和Park同時發(fā)現(xiàn)的一種抗菌多肽[6]，屬防衛(wèi)素蛋白家族，主要由肝臟合成，此外在單核-巨噬細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、胃腸黏膜細(xì)胞及心臟與肌肉細(xì)胞中均有少量表達(dá)。Hepcidin在維持機(jī)體的鐵動態(tài)平衡中起關(guān)鍵作用。其調(diào)節(jié)鐵代謝的機(jī)制是：Hepcidin分泌入血后與鐵輸出細(xì)胞(巨噬細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞)表面的跨膜鐵輸出蛋白(FPN)結(jié)合，啟動hepcidin-FPN復(fù)合物的內(nèi)化、降解，使鐵輸出減少，從而對鐵代謝起到負(fù)向調(diào)節(jié)作用。這種負(fù)調(diào)控作用導(dǎo)致體內(nèi)可用于合成血紅蛋白的原料鐵減少，骨髓幼紅細(xì)胞成熟受阻，在ACD發(fā)病機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用。目前，有多項研究表明，Hepcidin通過影響鐵代謝促進(jìn)ACD的發(fā)生[7]。Sasu等[8]認(rèn)為Hepcidin水平與炎性因子密切相關(guān)，是診斷貧血和判斷療效的有效指標(biāo)，是鐵轉(zhuǎn)運的負(fù)性調(diào)節(jié)劑。Hohaus等[9]研究發(fā)現(xiàn)，霍奇金淋巴瘤患者血清中的Hepcidin的表達(dá)高于健康正常對照組，而且霍奇金淋巴瘤合并貧血患者血清中Hepcidin的表達(dá)水平更高，Massaki等[10]對非霍奇金淋巴瘤患者進(jìn)行1年的前瞻性研究發(fā)現(xiàn),血紅蛋白水平在高Hepcidin組明顯高于低Hepcidin組。本研究結(jié)果顯示，淋巴瘤合并貧血患兒血清中Hepcidin表達(dá)水平不僅高于正常對照組，而且也高于非貧血組；血清Hepcidin表達(dá)水平與血紅蛋白水平呈負(fù)相關(guān)。這與Hohaus研究結(jié)果一致。隨著血清Hepcidin表達(dá)水平增加，血紅蛋白水平下降，提示Hepcidin表達(dá)水平的上調(diào)參與了淋巴瘤貧血的發(fā)生。

作為多效免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，IL-6在ADC發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。人類編碼Hepcidin的基因(HAMP)位于第19號染色體上，但研究發(fā)現(xiàn)在HAMP中并沒有找到鐵元素的作用位點，提示Hepcidin對鐵代謝的調(diào)節(jié)可能通過某種介質(zhì)進(jìn)行，而不是直接通過鐵水平來實現(xiàn)的[11]。有明確證據(jù)表明，IL-6能誘導(dǎo)編碼Hepcidin的基因表達(dá)，促進(jìn)Hepcidin合成[12]。在體外細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)IL-6可有效誘導(dǎo)Hepcidin的產(chǎn)生。體外細(xì)胞培養(yǎng)證實，IL-6可介導(dǎo)Hepcidin mRNA表達(dá)增加，認(rèn)為脂多糖刺激了IL-6表達(dá)，繼而導(dǎo)致Hepcidin表達(dá)的增加，Hepcidin又通過鐵代謝的異常最終引起貧血[13]。本研究顯示，淋巴瘤合并貧血患兒血清中IL-6表達(dá)高于非貧血組及正常對照組，而且非貧血組患兒血清中IL-6表達(dá)也高于正常對照組。Hepcidin在淋巴瘤合并貧血患兒血清中的表達(dá)水平與IL-6的表達(dá)呈正相關(guān)。提示隨著淋巴瘤患兒血清中IL-6表達(dá)水平的增加，Hepcidin表達(dá)水平也增加。有研究顯示，在2例Castleman病患者體內(nèi)注入抗IL-6受體，抗體能快速降低血清Hepcidin的水平，從而提升血紅蛋白水平[14]。提示淋巴瘤的發(fā)生與循環(huán)系統(tǒng)中IL-6的生成和釋放有關(guān)，IL-6能刺激肝臟合成Hepcidin，高水平的Hepcidin導(dǎo)致巨噬細(xì)胞內(nèi)鐵的滯留，用于紅細(xì)胞生成的原料鐵不足，從而導(dǎo)致貧血的發(fā)生。

淋巴瘤合并貧血會加重患兒臨床癥狀，影響生活質(zhì)量，增加死亡風(fēng)險及醫(yī)療費用的投入。輸血及補充鐵劑、促紅細(xì)胞生成素(EPO)治療可改善淋巴瘤合并貧血患兒的臨床癥狀，但輸血不良后果較多，EPO治療效果有限，及早降低血清Hepcidin、IL-6水平可能會成為治療淋巴瘤患兒貧血癥狀的另一種有效方法。

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(收稿日期：2015-09-23)

中圖分類號：R725.6

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)09-0062-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.024