林　想，劉改玲，楊紅梅，蔡　沖

（安徽科立華化工有限公司，安徽宿州234000）

66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的高效液相色譜分析

林想，劉改玲，楊紅梅，蔡沖

（安徽科立華化工有限公司，安徽宿州234000）

采用高效液相色譜法測定66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的有效成分含量，外標(biāo)法定量。以甲醇-水（體積比85∶15）為流動(dòng)相，在280nm波長下對二甲四氯酸、唑草酮進(jìn)行分離和定量。二甲四氯酸、唑草酮的線性相關(guān)系數(shù)為0.9985、0.9996；標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.14、0.05；變異系數(shù)為0.21%、1.20%；平均回收率為99.34%、99.146%。該方法具有簡便、快速、分離效果好等特點(diǎn)。

二甲四氯鈉；唑草酮；高效液相色譜法；分析

在我國，長期以來存在著使用單一除草劑的現(xiàn)象，使得很多雜草越來越具有抗藥性。伴隨著各種混生雜草的不斷演變，使用某種單一除草劑，有時(shí)可能會(huì)起不到除草的作用，更加不能防治混生雜草的危害，因而合理復(fù)配的除草劑越來越引起人們的重視。合理復(fù)配的除草劑不僅可以增加藥效，擴(kuò)大殺草譜，延長施藥的適用期，降低在各種農(nóng)作物和土壤中的殘留，還可以減輕農(nóng)藥的藥害，提高農(nóng)作物的安全性。66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑主要用于防治水稻田的闊葉雜草和莎草。參考大量的文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)對于二甲四氯鈉鹽和唑草酮的單一原藥的定量分析已有報(bào)道[1-3]，但是對于二甲四氯鈉、唑草酮復(fù)配的可濕性粉劑進(jìn)行同柱分離并定量分析含量的方法則未見報(bào)道。本文考慮采用高效液相色譜法測定其含量。首先配制流動(dòng)相的水為酸性（pH=4乙酸水溶液），這樣可以將可濕性粉劑樣品中的二甲四氯鈉完全轉(zhuǎn)化為二甲四氯酸，然后對二甲四氯酸和唑草酮這兩種成分進(jìn)行定性分離，并進(jìn)一步建立起對66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的定量分析方法。本文中的操作方法快速、簡單、準(zhǔn)確、分離效果好。經(jīng)驗(yàn)證，這種分析方法的線性關(guān)系、準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求，可以作為66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑產(chǎn)品的檢測分析方法。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1試劑和儀器

甲醇：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；乙酸：分析純；二甲四氯酸標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%；唑草酮標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%，標(biāo)樣全部由農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所提供。

日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，具有紫外可變波長檢測器；色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)；微量進(jìn)樣器：25μL；微孔過濾器：濾膜孔徑約為0.45μm；超聲波清洗器等。

1.2液相色譜操作條件

流動(dòng)相：甲醇∶水（水為pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）；流速：0.7mL/min；紫外檢測波長：280nm；進(jìn)樣量：5μL；出峰時(shí)間：唑草酮約8.8min，二甲四氯酸約3.8min。

上述的液相色譜分析操作條件，可以根據(jù)不同的液相色譜儀、高效液相色譜柱，對分析操作參數(shù)和操作條件作出合理、適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，從而獲得最佳的分離效果。二甲四氯酸、唑草酮標(biāo)樣和樣品的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

1.3測定步驟

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取二甲四氯酸標(biāo)樣0.4760g（精確至0.0002g），唑草酮標(biāo)樣0.0280g（精確至0.0002g）置于50mL容量瓶中，加入20mL的甲醇溶解，用超聲波振蕩15min后，取出冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。

1.3.2試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取66.5%二甲四氯鈉·4%唑草酮可濕性粉劑的試樣約0.7000g（精確至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加蒸餾水5mL，再加入乙酸調(diào)整至溶液pH=4，用超聲波振蕩溶解，取出冷卻后加入甲醇約20mL，再用超聲波振蕩15min，取出冷卻至室溫，用色譜稀釋至刻度，搖勻，備用。

圖1　二甲四氯酸、唑草酮標(biāo)樣的高效液相色譜圖

圖2　二甲四氯酸、唑草酮樣品的高效液相色譜圖

1.3.3測定

根據(jù)上述的液相色譜分析操作條件，確定液相色譜儀的基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，得出各針的的二甲四氯酸、唑草酮的峰面積。當(dāng)連續(xù)進(jìn)樣并確定相鄰兩針的峰面積相對變化值小于1.0%時(shí)，再按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序陸續(xù)進(jìn)樣，用外標(biāo)法來確定二甲四氯酸和唑草酮的含量。

1.3.4計(jì)算

將測得的試樣溶液、標(biāo)樣溶液中二甲四氯酸、唑草酮的峰面積分別進(jìn)行平均。根據(jù)二甲四氯酸、唑草酮的平均峰面積來計(jì)算各自的含量。

試樣中二甲四氯酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1（%）：

式中：A1-標(biāo)樣溶液中二甲四氯酸峰面積的平均值；A2-試樣溶液中二甲四氯酸峰面積的平均值；m1-二甲四氯酸標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2-試樣的質(zhì)量，g；Pi-標(biāo)樣中二甲四氯酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

