王小玉，孫復(fù)錢(qián)，曾國(guó)屏，劉昕昕，喻繼文，賴(lài)家平

(1.江西省科學(xué)院 應(yīng)用化學(xué)研究所，江西 南昌 360102；2.華南師范大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510006)

基于離子液體輔助氯霉素分子印跡聚合物的制備及應(yīng)用

王小玉1*，孫復(fù)錢(qián)1，曾國(guó)屏1，劉昕昕1，喻繼文1，賴(lài)家平2*

(1.江西省科學(xué)院 應(yīng)用化學(xué)研究所，江西 南昌 360102；2.華南師范大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510006)

以氯霉素(CAP)為模板，2-乙烯基吡啶(2-Vp)為功能單體，四氫呋喃和離子液體1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽[BMIm]BF4的混合溶液為反應(yīng)溶劑，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑，合成了氯霉素的分子印跡及非印跡聚合物。優(yōu)化功能單體、不同溶劑對(duì)印跡聚合物吸附性能的影響，結(jié)果表明，以2-乙烯基吡啶為功能單體，四氫呋喃和離子液體[BMIm]BF4(體積比1∶1)作為反應(yīng)溶劑合成的分子印跡聚合物對(duì)氯霉素具有高的吸附容量，良好的特異性識(shí)別性能。氯霉素分子印跡聚合物的印跡因子為2.6，進(jìn)行吸附-解吸附循環(huán)5次后，氯霉素印跡聚合物的性能穩(wěn)定，可重復(fù)使用。將制備的氯霉素分子印跡聚合物作為富集材料，應(yīng)用于雞蛋樣品中氯霉素的檢測(cè)，回收率可達(dá)62.3%～81.1%，準(zhǔn)確性好。

氯霉素；分子印跡聚合物；離子液體；雞蛋樣品；分離富集

氯霉素(Chloramphenicol，CAP，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1)是一種廣譜性抗生素，在家禽的疾病預(yù)防與治療以及養(yǎng)蜂業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)等中得到了廣泛的應(yīng)用。然而長(zhǎng)期使用可引起再生性障礙性貧血和其他惡性的血液病。動(dòng)物性食品與水產(chǎn)品中的氯霉素殘留對(duì)人體健康也構(gòu)成了很大威脅。歐盟、美國(guó)等均在法規(guī)中規(guī)定CAP殘留限量標(biāo)準(zhǔn)為“零容許量”[1]，即不得檢出。我國(guó)也禁止將氯霉素及其鹽、酯用于食品及動(dòng)物食料。因此建立高靈敏度、高選擇性的動(dòng)物源性食品氯霉素殘留的檢測(cè)方法是非常必要的。

圖1 氯霉素、甲砜霉素、四環(huán)素、磺胺甲唑、功能單體及離子液體的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structures of chloramphenicol, thiamphenicol, tetracycline, sulfamethoxazole,functional monomers and ionic liquids

目前氯霉素殘留的分析方法主要有微生物法、酶聯(lián)免疫分析法、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)以及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS和GC-MS)等[2-7]。由于動(dòng)物源性食品的基質(zhì)成分復(fù)雜，干擾多，目標(biāo)分析物含量極低，所以前處理方法對(duì)于樣品分析來(lái)說(shuō)十分關(guān)鍵。固相萃取(SPE)[7]是應(yīng)用最廣的樣品前處理方法之一，但絕大多數(shù)固相萃取吸附劑缺乏選擇性。分子印跡聚合物(Molecularly imprinted polymers，MIPs)是一類(lèi)對(duì)特定物質(zhì)具有特異性吸附的分離材料[9-10]，在復(fù)雜基質(zhì)樣品前處理領(lǐng)域中得到廣泛關(guān)注。已有文獻(xiàn)將CAP的分子印跡聚合物用于電化學(xué)傳感器、HPLC和SPE固定相的報(bào)道[10-12]。

