王秋穎，李立屯

(1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193；2.云南省騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山 679100)

云南省騰沖縣八種樹(shù)材用于培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培菌棒的研究

王秋穎1*，李立屯2

(1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京100193；2.云南省騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山679100)

目的：合理利用當(dāng)?shù)亓帜举Y源，尋找更多適合天麻蜜環(huán)菌栽培生長(zhǎng)的樹(shù)材；方法：通過(guò)前期的三級(jí)種培養(yǎng)篩選試驗(yàn)之后，有目的性地選取云南騰沖縣八種當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)樹(shù)種制成菌棒，每種菌棒種1m2，三個(gè)重復(fù)，培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培種，觀察不同樹(shù)材的接菌速度、接菌率、蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)速度以及樹(shù)材特性；結(jié)果：歐洲山毛櫸和酸角樹(shù)接菌速度快，接菌率高，菌索生長(zhǎng)速度也較快；金葉子、厚皮香、榿木、西南樺的綜合情況也較好；結(jié)論：實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，八種樹(shù)材中除了白杜娟和南燭綜合情況不理想之外，其他六種樹(shù)材都適合作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的菌材，其中豆科、山茶科和杜鵑花科屬于以前沒(méi)有用于生產(chǎn)過(guò)蜜環(huán)菌栽培種的的樹(shù)種。

菌材；蜜環(huán)菌；栽培；騰沖

蜜環(huán)菌Armillariamellea是天麻GastrodiaelataBlume生長(zhǎng)過(guò)程中的共生菌，二者之間具有極為密切的營(yíng)養(yǎng)關(guān)系[1-3]。蜜環(huán)菌以菌索的形態(tài)侵染天麻，天麻同化蜜環(huán)菌獲得營(yíng)養(yǎng)，在天麻的栽培生產(chǎn)中，蜜環(huán)菌三級(jí)種首先要侵入菌棒，通過(guò)分解纖維素和木質(zhì)素供給營(yíng)養(yǎng)，才能保證自身正常生長(zhǎng)發(fā)育[4]。蜜環(huán)菌生長(zhǎng)對(duì)菌材具有一定的選擇性，培養(yǎng)蜜環(huán)菌通常要選擇木質(zhì)堅(jiān)實(shí)、容易接菌的樹(shù)材，常用的有殼斗科的歐洲山毛櫸、櫟木，在某些地方也有使用速生樹(shù)種樺樹(shù)、核桃樹(shù)做菌材[5]。天麻種植耗材量大[6]，殼斗科樹(shù)木生長(zhǎng)緩慢[7]，大面積砍伐不利于生態(tài)保護(hù)。云南省騰沖縣森林資源豐富[8]，為了從本地森林資源中找到適合天麻蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的更為經(jīng)濟(jì)的樹(shù)種，作者選擇了當(dāng)?shù)?種樹(shù)材作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌栽培菌棒的菌材，比較蜜環(huán)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中的接菌時(shí)間、菌索生長(zhǎng)速度、顏色變化、密集程度等，以期篩選出適適宜蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的菌材，為當(dāng)?shù)靥炻榇竺娣e栽培提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1材料

實(shí)驗(yàn)的8種樹(shù)材來(lái)源于云南省保山市騰沖縣，這些樹(shù)種均為當(dāng)?shù)刭Y源較豐富的樹(shù)材，并且質(zhì)地都比較堅(jiān)硬，通過(guò)前期的蜜環(huán)菌三級(jí)種篩選實(shí)驗(yàn)所得，詳細(xì)信息如表1。

1.2蜜環(huán)菌菌種

實(shí)驗(yàn)所用的蜜環(huán)菌菌種為中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所真菌室保存的A9菌株制備的三級(jí)種。

表1 實(shí)驗(yàn)用菌材的樹(shù)種名稱、科目及其材質(zhì)特性

1.3方法

1.3.1蜜環(huán)菌三級(jí)種的制備 取直徑在1.5cm左右的新鮮青岡木枝條，截成約2～3cm長(zhǎng)的木段，定量分裝于300mL培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加水至瓶口，121℃高壓滅菌2h后接入蜜環(huán)菌半固體二級(jí)菌種，25℃恒溫避光培養(yǎng)2個(gè)月[9]。