試樣中唑草酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1（%）：

式中：A1-標(biāo)樣溶液中唑草酮峰面積的平均值；A2-試樣溶液中唑草酮峰面積的平均值；m1-唑草酮標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2-試樣的質(zhì)量，g；Pi-標(biāo)樣中唑草酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2　結(jié)果與討論

2.1色譜條件的選擇

參照文獻(xiàn)中的各種分析操作方法，并同時(shí)考慮原藥二甲四氯酸、唑草酮的理化性質(zhì)，綜合考慮后，選擇混合的甲醇、水作為流動(dòng)相。甲醇和水按照不同的配比，配制不同的流動(dòng)相，在色譜柱上進(jìn)樣分析后，進(jìn)而優(yōu)化甲醇和水的配比。為了得到更好的分離效果，并保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確，首先選用乙酸將水的pH調(diào)到4.0，然后確定選擇甲醇∶水（水為pH=4乙酸水溶液）=85∶15（V/V）的流動(dòng)相；流速調(diào)整為0.7mL/min；紫外檢測波長為280nm，可以很好地分離二甲四氯酸、唑草酮和其它雜質(zhì)；同時(shí)色譜基線平穩(wěn)，出峰的峰形漂亮，并且分析時(shí)間為12min，大大提高了分析檢測的效率。

2.2分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

稱取二甲四氯酸標(biāo)樣1.9040g（精確至0.0002g）和唑草酮標(biāo)樣0.1120g（精確至0.0002g），置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解，再用超聲波振蕩15min，稀釋至刻度，搖勻。分別準(zhǔn)確移取上述定容后的溶液5、10、15、20、25mL，置于50mL容量瓶中，再用甲醇稀釋至刻度，搖勻，定容。在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，分別以二甲四氯酸、唑草酮標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表1、圖3、圖4。二甲四氯酸線性方程y=634626x+31995，其線性相關(guān)系數(shù)為0.9985；唑草酮線性方程y=4E+06x+15235，其線性相關(guān)系數(shù)為0.9996。

表1　二甲四氯酸、唑草酮標(biāo)樣的線性相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果

圖3　二甲四氯酸濃度和峰面積的線性關(guān)系

圖4　唑草酮濃度和峰面積的線性關(guān)系

2.3分析方法的精密度試驗(yàn)

對同一產(chǎn)品準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測得二甲四氯鈉、唑草酮的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.14、0.05，變異系數(shù)分別為0.21%、1.20%（表2）。

表2　二甲四氯酸、唑草酮的精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

在已知含量的試樣中分別準(zhǔn)確加入不同量的二甲四氯酸、唑草酮標(biāo)樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測得二甲四氯酸、唑草酮的平均回收率分別為99.34%、99.146%（表3）。

表3　二甲四氯酸、唑草酮的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

3　結(jié)論

本文采用高效液相色譜法測定66.5%二甲四氯鈉· 4%唑草酮可濕性粉劑的有效成分。試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法的分離效果及線性關(guān)系良好，準(zhǔn)確度和精密度高，同時(shí)該方法具有快速、準(zhǔn)確和分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，是一種非常可行的分析操作方法。

[1]GB20698-2006，56%2甲4氯鈉鹽可溶粉劑[S].

[2]徐巧明，高清，董紅春，等.農(nóng)藥2甲4氯鈉鹽的高效液相色譜分析[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2004，3（4）：21-22.

[3]吳進(jìn)龍，張志一，單煒力，等.唑草酮原藥高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2008，29（2）：15-18.

Analytical Method for 66.5%MCPA-Na·4%Carfen Trazone-ethyl WP by RP-HPLC

LIN Xiang，LIU Gai-ling，YANG Hong-mei，CAI Chong
（Anhui Kelihua Chemical Co.，Ltd.，Suzhou 234000，China）

The analytical method for determination of 66.5%MCPA-Na·4%Carfen trazone-ethyl WP was established.The method was developed with external standard method，5μm C18 stainless steel column and UV detector by UV at wavelength of 280nm，methanol and water（85∶15，by Vol）as the mobile phase.The analysis showed that the linear correlation coefficient of MCPA，Carfen trazone-ethyl were 0.9985，0.9996；standard deviations were 0.14，0.05；variable coefficients were 0.21%，1.20%；and average recovery rates were 99.34%，99.146%.The method has the advantages of convenience，fast speed，good separation，high precision and accuracy，and fine linear correlations.

MCPA-Na；Carfen trazone-ethyl；HPLC；analysis

10.3969/j.issn.1008-553X.2016.04.042

O657.7+2；S482.4+7

A

1008-553X（2016）04-0113-03

2016-03-28

林想（1987-），男，畢業(yè)于淮北師范大學(xué)（原淮北煤炭師范學(xué)院），從事農(nóng)藥原藥、制劑的分析檢測工作，15222977136，linxiangqwe@163.com。