室溫離子液體(Room temperature ionic liquids，RTILs)是一類(lèi)環(huán)境友好、無(wú)污染、低熔點(diǎn)和寬電化學(xué)窗口的新型溶劑，在電化學(xué)、化學(xué)反應(yīng)及分離過(guò)程中得到了廣泛的應(yīng)用[13-14]。離子液體也被應(yīng)用于分子印跡技術(shù)中，Wang等[15]采用室溫離子液體1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([BMIm]PF6)為介質(zhì)溶膠-凝膠技術(shù)制備了分子印跡整體柱，并將其應(yīng)用于手性物質(zhì)的分離。Sun等[16]以1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽([BMIm]BF4)為致孔劑，采用原位聚合法制備了諾氟沙星印跡整體柱。He等[17]利用[BMIm]BF4作為溶劑和致孔劑，采用溶膠-凝膠及犧牲空間法制備了睪丸素的分子印跡聚合物。

本文以氯霉素(CAP)為模板，2-乙烯基吡啶(2-Vp)為功能單體，四氫呋喃和離子液體[BMIm]BF4的混合溶液為反應(yīng)溶劑，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑，合成了氯霉素的分子印跡聚合物。對(duì)合成聚合物的條件進(jìn)行了優(yōu)化，并研究了氯霉素印跡聚合物的吸附性能。該制備過(guò)程簡(jiǎn)單，印跡材料可多次重復(fù)利用，將其作為選擇性吸附劑，可實(shí)現(xiàn)對(duì)雞蛋樣品中痕量氯霉素的富集和檢測(cè)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

L-550臺(tái)式低速離心機(jī)(長(zhǎng)沙市湘儀離心機(jī)有限公司)，AVATAR 360傅立葉變換紅外光譜儀(美國(guó)Nicolet公司)，SS-550掃描電子顯微鏡、UV-2450型紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)、LC-20AT高效液相色譜(日本島津公司)。氯霉素在C18-柱上的色譜測(cè)定條件：使用Shimadzu VP-ODS 型C18-色譜柱(5 μm，150 mm×4.6 mm)；流動(dòng)相：色譜純乙腈-水(體積比40∶60，含0.1%乙酸)；流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣體積為20 μL；紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm或275 nm。

1.2 氯霉素分子印跡聚合物的制備

稱(chēng)取氯霉素80.8 mg置于磨口玻璃瓶中，加入3 mL四氫呋喃或離子液體[BMIm]BF4或不同比例的四氫呋喃和[BMIm]BF4混合溶液作為溶劑，振蕩使氯霉素溶解。然后向玻璃瓶中加入105 μL 2-乙烯基吡啶，用橡膠瓶蓋塞緊，然后放至搖床上振蕩30 min，加入943 μL乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈10 mg，超聲溶解混勻后，通氮?dú)?0 min，密封后放入60 ℃恒溫水浴鍋中，反應(yīng)24 h。制備的聚合物先用甲醇洗滌3次，60 ℃下真空干燥。干燥后的聚合物研磨過(guò)篩，得到微米級(jí)顆粒。然后用洗脫液甲醇-乙酸(體積比9∶1)洗脫聚合物以提取模板分子，直至洗脫液在275 nm處無(wú)紫外吸收。用甲醇洗滌印跡聚合物3次以除去殘留的乙酸，最后在60 ℃下真空干燥至恒重，即得干燥的印跡聚合物。非印跡聚合物的合成除不加入模板分子氯霉素外，其它步驟均與印跡聚合物的制備步驟相同。

1.3 氯霉素分子印跡聚合物吸附性能的研究

氯霉素分子印跡聚合物的動(dòng)力學(xué)吸附性能實(shí)驗(yàn)：稱(chēng)取氯霉素分子印跡聚合物30 mg置于離心管中，每個(gè)離心管中加入6.0 mL濃度為10 mg·L-1的氯霉素的乙腈溶液，室溫下振蕩。每隔一段時(shí)間(5，10，15，……,60 min)后，取100 μL吸附后的上清液，然后利用高效液相色譜測(cè)定溶液中氯霉素的濃度，直至吸附后的溶液濃度值基本無(wú)變化為止。

氯霉素分子印跡聚合物及非印跡聚合物吸附實(shí)驗(yàn)：分別稱(chēng)取10 mg干燥的氯霉素分子印跡聚合物及相應(yīng)的非印跡聚合物，置于10 mL離心管中，然后分別加入10 mg/L氯霉素的乙腈溶液3.0 mL，室溫下振蕩12 h，利用高效液相色譜測(cè)定溶液中氯霉素的濃度。聚合物對(duì)氯霉素的吸附量按照下式計(jì)算：Q=(C0-Ce)V/m。其中，C0(mg/L)和Ce(mg/L)分別代表氯霉素溶液的初始濃度和吸附平衡后的平衡濃度，V(mL)代表吸附溶液的體積，m(g)代表聚合物的質(zhì)量。

