白全亮

摘 要：免疫組織化學(xué)技術(shù)是通過利用抗原抗體特異結(jié)合的原理，把相關(guān)的物質(zhì)標(biāo)記在抗體上，來表示復(fù)合物的存在和狀態(tài)。隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫組織化學(xué)技術(shù)越來越成熟，已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)的診斷過程中。免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用的范圍非常廣泛，主要包括：對病原體檢測、定位、動態(tài)分布，以及新病原體的發(fā)現(xiàn)、固定組織的研究過程中，是現(xiàn)代獸醫(yī)診斷中主要的技術(shù)手段之一，該文通過查詢大量的中外文獻(xiàn)，以及向相關(guān)人士咨詢，就免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用進(jìn)行淺要分析，希望對相關(guān)部門有一定幫助。

關(guān)鍵詞：免疫組織化學(xué)技術(shù) 獸醫(yī)診斷 應(yīng)用分析

中圖分類號：S854.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2016）09（a）-0094-02

免疫組織化學(xué)技術(shù)在國際上簡稱為IHC，是依靠組織化學(xué)發(fā)展起來的一種新型獸醫(yī)診斷技術(shù)，其主要的原理是利用抗原和抗體特異性結(jié)合的原理，把抗體當(dāng)作特異性染色的主要載體，并且把相關(guān)的物質(zhì)標(biāo)記在抗體分子中，以便在顯微鏡下對抗原抗體進(jìn)行全方位仔細(xì)的觀察，最終達(dá)到對細(xì)胞和組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進(jìn)行定性和定位檢測。免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展使得傳統(tǒng)獸醫(yī)診斷發(fā)生了很大變化，使得傳統(tǒng)病理學(xué)逐漸發(fā)展成為免疫信號和形態(tài)相結(jié)合的現(xiàn)代病理學(xué)。自從20世紀(jì)70年代末期開始，免疫組織化學(xué)技術(shù)就對獸醫(yī)診斷的發(fā)展有著不可替代的作用。這主要是由于IHC可以在石蠟切片、冰凍組織和細(xì)胞制品上檢測組織中種類廣泛的病原，以及對活體動物中病原的檢測，亦可用于對動物體內(nèi)病原的動態(tài)分布、半定量等研究。此外，IHC還可對固定組織進(jìn)行回顧性研究。免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平原位檢測抗原分子，是其他任何生物技術(shù)難以達(dá)到和代替的，它能在細(xì)胞基因和分子水平同時原位顯示基因及其表達(dá)產(chǎn)物，形成新的檢測系統(tǒng)。雖然聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechain reaction，PCR）方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于疾病的診斷，但由于不能在組織和細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行明確的定位而限制PCR在病理組織學(xué)上的應(yīng)用。該文就著重對免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用進(jìn)行簡要分析，希望對我國獸醫(yī)診斷部門有一定的借鑒。

1 免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原體的檢測

近年來，隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫組織化學(xué)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)診斷過程中，尤其是在獸類傳染病的診斷過程中發(fā)揮了不可替代的作用，免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸類傳染病診斷過程中的作用有很多方面因素的影響，其中最主要的原因是因為免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠快速準(zhǔn)確地檢測到病原體，比如：病毒、細(xì)菌的種類，還能檢測出某些不能在體外分離培養(yǎng)的病原體和病毒。我國著名免疫組織化學(xué)技術(shù)研究專家周春宇通過多年的工作經(jīng)驗和大量的實驗建立了檢測鵝細(xì)小病毒的間接酶免疫組織化學(xué)方法。這種檢測方式的發(fā)明使得鵝細(xì)小病毒對獸類組織器官和細(xì)胞的抗原定位檢測更加清晰明了[1]。除此之外，免疫組織化學(xué)技術(shù)也可以應(yīng)用于同一檢樣品病原比的檢測和識別過程中，國外研究者曾經(jīng)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了某養(yǎng)殖場公牛心肌炎的主要病原體，并取得了輝煌的成績，檢測了90頭死于心肌炎的公牛感染組織，每個標(biāo)本都使用了4種抗病原體，即：嗜血桿菌病抗病原體、牛病毒性腹瀉病毒抗病原體、牛支抗病原體、溶血性曼氏桿菌抗病原體。大約有65頭牛在心臟受損中發(fā)現(xiàn)了嗜血桿菌，而牛病毒性腹瀉病毒只有4頭，從這幾組數(shù)據(jù)中可以清楚看到嗜血桿菌才是導(dǎo)致公牛心肌炎的主要病原體。也有人通過免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測到犬瘟熱病毒、衣原體等病毒很難在體外分離，并且培養(yǎng)起來非常費(fèi)時、費(fèi)力。也有人通過免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測獸類組織切片中活著的非可培養(yǎng)狀態(tài)的副溶血性弧菌，發(fā)現(xiàn)利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠準(zhǔn)確檢測出非可培養(yǎng)狀態(tài)的副溶血性弧菌的位置，大大節(jié)省了實驗人員的精力和時間，把獸醫(yī)診斷檢測人員從繁重的工作中解放出來，所以說免疫組織化學(xué)技術(shù)不但能夠減少獸醫(yī)診斷的工作量，還能提高獸醫(yī)診斷的準(zhǔn)確性和效率[2]。

