羅清華
凝血測定中抗凝劑的應(yīng)用
羅清華
目的 探討血液與抗凝劑不同比例及紅細(xì)胞壓積(Hct)的變化對(duì)測定凝血酶原時(shí)間(PT)和活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)的影響。方法 抽取25例體檢健康者血液與抗凝劑9:1和5:1混勻,分離血漿后立即測定PT、APTT,另取PT、APTT、Hct均正常血液10份,每份模擬成Hct是10%~80%各系列標(biāo)本,全血與抗凝劑9:1抗凝,混勻,分離血漿測定。結(jié)果 血液與抗凝劑比例縮小,PT、APTT時(shí)間延長(P<0.01);Hct的變化對(duì)PT、APTT測定結(jié)果均有影響(P<0.01)。結(jié)論 檢測PT、APTT應(yīng)嚴(yán)格把握抗凝劑比例,特別是Hct≥60%時(shí)。
凝血測定;抗凝劑;凝血酶原時(shí)間;活化部分凝血活酶時(shí)間
在凝血測定時(shí)所用標(biāo)本均為抗凝劑與全血按1:9比例混勻的抗凝血,經(jīng)分離血漿后進(jìn)行檢測,因?yàn)榭鼓齽┲粚?duì)血漿起作用,準(zhǔn)確的說,1:9指的是1份抗凝劑對(duì)9份紅細(xì)胞壓積正常血液中血漿總量而言,由于抗凝劑加入量不準(zhǔn)和由于貧血或紅細(xì)胞增多癥,血漿量的變化引起抗凝劑的比例變化均可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此抗凝劑的合理使用是凝血分析質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié),筆者對(duì)此進(jìn)行了探討,現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 對(duì)象 紅細(xì)胞壓積正常(Hct40%~50%)者25例,紅細(xì)胞壓積(Hct)、凝血酶原時(shí)間(PT)和活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)三者均正常者10例。采血部位為肘前靜脈,均抽血順利。
1.2 方法 儀器與試劑:ACL200凝血儀及配套試劑,抗凝劑為ICSH和ICTH推薦使用的3.2%0.109 mol/L枸椽酸鈉抗凝劑。操作方法:(1)取Hct正常的靜脈血液25份,用枸椽酸鈉抗凝劑與同一份血液按1:9、1:5配制成抗凝血,混合后,以4 000轉(zhuǎn)/min離心15 min,測定PT和APTT。(2)取Hct、PT、APTT均正常的血液10份,根據(jù)計(jì)算模擬成Hct為10% ~80%各系列的標(biāo)本,分別按抗凝劑與全血1:9抗凝,再測定它們的PT、APTT。
2.1 正常壓積下血液與抗凝劑不同比例混合,PT、APTT測定結(jié)果 抗凝劑比例增大可引起PT、APTT明顯延長。經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn),1:5比例抗凝劑較1:9比例抗凝結(jié)果差異有顯著性(P <0.01)。見表1。
表1 抗凝劑與不同全血比例PT、APTT的測定結(jié)果(±s)
表1 抗凝劑與不同全血比例PT、APTT的測定結(jié)果(±s)
抗凝劑:全血 例數(shù) PT(s) APTT(s) 1: 5 25 17.5±2.64 47.8±4.71 9 25 12.4±0.66 35.5±2.66 1:
2.2 不同Hct的枸椽酸鈉抗凝血PT、APTT的測定結(jié)果 正常Hct者(Hct45%)的測定結(jié)果與各非正常Hct者結(jié)果均進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn),顯示差異均有顯著性(P<0.01)。見表2。
表2 Hct枸椽酸鈉抗凝血漿PT、APTT的影響(±s)
表2 Hct枸椽酸鈉抗凝血漿PT、APTT的影響(±s)
Hct(10%) 例數(shù) PT(s) APTT(s) 10 10 12.06±0.65 29.94±2.19 20 10 12.24±0.67 31.93±2.47 30 10 12.54±0.73 33.74±2.47 45 10 12.65±0.79 35.03±2.72 60 10 14.80±1.08 40.02±3.05 70 10 17.75±1.48 46.82±3.73 80 10 51.43±7.91 90.75±16.69
凝血酶原時(shí)間(PT)和活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)是臨床上的常規(guī)檢測項(xiàng)目。PT測定是一種外源性凝血系統(tǒng)的過篩實(shí)驗(yàn),綜合反映血漿中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性。APTT實(shí)驗(yàn)是較敏感的初篩內(nèi)源性凝血系統(tǒng)凝血缺陷的常規(guī)方法[1]。
在目前的日常工作中,特別是已經(jīng)使用真空采血管采血的醫(yī)院,加入抗凝劑的量是固定的,但當(dāng)抽血量過多或過少時(shí),加入的抗凝劑量沒進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整而造成抗凝劑量相對(duì)過少或過多。從表1的結(jié)果中可以知道抗凝劑量的改變,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響,特別是抗凝劑增多可使PT、APTT結(jié)果明顯延長。這樣的標(biāo)本,特別是血量嚴(yán)重偏少時(shí)應(yīng)重新采樣。
從表2的結(jié)果中可以看出,Hct的多少也會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,特別是當(dāng)Hct≥60%時(shí),不僅與Hct正常的結(jié)果差異有顯著性(P<0.01),而且超出了正常參考范圍(PT11s~14s,APTT30s~40s)。因?yàn)闇?zhǔn)確的1:9是指1份抗凝劑對(duì)9份紅細(xì)胞壓積正常血液中血漿總量而言,Hct的變化間接引起了抗凝劑的過多或過少。在實(shí)際工作中,經(jīng)常會(huì)遇到貧血或紅細(xì)胞增多癥引起Hct增減的標(biāo)本,測定了患者Hct后,可用公式:抗凝劑用量(ml)=0.185×血量×(1-患者紅細(xì)胞壓積)計(jì)算后調(diào)整抗凝劑量再進(jìn)行PT、APTT的測定。但根據(jù)表2的結(jié)論,Hct<40%時(shí)雖與Hct正常的結(jié)果差異有顯著性,但并未超出正常的參考范圍,對(duì)這樣的標(biāo)本,只在必要時(shí)重新采樣即可[2]。
綜上分析,掌握好抗凝劑的量在凝血實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性有很大意義,可為臨床診斷及治療提供更準(zhǔn)確的輔助檢查依據(jù)。
[1] 李綿綿,陳小劍,江明華.不同抗凝劑濃度對(duì)TEST1全自動(dòng)血沉儀測定血沉結(jié)果的影響[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2007,25(3):282.
[2] 吳 凱,熊建輝,趙 ?。煌鼓齽舛葘?duì)血細(xì)胞分析儀測定結(jié)果的影響[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2005,12(8B):2197.
10.14126/j.cnki.1008-7044.2015.06.032
R446.11
A
1008-7044(2015)06-0574-02
江西省豐城礦務(wù)局總醫(yī)院檢驗(yàn)科,331141
羅清華(1974-),男,江西豐城市人,主管檢驗(yàn)師,大學(xué)。
2015-05-04)