氯霉素分子印跡聚合物的吸附-解吸實(shí)驗(yàn)：準(zhǔn)確稱(chēng)取30.0 mg氯霉素分子印跡聚合物，加入3.0 mL 80.0 mg/L的氯霉素溶液，室溫振蕩12 h后，利用高效液相色譜測(cè)定吸附后溶液中氯霉素的濃度。然后用甲醇-乙酸(9∶1)洗滌上述吸附完氯霉素的印跡聚合物，直至洗脫液在275 nm處無(wú)紫外吸收，用甲醇洗滌印跡聚合物3次除去殘留的乙酸，60 ℃下真空干燥至恒重。再向該聚合物中加入3.0 mL 80.0 mg/L的氯霉素溶液，室溫振蕩12 h后，利用高效液相色譜測(cè)定吸附后溶液中氯霉素的濃度。重復(fù)5次。

1.4 氯霉素分子印跡聚合物應(yīng)用于雞蛋樣品中氯霉素的分離富集

對(duì)市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)的雞蛋樣品進(jìn)行前處理。首先將雞蛋樣品制成勻漿，稱(chēng)取3份雞蛋樣品，每份5.0 g，置于50 mL離心管中。分別以氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液加至雞蛋樣品中，使其最終濃度為5.0，10.0，30.0 μg/kg；然后分別加入20 mL乙醇-水(體積比6∶4)溶液，將樣品溶液在振蕩器上振蕩1 h，離心，將上清液倒入另一離心管中；再向沉淀物中加入20 mL乙醇-水(6∶4)溶液，重復(fù)提取2次。合并3次提取的上清液，吹干濃縮后，用乙腈定容至50 mL，過(guò)0.22 μm濾膜，密封待用。每個(gè)添加濃度平行3份。將50 mg氯霉素分子印跡聚合物分別加入上述處理好的3個(gè)濃度添加水平的氯霉素工作液，室溫下振蕩吸附，離心，將上層清液倒掉，反復(fù)吸附幾次后，用甲醇-乙酸(9∶1)洗滌氯霉素分子印跡聚合物，收集洗脫液，吹干，用流動(dòng)相定容，利用高效液相色譜測(cè)定吸附后溶液中氯霉素的濃度。每個(gè)添加濃度平行3份。

2 結(jié)果與討論

2.1 氯霉素分子印跡聚合物的制備條件優(yōu)化

分子印跡聚合物的性能與功能單體、交聯(lián)劑以及溶劑等因素有關(guān)。首先，選擇合適的功能單體特別重要，只有當(dāng)功能單體與模板分子之間能形成作用較強(qiáng)的多作用位點(diǎn)時(shí)，所制備的分子印跡聚合物對(duì)模板分子才會(huì)有較好的識(shí)別性能。其次，溶劑的選擇也直接影響到聚合物的識(shí)別性能。因?yàn)樵谥苽浞肿佑≯E聚合物時(shí)，溶劑不但是反應(yīng)介質(zhì)，還有致孔劑的作用。選擇的反應(yīng)溶劑不但能溶解模板分子、功能單體、交聯(lián)劑及引發(fā)劑等，還必須能產(chǎn)生一定的大孔，使所制備的聚合物具有大的比表面積，從而能很好地識(shí)別模板分子。

2.1.1 溶劑的選擇分別選擇了氯仿和四氫呋喃兩種溶劑作為反應(yīng)的溶劑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以氯仿為溶劑時(shí)，模板分子氯霉素的溶解性很差，超聲加熱也不能溶解；而以四氫呋喃為溶劑時(shí)，模板分子的溶解性很好，所以選用四氫呋喃作為反應(yīng)溶劑。

