張 敏

（吉林省白城中心醫(yī)院檢驗科，吉林 白城 137000）

溫度、抗凝劑對1例PTCP患者血小板檢測結(jié)果的影響

張 敏

（吉林省白城中心醫(yī)院檢驗科，吉林 白城 137000）

目的觀察溫度、抗凝劑對EDTA依賴性假性血小板減少癥（PTCP）患者血小板檢測結(jié)果的影響。方法將EDTA抗凝血放置不同溫度下和枸櫞酸鈉抗凝血用全自動血細胞分析儀，按不同時間檢測血小板，同時涂片瑞-吉氏染色鏡檢，觀察血小板聚集情況。結(jié)果采血30 min后，血小板計數(shù)結(jié)果均降低，涂片可見血小板聚集。結(jié)論當遇到PTCP患者時，采血后保溫，立即送檢測定，同時加強血常規(guī)檢測的顯微鏡復檢工作。

血小板；抗凝劑；EDTA；EDTA依賴性假性血小板減少癥

國際血液學標準化委員會（ICSH）推薦使用EDTA鹽做為血常規(guī)檢測的抗凝劑，其對血細胞形態(tài)影響較小，適用于血小板計數(shù)，現(xiàn)已被廣大臨床實驗室選用。但EDTA又可誘導血小板黏附聚集，引起EDTA依賴性假性血小板減少癥（EDTA-dependent pseudothrombocytopenia，PTCP）。

1 資料與方法

1.1 病例資料：患者女性，72歲，因突然頭昏、頭暈后意識不清入院，行CT檢查后，診斷為右側(cè)丘腦出血后破入腦室。初次在急診檢驗血常規(guī)：WBC 22.0×109/L、RBC 4.38×109/L、HGB 134 g/L、PLT 230×109/L。入院第2天復查血常規(guī)：WBC 23.0×109/L、RBC 4.04× 1012/L、HGB 122 g/L、PLT 94×109/L?；颊吲R床無明顯出血傾向，無皮膚紫癜，無肝、脾、淋巴結(jié)腫大，凝血功能、尿常規(guī)、肝、腎功能、肝炎標志物、艾滋病、風濕三項、抗核抗體、甲功七項檢查均正常。由于血小板結(jié)果波動較大，與臨床不符，臨床要求重新采血復查。護士采血后立即送檢，檢驗科接收標本后5 min檢測，結(jié)果為WBC 22.5×109/L、RBC 4.28×1012/L、HGB 130 g/L、PLT 227×109/L。1 h后將前后兩管標本涂片、瑞-吉氏染色后，油鏡鏡檢，均見大片聚集的血小板，考慮該患可能為PTCP。

1.2 方法：次日，囑經(jīng)驗豐富的高年資護士采血，采集EDTA抗凝2管、枸櫞酸鈉抗凝1管。采血后立即送檢。將一管EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血室溫放置，將另一管EDTA抗凝血放置于37 ℃水浴箱。使用日本光電全自動血細胞分析儀8222-K型及其原廠配套試劑，按不同時間檢測，測得血小板結(jié)果見表；同時每管取10微升推片、瑞-吉氏染色鏡檢，觀察血小板聚集情況，每張涂片油鏡觀察20個視野，計數(shù)聚集簇數(shù)，將2個以上的血小板聚集計為1簇。

2 結(jié) 果

由表1可見：EDTA抗凝標本，室溫放置20 min時，血小板檢測結(jié)果開始降低，30 min時明顯降低，結(jié)果降低近50%，4 h后結(jié)果趨于穩(wěn)定，降低80%多。EDTA抗凝37 ℃水浴放置的標本，30 min時血小板檢測結(jié)果降低，45 min～4 h降低30%。枸櫞酸鈉抗凝血，30 min開始降低，4 h將為原來的50%左右；而采血5 min時，3管血均無聚集。采血20 min后，3管血均見不同程度的聚集。30 min時均見明顯聚集，EDTA室溫放置管聚集簇達到最多101簇。45 min時EDTA37 ℃放置和枸櫞酸鈉管聚集最多，分別為61簇和47簇。

