老年結(jié)直腸癌血清可溶性細(xì)胞間黏附分子-1及炎性因子表達(dá)的臨床意義*

陳　翔，陸寶華，袁　杰，江偉廷，梁發(fā)東，鈕　靜，曾小兵

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院(寶山分院)/上海市寶山區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院:1.普外科；2.檢驗(yàn)科　201900)

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老年結(jié)直腸癌血清可溶性細(xì)胞間黏附分子-1及炎性因子表達(dá)的臨床意義*

陳翔1，陸寶華1，袁杰1，江偉廷1，梁發(fā)東2，鈕靜2，曾小兵1

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院(寶山分院)/上海市寶山區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院:1.普外科；2.檢驗(yàn)科201900)

[摘要]目的探討血清可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)及炎性因子[C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素-17(IL-17)]在老年結(jié)直腸癌(CRC)患者中表達(dá)的臨床意義。方法采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)對76例老年CRC患者(老年CRC組)及32例中青年CRC患者(中青年CRC組)手術(shù)前后外周血中sICAM-1、CRP和IL-17的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，分析其與臨床病理參數(shù)間的意義，并與60例健康體檢者(對照組)比較。結(jié)果不同年齡CRC患者術(shù)前和術(shù)后血清sICAM-1和IL-17水平均高于對照組(P<0.05)，術(shù)后二者水平較術(shù)前均明顯降低(P<0.05)。中青年CRC組術(shù)后及老年CRC組術(shù)前、術(shù)后CRP水平均與對照組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。中青年CRC組術(shù)前CRP水平高于對照組(P<0.05)。中青年CRC組術(shù)前和術(shù)后血清sICAM-1和IL-17水平與老年CRC組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CRP水平兩組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。老年CRC患者中sICAM-1水平在分化程度、浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；IL-17水平在分化程度、浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；CRP水平在浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論血清sICAM-1、CRP和IL-17水平在一定程度上反映了老年CRC的侵襲轉(zhuǎn)移過程，在預(yù)測老年CRC患者發(fā)展及預(yù)后方面具有重要意義。

[關(guān)鍵詞]結(jié)直腸腫瘤；細(xì)胞黏附分子；腫瘤分期；可溶性細(xì)胞間黏附分子；C反應(yīng)蛋白；白細(xì)胞介素

結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)是胃腸外科常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率分別位居上海市全部惡性腫瘤的第2和第4位，且隨年齡增長有上升的趨勢[1]。CRC是多因素、多基因、多階段參與的，其惡性程度主要由浸潤和轉(zhuǎn)移特性決定。有研究認(rèn)為CRC的發(fā)病與免疫炎癥之間關(guān)系緊密[2]，但具體機(jī)制不清。輔助性T 細(xì)胞17(Th17)是新型T細(xì)胞亞群，可分泌白細(xì)胞介素17(IL-17)等炎性細(xì)胞因子，參與CRC的發(fā)生、發(fā)展[3]。近年來黏附因子的異常表達(dá)與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系激起廣泛的研究，相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明大腸癌患者血清可溶性細(xì)胞黏附因子-1(sICAM-1)水平與癌轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[4]。為此，本研究檢測了老年CRC患者血清細(xì)胞黏附分子及炎性細(xì)胞因子的表達(dá)情況，并與中青年CRC患者和健康者比較，分析這些指標(biāo)在老年CRC發(fā)生、發(fā)展中的作用和意義。

1資料與方法

1.1一般資料選取本院普外科2012年3月至2014年5月收治的行根治性手術(shù)的老年CRC患者76例為老年CRC組，男42例，女34例，年齡61～83歲，平均74歲，診斷依據(jù)臨床癥狀、影像學(xué)檢查、消化道內(nèi)鏡檢查及病理證實(shí)。臨床病理pTNM分期標(biāo)準(zhǔn)參考2014年美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(NCCN)指南，相關(guān)臨床病理參數(shù)包括性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤類型、分化程度、浸潤深度、是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期等。全部患者術(shù)前均未接受放化療或靶向治療。選擇同時期中青年CRC患者32例為中青年CRC組，男18例，女14例，年齡32～60歲，平均48歲，診斷標(biāo)準(zhǔn)同上。另選擇同期在本院進(jìn)行體檢的60例老年健康者作為對照組，男32例，女28例，年齡64～85歲，平均76歲，體溫、胸片、血常規(guī)正常，既往無心肝肺及腎等臟器疾病。

1.2方法CRC患者術(shù)后血清標(biāo)本采自術(shù)后1個月化療前。所有外周血標(biāo)本均于清晨空腹采血，離心后取上層液于-20 ℃低溫冰箱中保存待測。外周血標(biāo)本中sICAM-1和IL-17含量采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。sICAM-1購于美國Bender Med systems公司；IL-17購于北京晶美生物工程有限公司；C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測應(yīng)用日本希森美康 Sysmex KX-21檢測，操作按說明書步驟進(jìn)行。