2.1.2 功能單體的選擇分別選擇2-乙烯基吡啶和甲基丙烯酸為功能單體，四氫呋喃為溶劑合成了分子印跡聚合物和非印跡聚合物，考察了兩種功能單體合成的印跡聚合物及非印跡聚合物的吸附性能。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)以2-乙烯基吡啶為功能單體合成的印跡聚合物對(duì)模板分子的吸附量是甲基丙烯酸為功能單體時(shí)的1倍，兩者的非印跡聚合物的吸附容量幾乎相等，印跡聚合物與非印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附差別非常明顯。其原因可從功能單體與模板氯霉素的結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)。功能單體甲基丙烯與模板分子之間只存在氫鍵作用；而功能單體2-乙烯基吡啶與模板分子氯霉素的結(jié)構(gòu)中均含有1個(gè)六元的共軛環(huán)狀結(jié)構(gòu)，故它們?cè)陬A(yù)聚合過(guò)程中除了有氫鍵作用之外，可能還存在π-π共軛的結(jié)合力，故兩者之間的作用力較強(qiáng)。因此以2-乙烯基吡啶為功能單體合成的印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附容量大。本實(shí)驗(yàn)采用2-乙烯基吡啶為功能單體。

2.1.3 離子液體的選擇分別選用兩種咪唑類(lèi)離子液體[BMIm]BF4和[BMIm]PF6(圖1)作為反應(yīng)溶劑，發(fā)現(xiàn)親水性離子液體[BMIm]BF4能很好地溶解模板分子氯霉素；而疏水性離子液體[BMIm]PF6粘度很大，對(duì)氯霉素的溶解性很差，所以本實(shí)驗(yàn)選用離子液體[BMIm]BF4作為混合反應(yīng)溶劑。由于離子液體本身具有特殊的物理化學(xué)性質(zhì)，其在反應(yīng)體系中所占的比例會(huì)直接影響合成的聚合物的形態(tài)和吸附性能?？疾炝朔磻?yīng)溶劑[BMIm]BF4和THF的用量，發(fā)現(xiàn)當(dāng)THF和[BMIm]BF4的體積比大于1時(shí)，二者分層，不相溶；當(dāng)THF與[BMIm]BF4的體積比小于1時(shí)，二者能互溶。分別以THF，BMIm[BF4]，THF-[BMIm]BF4(1∶1)和THF-[BMIm]BF4(1∶2)為反應(yīng)溶劑合成了氯霉素分子的印跡聚合物及非印跡聚合物，其掃描電鏡圖見(jiàn)圖2。以單獨(dú)的THF為反應(yīng)溶劑時(shí)，合成的聚合物較致密(圖2a，2b)；以單一離子液體BMIm[BF4]為反應(yīng)溶劑，合成的聚合物有明顯的孔徑通道(圖2g，2h)；當(dāng)加入不同比例的離子液體[BMIm]BF4后，兩種溶劑混合合成的聚合物分散性較好，均優(yōu)于使用單一溶劑，得到了粒徑分布相對(duì)均勻的微球，其中THF∶[BMIm]BF4為1∶1時(shí)，得到的微球粒徑為300～700 nm(圖2c，2d)，而THF∶[BMIm]BF4為1∶2時(shí)，微球的粒徑變小，大小為300～400 nm(圖2e，2f)。印跡聚合物與非印跡聚合物相比，有更多的空隙，有利于目標(biāo)物的傳輸和吸附。從不同溶劑組成合成的印跡聚合物及非印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附容量(圖3)來(lái)看，當(dāng)THF∶[BMIm]BF4為1∶1(體積比)時(shí)，合成的印跡聚合物的吸附容量最大，印跡效果最好，吸附結(jié)果與掃描電鏡的結(jié)果相符。本實(shí)驗(yàn)選用THF∶[BMIm]BF4=1∶1的混合溶劑作為反應(yīng)溶劑，2-乙烯基吡啶為功能單體，交聯(lián)劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯，引發(fā)劑為偶氮二異丁腈，合成氯霉素分子印跡聚合物，其中模板分子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1∶4∶20。

圖2 分別以四氫呋喃、四氫呋喃+離子液體、離子液體為溶劑合成的氯霉素分子印跡聚合物及非印跡聚合物的掃描電鏡圖Fig.2 SEM images of CAP-MIP and NIP prepared using only THF，THF+ionic liquids，and only ionic liquids as porogena.MIP(THF)，b.NIP(THF)，c.MIP(T∶B=1∶1)，d.NIP(T∶B=1∶1)，e.MIP(T∶B=1∶2)，f.NIP(T∶B=1∶2)，g.MIP([BMIm]BF4)，h.NIP([BMIm]BF4)