3 討 論

該患者因前1 d測定血小板240×109/L，當天結(jié)果為94×109/L，所以當臨床接到檢驗結(jié)果時，及時將結(jié)果波動太大又沒有臨床癥狀的情況反饋給檢驗科。檢驗科囑護士重新采血立即送檢，復查，血小板227×109/L，將復查的標本又拿到急診檢驗科的血細胞分析儀檢測，血小板230×109/L。查找原因，當天的儀器運行情況正常、質(zhì)控在控，基本可以排除儀器因素。1 h后把兩管標本都送到形態(tài)室，涂片瑞氏-吉姆沙染色后鏡檢，發(fā)現(xiàn)兩管標本所做涂片均見血小板大片聚集，無姜毅，劉甲辰等報道的血小板衛(wèi)星現(xiàn)象[1]。

次日，采取EDTA抗凝2管、枸櫞酸鈉抗凝1管。采血后立即送檢。為了排除冷凝集素的影響，將一管EDTA抗凝血置于37 ℃水浴箱，還有人報道遇到PTCP的患者，可以用枸櫞酸鈉替代EDTA[2]，所以我們同時做了對照。枸櫞酸鈉抗凝標本采血后30 min時血小板檢測結(jié)果也降低與王蘇平等人報道的結(jié)果不一致[3]。

PTCP患者極為罕見，在臨床發(fā)生率僅為0.09%～0.21%?？赡苁且驗榛颊叩难獫{中存在抗血小板抗體、抗心磷脂抗體、自身抗體等因素，沒有病理和生理意義。多發(fā)生于腫瘤患者，自身免疫疾病及不明原因疾病[4]。EDTA鹽做為抗凝劑時可以介導血液中的冷抗血小板抗體與血小板膜表面某種隱匿性抗原結(jié)合，同時激活PLA、PLC、AA、ADP、5-HT等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)又能活化血小板纖維蛋白受體，促使血小板與纖維蛋白原聚集成團，出現(xiàn)血小板聚集現(xiàn)象[5]。

自動化血細胞分析儀對血小板的檢測應用電阻抗法：懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細胞在通過檢測小孔時內(nèi)、外電流或電壓發(fā)生變化，形成脈沖信號，根據(jù)信號的多少和大小進行血細胞數(shù)量和體積測定，將體積為2～30 fl的細胞計數(shù)為血小板[6]。PTCP患者，隨著標本放置時間的延長，血小板聚集就越多。儀器誤把一簇血小板計數(shù)成一個血小板。還有一部分血小板聚集的體積超出血小板檢測閾值上限，與白細胞、紅細胞體積大小相仿時，就會被儀器誤認成白細胞、紅細胞，從而使白細胞、紅細胞的結(jié)果假性升高，使血小板的結(jié)果假性降低。

該患臨床無明顯出血傾向，無皮膚紫癜，無肝、脾、淋巴結(jié)腫大，凝血功能、尿常規(guī)、肝功能、腎功能、肝炎標志物、艾滋病、抗鏈-ASO、類風濕因子、C反應蛋白、抗核抗體、甲功七項檢查均正常，基本可以排除疾病引起的血小板減少[7]；療區(qū)護士一般早晨6點就統(tǒng)一采血，采血后室溫放置，8點送至檢驗科，一般檢驗科最快也得8點半才能測定，這期間就有2個半小時左右，遠超過30 min，因此該患者血小板減少并不是她自身真的減少，沒有病理和生理意義。

此病例警示我們，當遇到PTCP患者時，要與護士溝通好，特殊標本特殊對待，采血后盡量保溫，立即送檢，囑檢驗科立即檢測，給患者提供一個真實可靠的檢驗結(jié)果。另外，加強血常規(guī)檢測的顯微鏡復檢工作勢在必行，避免誤診、誤治。

[1]姜毅,劉甲辰.DETA-K2抗凝劑導致血小板假性減少[J].當代醫(yī)學,2010,16(10):113.

[2]董敏,方穎,王永才.糾正EDTA抗凝劑依賴引起的假性血小板減少的方法學探討[J]中國醫(yī)療前沿,2009,20(4):68.

[3]王蘇平,周金,吳靜,等.EDTA抗凝血檢測血小板計數(shù)變化一例分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2008,23(2):39.

[4]秦俊生,史冰洋,王小艷,等.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2006,21(1):63-64.

[5]陳言偉,張一民,董娟.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例分析[J].中國誤診學雜志,2011,11(4):849.

[6]羅春麗.臨床檢驗基礎[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:47-52.

[7]竇心靈,何貴山,朱建敏,等.EDTA-K2抗凝劑導致血小板假性減少1例報道[J].中國實驗診斷學,2005,9(1):77.

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