2結(jié)果

2.1不同年齡CRC患者手術(shù)前后與對照組血清sICAM-1、CRP和IL-17水平的比較不同年齡CRC患者術(shù)前和術(shù)后血清sICAM-1和IL-17水平均高于對照組(P<0.05)，術(shù)后二者水平較術(shù)前均明顯降低(P<0.05)。中青年CRC組術(shù)后及老年CRC組術(shù)前、術(shù)后CRP水平均與對照組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。中青年CRC組術(shù)前CRP水平高于對照組(P<0.05)。中青年CRC組術(shù)前和術(shù)后血清sICAM-1和IL-17水平與老年CRC組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CRP水平相仿(P>0.05)，見表1。

表1　3組血清sICAM-1、CRP和IL-17水平的比較

a：P<0.05，與對照組比較；b：P<0.05，與術(shù)前比較；c：P<0.05，與老年CRC組比較。

表2　老年CRC患者sICAM-1、CRP和IL-17水平與臨床病理因素的關(guān)系

a：P<0.05，組內(nèi)比較。

2.2老年CRC患者術(shù)前血清sICAM-1、CRP和IL-17水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系血清sICAM-1水平在分化程度、浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而在性別、年齡、腫瘤大小和大體類型等方面組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；IL-17水平在分化程度、浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，在性別、年齡和大體類型等方面組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；CRP水平在浸潤深度、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，在性別、年齡、腫瘤大小、分化程度和大體類型等方面組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

3討論

侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤特有的生物學(xué)行為之一。而內(nèi)皮細(xì)胞與癌細(xì)胞間的黏附作用被認(rèn)為是介導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。細(xì)胞黏附分子不僅能幫助腫瘤細(xì)胞躲避機(jī)體免疫監(jiān)視，而且能抑制NK細(xì)胞的毒性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[5]。目前細(xì)胞黏附分子家族中研究較多的主要是上皮鈣黏黏蛋白(Ecad)和sICAM-1，它們均在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[4-5]。韓業(yè)紅等[6]研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者血清sICAM-1水平與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，可用于早期診斷、評價手術(shù)效果和監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)。相關(guān)試驗(yàn)表明CRC患者血清sICAM-1水平與癌轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[4]。前期研究發(fā)現(xiàn)在CRC組織中sICAM-1陽性表達(dá)率明顯高于正常結(jié)直腸組織(73.7%vs.15.0%，P<0.05)[7]。CRC組織中ICAM-1表達(dá)在腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期和Dukes分期等方面組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。本研究顯示隨著CRC病理TNM分期的改變，血清中sICAM-1的水平隨著病期的進(jìn)展而逐漸升高，且浸潤層次越深，分泌入血中的sICAM-1水平越高；在伴區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者中，血清sICAM-1水平較高。這表明CRC血清中sICAM-1的濃度與腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)，提示sICAM-1可作為評估CRC病情進(jìn)展的一個指標(biāo)。

CRP作為炎癥蛋白，雖然是炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生的一個標(biāo)志，但研究發(fā)現(xiàn)在一些腫瘤中水平明顯高于正常對照者[8-9]。本研究結(jié)果亦表明CRC患者術(shù)前血清CRP水平較對照組高。徐泳等[9]研究表明胃癌患者血漿CRP水平不但明顯高于對照組，而且隨著胃癌嚴(yán)重程度的增加而增高。更進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CRC在浸潤深度不超過肌層者其CRP的水平顯著低于浸潤至漿膜組織者(P<0.05)[10]。本研究亦顯示浸潤深度突破肌層者CRP濃度明顯升高。阮森林等[11]研究顯示CRC患者復(fù)發(fā)組術(shù)后2周血清CRP濃度有所回升，未復(fù)發(fā)組則較術(shù)前顯著下降(P<0.05)，血清CRP水平的變化有助于判斷復(fù)發(fā)可能。本研究結(jié)果表明CRC患者血清中CRP表達(dá)水平與腫瘤浸潤深度、TNM分期及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且腫瘤突破漿膜、伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期越高，則表達(dá)水平越高，這提示在CRC的進(jìn)展或復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移時可合成更多的CRP，與上述研究結(jié)果基本相似。