2.2 氯霉素分子印跡聚合物對(duì)氯霉素吸附性能的研究

圖3 不同溶劑合成的印跡聚合物及非印跡聚合物對(duì)氯霉素吸附Fig.3 The adsorption of as-prepared MIP and NIP towards to CAP using different solvent in the polymerization

氯霉素印跡聚合物MIPs和NIPs的熱力學(xué)吸附結(jié)果如圖4所示。隨著氯霉素濃度的增加，MIPs對(duì)氯霉素的吸附量也逐漸增加。當(dāng)氯霉素的濃度較低時(shí)，模板分子氯霉素不能全部占據(jù)印跡聚合物上的印跡識(shí)別位點(diǎn)，此時(shí)分子印跡聚合物和非印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附量差別不大。但是隨著氯霉素溶液濃度的增加，由于非印跡聚合物沒(méi)有特異性識(shí)別的印跡位點(diǎn)，因此吸附量變化很小。這說(shuō)明氯霉素分子印跡聚合物與非印跡聚合物相比，其表面及內(nèi)部形成了對(duì)模板分子氯霉素具有特異性識(shí)別作用的印跡位點(diǎn)。因此，氯霉素分子印跡聚合物對(duì)模板分子氯霉素的吸附量遠(yuǎn)大于非印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附量。另外，當(dāng)氯霉素溶液的濃度超過(guò)一定范圍時(shí)，模板分子占據(jù)了所有的印跡位點(diǎn)，此時(shí)印跡聚合物達(dá)到飽和吸附平衡。當(dāng)氯霉素的濃度為80 mg·g-1時(shí)，MIPs對(duì)氯霉素的吸附基本達(dá)到吸附平衡，最大吸附量約為1.88 mg·g-1；而非印跡聚合物對(duì)模板分子氯霉素的最大吸附量約為0.72 mg·g-1。

圖4B為氯霉素分子印跡聚合物對(duì)氯霉素的動(dòng)力學(xué)吸附，從圖中可以看出，在開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)，印跡聚合物對(duì)模板分子氯霉素的吸附量增加較快，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，印跡聚合物對(duì)模板分子的吸附量增加逐漸減小，大約210 min左右，印跡聚合物對(duì)模板分子的吸附量幾乎不再增加，吸附達(dá)到平衡。這可能是由于在吸附過(guò)程的開(kāi)始階段，印跡聚合物的識(shí)別位點(diǎn)較多，氯霉素分子可以較快地占據(jù)這些識(shí)別位點(diǎn)。但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，氯霉素分子占據(jù)了大多數(shù)識(shí)別位點(diǎn)，從而使印跡聚合物對(duì)氯霉素吸附量增加的趨勢(shì)逐漸變緩。經(jīng)過(guò)足夠長(zhǎng)的時(shí)間之后，氯霉素分子占據(jù)了所有的識(shí)別位點(diǎn)，印跡聚合物對(duì)氯霉素的吸附量不再增加，吸附達(dá)到平衡，吸附曲線出現(xiàn)平臺(tái)。

印跡聚合物對(duì)模板分子的識(shí)別選擇性通常用印跡因子(α)來(lái)評(píng)價(jià):α=QMIP/QNIP，其中，QMIP和QNIP分別為印跡聚合物和非印跡聚合物對(duì)模板分子氯霉素的飽和吸附量。通過(guò)公式計(jì)算出氯霉素印跡聚合物對(duì)氯霉素的印跡因子α為2.61，說(shuō)明氯霉素印跡聚合物對(duì)模板分子具有較好的選擇性。

圖5 氯霉素分子印跡聚合物和非印跡聚合物對(duì)氯霉素、甲砜霉素、四環(huán)素、磺胺甲唑的吸附Fig.5 The adsorption of as-prepared MIP and NIP towards to CAP, TAP, TC and SMO