1.3.2菌棒的制備8種樹(shù)材分別選取直徑7cm左右的樹(shù)枝，截成約15cm長(zhǎng)的木棒，放入水中浸泡10h左右，再放入挖好的穴中，每穴種1m2左右，每種樹(shù)材種3穴。把培養(yǎng)好的蜜環(huán)菌三級(jí)種倒散，取適量置于兩根木棒相接的斷面處，用土填實(shí)空隙，再覆蓋上8～10cm厚的土層，蓋上薄膜。從培育開(kāi)始，每隔15d觀察1次蜜環(huán)菌的接菌情況，直到菌材上接上蜜環(huán)菌；2014年4月初埋入穴中，培育3個(gè)月后挖出，統(tǒng)計(jì)菌材的接菌速度、接菌率、菌索生長(zhǎng)速度、返青率和掉皮率。

2 結(jié)果與分析

2.1蜜環(huán)菌在不同菌材中的接菌速度、接菌率和菌索生長(zhǎng)速度

研究發(fā)現(xiàn)，榿木易被蜜環(huán)菌浸染，接種后蜜環(huán)菌萌發(fā)生長(zhǎng)快，5d后菌索即能接到菌棒上；歐洲山毛櫸菌棒接上蜜環(huán)菌菌索的時(shí)間為7.5d，酸角、西南樺、金葉子和厚皮香接菌速度都在10d以內(nèi)；白杜鵑和南燭接菌速度最慢，為15～20d(見(jiàn)表2)。

厚皮香中蜜環(huán)菌侵入率最高，蜜環(huán)菌成功侵入并生長(zhǎng)的菌棒數(shù)達(dá)到總數(shù)的89.79%；蜜環(huán)菌成功侵入歐洲山毛櫸菌棒數(shù)達(dá)到88.77%，榿木、西南樺、酸角的接菌率都在80%以上；南燭中蜜環(huán)菌侵入情況較差，長(zhǎng)有蜜環(huán)菌的木材比例為63.88%(見(jiàn)表2)。

表2 蜜環(huán)菌在8種樹(shù)種菌棒中的生長(zhǎng)情況

菌棒培育3個(gè)月后挖出，觀察蜜環(huán)菌菌索的密集程度，測(cè)量蜜環(huán)菌菌索的長(zhǎng)度，計(jì)算出蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)速度。蜜環(huán)菌菌索在酸角樹(shù)中生長(zhǎng)最快，平均每月生長(zhǎng)25 mm，其次是在金葉子和歐洲山毛櫸中，菌索平均每月生長(zhǎng)20 mm，在南燭中菌索生長(zhǎng)速度最慢，菌索平均每月生長(zhǎng)5 mm。菌棒上菌索生長(zhǎng)的最為密集的是歐洲山毛櫸(圖1-A)和酸角樹(shù)(圖1-B)，南燭(圖1-C)和白杜娟(圖1-D)菌棒上的菌索相對(duì)稀疏。

注：A.歐洲山毛櫸菌棒；B.酸角樹(shù)菌棒；C.南燭菌棒；D.白杜娟菌棒；E.榿木樹(shù)菌；棒F.厚皮香菌棒；G.金葉子菌棒；H.西南樺菌棒圖1 3個(gè)月后四種樹(shù)材菌棒的生長(zhǎng)情況

2.2不同菌材的返青率及掉皮率

菌材返青是指菌材埋到地下以后重新發(fā)芽回青，掉皮是指菌棒的樹(shù)皮嚴(yán)重脫落，菌材返青和掉皮都會(huì)影響蜜環(huán)菌的侵入和生長(zhǎng)，也是反映木材是否適合做菌材的重要指標(biāo)。研究結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)用8樹(shù)種中南燭的菌材返青率最高，達(dá)20.05%，其次為金葉子，返青率為9.23%，而西南樺菌材中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)返青樹(shù)段。8種菌材的掉皮情況都不嚴(yán)重，厚皮香和西南樺沒(méi)有發(fā)現(xiàn)掉皮現(xiàn)象(見(jiàn)表3)。

表3 不同樹(shù)材返青率和掉皮率情況表 (%)