IL-17是由Th17細(xì)胞所產(chǎn)生，主要生物學(xué)作用為促進(jìn)炎性反應(yīng)[12]。相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)IL-17亦參與在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。在動物實(shí)驗(yàn)中Sobhani等[13]發(fā)現(xiàn)IL-17+/+的荷瘤鼠腫瘤生長速度及腫瘤大小均明顯大于IL-17-/-的荷瘤鼠。國內(nèi)資料表明，CRC患者外周血中IL-17水平和CRC的腫瘤負(fù)荷及疾病的進(jìn)展程度密切相關(guān)[14-15]。黃偉剛等[14]研究顯示CRC組患者外周血清IL-17的水平明顯高于健康志愿者組(P<0.01)；IL-17水平的升高與性別和年齡無關(guān)，而與腫瘤大小、Dukes分期、是否存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及病理組織學(xué)分型關(guān)系密切(P<0.01)。張曉鵬等[16]結(jié)果表明IL-17的表達(dá)水平與腫瘤的浸潤深度、分化程度，TNM分期、有無神經(jīng)浸潤等有關(guān)(P<0.05)。本研究結(jié)果表明術(shù)前CRC患者血清中 IL-17表達(dá)水平明顯高于對照組,且腫瘤浸潤深度增加、分化程度越低、TNM分期越高，則表達(dá)水平亦越高，這與上述研究結(jié)果基本相仿。這也意味著IL-17的高表達(dá)可能參與CRC的發(fā)生、發(fā)展。但是目前關(guān)于IL-17在CRC中的作用尚存爭議，多數(shù)學(xué)者傾向于IL-17有利于促進(jìn)CRC的發(fā)生與發(fā)展[17-18]；另一部分學(xué)者則認(rèn)為IL-17能刺激抗腫瘤的免疫應(yīng)答機(jī)制而達(dá)到抑制腫瘤的作用[19]。因此尚需更進(jìn)一步深入研究其中的差異。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同年齡組中血清sICAM-1和IL-17水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。可能的原因?yàn)椋狠^之于中青年患者，老年CRC起病隱匿、癥狀不典型，常表現(xiàn)為腹痛、便血，以及習(xí)慣性便秘，加之年齡大，體液調(diào)節(jié)、神經(jīng)反應(yīng)遲鈍，因此輕微腹痛易被忽視，持續(xù)時間可能較長[20]。中青年患者因腹痛發(fā)生率高，進(jìn)行大腸鏡檢查有利于提高CRC的檢出率。病程較長可能反映在腫瘤病理T分期相對較高，相關(guān)炎性因子及細(xì)胞黏附分子隨浸潤深度增加而升高。在組織學(xué)類型上，老年患者以中高分化型癌居多，而中青年患者則以低分化型癌為主[21]。不同分化程度的腸癌炎性因子及細(xì)胞黏附分子水平存在差異，這在許多類似的研究中得以證實(shí)。但中青年CRC與老年CRC患者炎性因子及細(xì)胞黏附分子表達(dá)差異的具體機(jī)制尚不明了，尚有待進(jìn)一步研究。

總之，炎性細(xì)胞因子sICAM-1、CRP和IL-17的血清水平隨CRC發(fā)生、發(fā)展而逐漸升高，可能在CRC腫瘤微環(huán)境的改變中發(fā)揮重要作用，尚需進(jìn)行更深入的基因水平探討。

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Expression of soluble intercellular adhesion molecule -1 and inflammatory factor in elderly patients with colorectal carcinoma*

Chen Xiang1,Lu Baohua1,Yuan Jie1,Jiang Weiting1,Liang Fadong2,Niu Jing2,Zeng Xiaobing1

(1.DepartmentofGeneralSurgery;2.DepartmentofClinicalLaboratory,BaoshanBranch,theAffiliatedShuguangHospitalofShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201900,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the clinical significance of soluble intercellular adhesion molecule-1 and inflammatory factors (CRP,IL-17) in elderly patients with colorectal carcinoma.MethodsThe expression of sICAM-1,CRP and IL-17 in 76 cases of elderly patients and 32 cases of youg patients with colorectal cancer were detected by enzyme linked immunosorbent assay before and after surgery,and to analyze its clinical significance correlated with pathological parameters.Meanwhile,60 cases of healthy were controls.ResultsThe serum levels of IL-17 and sICAM-1 were higher in patients with different ages of colorectal cancer than those of the normal control group (P<0.05),and the concentrations of the two group after operation were significantly lower than those of the normal control group (P<0.05).The CRP levels of the young group and old group were similar to that of the normal control group (P>0.05).The level of CRP before operation in the young group was higher than that in the normal control group (P<0.05).The levels of serum IL-17 and sICAM-1 were significantly different between the young and the old group(P<0.05),while the CRP level was similar in the two groups (P>0.05).The serum levels of sICAM-1 and IL-17 in colorectal cancer patients were associated with the degree of differentiation,depth of invasion,lymph node metastasis and TNM staging (P<0.05).The level of CRP was significantly correlated with the depth of invasion,lymph node metastasis and TNM staging(P<0.05).ConclusionThe serum levels of sICAM-1,CRP and IL-17 reflect the invasion and metastasis of colorectal cancer in a certain extent,which play important roles in predicting the development and prognosis of colorectal cancer.

[Key words]colorectal carcinoma;cell adhesion molecule;tumor staging;soluble intercellular adhesion molecules;C reactive protein;interleukin

doi:論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.16.013

*基金項(xiàng)目：上海市寶山區(qū)科學(xué)技術(shù)委員會科研項(xiàng)目(E-12-18)；上海市寶山衛(wèi)生青年醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)項(xiàng)目(bswsyq-2015-A10)。

作者簡介：陳翔(1979-)，主治醫(yī)師，博士，主要從事胃腸道腫瘤研究。

[中圖分類號]R446.62

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1671-8348(2016)16-2202-03

(收稿日期：2015-10-22修回日期：2016-01-16)