2.3 氯霉素分子印跡聚合物的選擇性

2.4 氯霉素分子印跡聚合物的重復(fù)使用性能

分子印跡聚合物的重復(fù)利用性能是評(píng)價(jià)分子印跡聚合物吸附性能的重要指標(biāo)。為了考察氯霉素分子印跡聚合物的重復(fù)使用性能，對(duì)其進(jìn)行了吸附-解吸實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，印跡聚合物每次的吸附量都會(huì)比前1次有所下降。這可能是由于在前1次的吸附過(guò)程中部分模板分子被吸附在印跡聚合物的內(nèi)部，占據(jù)了一部分印跡位點(diǎn)，洗脫過(guò)程中無(wú)法將其洗脫下來(lái)，從而使得這部分識(shí)別位點(diǎn)不能再吸附新的模板分子，或是在洗脫過(guò)程中印跡聚合物的部分結(jié)合位點(diǎn)的空間結(jié)構(gòu)遭到破環(huán)，造成了聚合物吸附量的逐次降低。對(duì)同一印跡聚合物進(jìn)行了5次吸附-解吸實(shí)驗(yàn)，第5次吸附量為第1次吸附量的79.78%。由此可見(jiàn)，制備的印跡聚合物的重復(fù)利用性較好。

2.5 氯霉素分子印跡聚合物對(duì)雞蛋樣品中氯霉素的分離富集

圖6 氯霉素分子印跡聚合物對(duì)雞蛋樣品的富集色譜圖Fig.6 Chromatograms of CAP-MIPs for enrichment of CAP in the spiked egg sample at concentration of 30.0 μg·kg-1curve 1：egg sample; curve 2：elution of CAP-MIPs washed with a mixture of methanol-acetic acid(9∶1) after adsorbing samples

將氯霉素分子印跡聚合物材料作為選擇性吸附劑應(yīng)用于雞蛋樣品中氯霉素的分離富集。如圖6所示，曲線1為加標(biāo)水平30.0 μg·kg-1的雞蛋加標(biāo)液；曲線2為氯霉素分子印跡聚合物對(duì)雞蛋加標(biāo)液吸附富集之后，用甲醇-乙酸(9∶1)洗脫分子印跡聚合物的洗脫液。由圖6可知，雞蛋加標(biāo)液經(jīng)過(guò)氯霉素分子印跡聚合物的富集后，氯霉素出現(xiàn)很明顯的色譜峰，能夠利用高效液相色譜快速檢測(cè)氯霉素含量。對(duì)購(gòu)于超市的雞蛋樣品未檢出氯霉素殘留。為了驗(yàn)證MIPs結(jié)合HPLC測(cè)定氯霉素的可靠性，向雞蛋添加5.0，10，30 μg·kg-13個(gè)水平的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)液，每個(gè)添加水平平行3份，測(cè)定氯霉素的平均回收率分別為62.3%，76.2%和81.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于11.5%，方法的回收率和準(zhǔn)確性均較好，表明氯霉素分子印跡聚合物適用于雞蛋樣品中痕量氯霉素的富集和檢測(cè)。

3 結(jié) 論

本文以四氫呋喃和離子液體[BMIm]BF4為反應(yīng)混合溶劑，2-乙烯基吡啶為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑制備了氯霉素分子印跡聚合物。制備的分子印跡聚合物為粒徑分布均勻的微球，具有多孔結(jié)構(gòu)，對(duì)模板分子具有高的吸附容量，響應(yīng)動(dòng)力學(xué)較快，選擇識(shí)別性能良好，可以重復(fù)使用。使用氯霉素印跡聚合物作為吸附材料，對(duì)雞蛋樣品中的氯霉素進(jìn)行選擇性富集，效果較理想，對(duì)雞蛋樣品中加標(biāo)回收率可達(dá)62.3%～81.1%，有望應(yīng)用于實(shí)際樣品中氯霉素殘留量的檢測(cè)分析。

[1] Commission Regulation 1430/94 of 22 June 1994.Laying Down a Community Procedure for the Establishment of Maximum Residue Limits of Veterinary Medicinal Products in Foodstuffs of Animal Origin.Off.J.Eur.Commun.，1994，L156：6.

[2] Impens S，Reybroeck W，Vercammen J，Courtheyn D，Ooghe S，DeWash K，Smedts W，DeBrabander H.Anal.Chim.Acta，2003,483:153-163.

[3] Huang J F，Zhang H J，F(xiàn)eng Y Q.J.Agric.FoodChem.，2006,54：9279-9286.