2 免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原機(jī)體的定位

免疫組織化學(xué)技術(shù)具有很多優(yōu)點，但是我國免疫組織化學(xué)技術(shù)的起步比較晚，相關(guān)技術(shù)還不夠成熟，還不能精確地測量出病原體的含量，但是免疫組織化學(xué)技術(shù)卻能使得病原檢測變得更加直觀清晰，還可對病原體進(jìn)行準(zhǔn)確定位。比如：利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠快速準(zhǔn)確地對犬類傳染性肝炎病毒定位在細(xì)胞核內(nèi)，能夠把狂犬病病毒定位到細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中，這是傳統(tǒng)的獸醫(yī)診斷所達(dá)不到的技術(shù)高度，使得原來被稱為不治之癥的狂犬病有了治愈的希望。我國著名免疫組織化學(xué)專家陳海軍曾建立了檢測石蠟組織切片中I型鴨肝炎病毒的間接免疫酶染色方法，利用免疫組織化學(xué)技術(shù)對I型鴨肝炎病毒導(dǎo)致鴨死亡的組織器官進(jìn)行深入研究和分析，檢測結(jié)果顯示，I型鴨肝炎病毒在死亡鴨的肝、心、盲腸、直腸中的免疫組織化學(xué)檢測都是陽性，這個實驗可以清楚看出I型鴨肝炎病毒主要分布在感染細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中[3]。

3 病原在機(jī)體的動態(tài)分布研究

病原在機(jī)體的動態(tài)分布研究是獸醫(yī)診斷動物傳染病的基礎(chǔ)，能夠為動物發(fā)病的機(jī)理研究提供理論依據(jù)，對養(yǎng)殖業(yè)控制動物病情有非常重要的意義。我國對病原在機(jī)體的動態(tài)分布研究起步比較晚，到目前為止，主要利用生物學(xué)技術(shù)、免疫酶組化法進(jìn)行研究。通過利用免疫組織化學(xué)技術(shù)能夠清晰明了地觀察到病原在組織細(xì)胞中的生長動態(tài)，也就能觀察到病毒從一個部位到另一個部位的擴(kuò)散過程，有助于獸醫(yī)研究疫病發(fā)病的原因和過程。同時，免疫組織化學(xué)技術(shù)還能檢測出肉眼病變不明顯的組織內(nèi)的病因發(fā)病過程和狀態(tài)[4]。

4 結(jié)語

免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用的范圍非常廣泛，除了應(yīng)用在醫(yī)院診斷過程中，還應(yīng)用在獸醫(yī)疫病疾病的研究過程中。隨著我國科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，生物分子技術(shù)和遺傳技術(shù)得到了廣泛發(fā)展，使得免疫組織化學(xué)技術(shù)越來越完善，免疫組織化學(xué)技術(shù)在獸醫(yī)診斷過程中發(fā)揮的作用和價值越來越大，該文通過查閱大量的中外文獻(xiàn)，分析免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原體的檢測，免疫組織化學(xué)技術(shù)對病原機(jī)體的定位，病原在機(jī)體的動態(tài)分布研究，希望對獸醫(yī)診斷發(fā)展有一定幫助。

參考文獻(xiàn)

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[2] 孫亞妮.免疫組織化學(xué)技術(shù)在雞三種病毒性腫瘤病鑒別診斷中的應(yīng)用[D].山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014.

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[4] 溫濤，趙建增，羅勝軍，等.化學(xué)發(fā)光免疫分析在獸醫(yī)診斷中的應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī)，2013（10）：73-75.