3 結(jié)論與討論

歐洲山毛櫸和酸角樹(shù)樹(shù)材接菌速度快，接菌率高，菌索生長(zhǎng)速度也較快，其次，金葉子、厚皮香、榿木、西南樺的綜合情況也較好；接菌速度上，杜鵑花科的南燭和白杜娟較慢，接近20d，其他6種樹(shù)材均在10d以內(nèi)，生長(zhǎng)速度上，二者也明顯慢于其他樹(shù)種，然而在接菌率上，白杜娟可以達(dá)到70%以上，說(shuō)明蜜環(huán)菌通過(guò)一段時(shí)間的適應(yīng)，仍然可以在白杜娟菌材上生長(zhǎng)。8種樹(shù)材的掉皮率均較低，即韌皮部和木質(zhì)部連接緊密，有利于蜜環(huán)菌的培養(yǎng)；返青率方面，南燭的返青率較高，可能是因?yàn)槟蠣T中具有某種特殊物質(zhì)，使該樹(shù)種再生能力強(qiáng)，導(dǎo)致返青。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，蜜環(huán)菌在其傳統(tǒng)培養(yǎng)樹(shù)材榿木、西南樺和歐洲山毛櫸[10]中生長(zhǎng)正常，金葉子、厚皮香和酸角樹(shù)樹(shù)材質(zhì)地較堅(jiān)硬，耐腐性高，都適合作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的菌材；蜜環(huán)菌在白杜娟和南燭樹(shù)材中的綜合情況不理想，不適宜用來(lái)培養(yǎng)蜜環(huán)菌，一方面可能與其木質(zhì)堅(jiān)硬有關(guān)，另一方面也可能與該屬植物所含的特殊物質(zhì)有關(guān)，還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

八種樹(shù)材中豆科的酸角、山茶科的厚皮香和杜鵑花科的金葉子屬于以前沒(méi)有用于生產(chǎn)過(guò)蜜環(huán)菌栽培種的的新樹(shù)種，也是騰沖縣資源豐富、具有特色的樹(shù)種，后期可加以合理利用。

[1] 徐錦堂，冉硯珠，郭順星.天麻生活史的研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào)，1989，11(4)：23.

[2] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編委會(huì).中國(guó)植物志：第18卷[M].北京：科學(xué)出版社，1999：29-33.

[3] 黃健屏.食用菌栽培學(xué)[M].長(zhǎng)沙：湖南科學(xué)技術(shù)出版社，1995：242.

[4] 王秋穎，郭順星.天麻生長(zhǎng)特性及其在栽培中的應(yīng)用[J].中國(guó)中藥雜志，2001，26(5)：353.

[5] 蓉麗華，蔡傳濤.不同菌材對(duì)天麻產(chǎn)量的影響[J].武漢植物學(xué)研究，2010，28(6)：761-766.

[6] 黃明麗，羅春麗，劉洪昌，等.貴州8種樹(shù)材對(duì)天麻蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的影響[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(2)：115-118.

[7] 余林，葉金山，朱恒，等.5種殼斗科樹(shù)種實(shí)生苗年生長(zhǎng)規(guī)律研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，35(3)：486-490.

[8] 李松輝，張夢(mèng)弢.云南省騰沖縣森林資源消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)變化分析[J].山東林業(yè)科技，2013，3：103-106.

[9] 王秋穎，郭順星，關(guān)鳳斌.不同來(lái)源蜜環(huán)菌對(duì)天麻產(chǎn)量影響的研究[J].中草藥，2001，32(9)：839-841.

[10] 范文麗，徐靜，王新.不同經(jīng)濟(jì)樹(shù)種枝條對(duì)蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的影響[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，(2)：59-60.

StudyontheArmillariamelleaCulturedWoodofEightKindsofTreesinTengchongcountryofYunnanProvince

WANGQiuying1*，LILitun2

(1.InstituteofMedicinalPlants，ChineseAcademyofMedicalSciences，Beijing100193，China；2.State-ownedForestManagmentStation，F(xiàn)orestryBureauofTengchongCounty，BaoshanCity，YunnanProvince，baoshan679100，China)

The aim is searching for more tree species to cultureArmillariamellea.The inoculated time，inoculation rate，growth rate ofArmillariamelleaand the properties of tree were observed through the culture ofArmillariamelleain the eight tree species.The result showed that the inoculated time was shortest，inoculation rate was high and the growth rate ofArmillariamelleawas faster inFagussylvaticaandTamarindusindicaLinn；the comprehensive case was good inCraibiodendronyunnanensisW.W.Smith，Ternstroemiagymnanthera(Wight et Arn.)，AlnuscremastogyneBurk andBetulaalnoidesBuch.-Ham.ex D.Don.The conclusion was that the six tree species are suitable meterials for culture ofArmillariamelleaexceptExochordaracemosaandVacciniumbracteatumThunb.

Cultured wood；Armillariamellea；cultivation；Tengchong

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.7.019

2015-09-02)

*

王秋穎，研究員，研究方向：藥用真菌引種、馴化及栽培；E-mail：qywang@implad.ac.cn