[4] Huang J X，Hu Y F，Pan J L，Xu Z G，Li G K.Sci.ChinaB(黃健祥，胡玉斐，潘加亮，許志剛，李攻科.中國(guó)科學(xué)B輯),2009,39：733-746.

[5] Wen Y Y，Chen L，Li J H，Liu D Y，Chen L X.TrAC，TrendsAnal.Chem.，2014,59:26-41.

[6] Kaufmann A，Butcher P，Maden K，Walker S，Widmer M.Anal.Chim.Acta，2015,862：41-52.

[7] Zhang Y，Li G K.J.Instrum.Anal.(張毅，李攻科.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2008,27(2)：215-221.

[8] Hu Y F，Li G K.J.Instrum.Anal.(胡玉斐，李攻科.分析測(cè)試學(xué)報(bào))，2009,28(8)：989-994.

[9] Chen L，Xu S，Li J.Chem.Soc.Rev.，2011,40：2922-2942.

[10] Mena M L，Agüí L，Martinez-Ruiz P，Yáňez-Sedeno P，Reviejo A J，Pingarrón J M.Anal.Bioanal.Chem.，2003,376：18-25.

[11] Shi X，Wu A，Zhang S，Li R，Zhang D.J.Chromatogr.B，2007,850：24-30.

[12] Shi X Z，Song S Q，Sun A L，Liu J H，Li D X，Chen J.Analyst，2012,137：3381-3389.

[13] Passerini S，Appeteccha G B.MRSBull.，2013,38(7)：540-547.

[14] Poole C F，Lenca N.TrAC，TrendsAnal.Chem.，2015,71:144-156.

[15] Wang H F，Zhu Y Z，Yan X P，Gao R Y，Zheng J Y.Adv.Mater.,2006,18：3266-3270.

[16] Sun X L，He J，Cai G R，Lin A Q，Zheng W J，Liu X，Chen L X，He X W，Zhang Y K.J.Sep.Sci.，2010,33：3786-3793.

[17] He C Y，Long Y Y，Pan J L，Li K，Liu F.Talanta，2008,74：1126-1131.

Preparation and Application of Molecularly Imprinted Polymers for Chloramphenicol Based on Ionic Liquids Assistance

WANG Xiao-yu1*，SUN Fu-qian1，ZENG Guo-ping1，LIU Xin-xin1，YU Ji-wen1，LAI Jia-ping2*

(1.Applied Chemistry Research Institute of Jiangxi Academy of Sciences，Nanchang 360102，China；2.School of Chemistry & Environment，South China Normal University,Guangzhou 510006，China)

In this work，the molecularly imprinted polymers(MIPs) for chloramphenicol(CAP)(CAP-MIPs) were prepared by ionic liquids assistance using 2-vinylpyridine as functional monomer，ethylene glycol dimethacrylate(EGDMA) as the cross-linker and 2,2′-azobisisobutyronitrile(AIBN) as the initiator in the mixture of tetrahydrofuran and ionic liquid 1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate([BMIm]BF4) as the porogenic solvent.The effects of functional monomer，progenic solvent on the binding capacity of MIPs were optimized.The MIPs possessed a high capacity and a favorable selectivity for CAP in the preparation of MIPs using 2-vinylpyridine as functional monomer and ionic liquid([BMIm]BF4)(1∶1，by volume) as polymeric solvent.The imprinting factor of CAP-MIPs reached to 2.6.The reusability of CAP-MIPs without any deterioration in capacity was demonstrated for five adsorption-desorption cycles.The developed method was applied in the enrichment and determination of CAP in spiked egg samples using CAP-MIPs as the adsorbent,with CAP recoveries of 62.3%-81.1%.

chloramphenicol；molecularly imprinted polymers(MIPs)；ionic liquids；egg；enrichment

10.3969/j.issn.1004-4957.2017.01.003

2016-09-06；

2016-11-02

江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(201402BAB203017)

*通訊作者：王小玉，副研究員，研究方向：應(yīng)用化學(xué)，Tel：0791-88177783，E-mail:wangxy6@sina.com 賴(lài)家平，教授，研究方向：光學(xué)分析及光化學(xué)傳感器，環(huán)境分析及生物醫(yī)藥分析，Tel：020-39310257，E-mail:laijp@scnu.edu.cn

O657.7；R978.16

A

1004-4957(2017)01-0018-07