□ 鄧 瑜 廣西壯族自治區(qū)百色食品藥品檢驗(yàn)所

HPLC檢測中小學(xué)周圍流動(dòng)攤販?zhǔn)称分斜讲?a)芘的含量

□ 鄧 瑜 廣西壯族自治區(qū)百色食品藥品檢驗(yàn)所

本文從檢測中小學(xué)周圍流動(dòng)攤販煎炸食品中苯并(a)芘含量出發(fā)，探析中小學(xué)周圍的食品存在的問題。最后得出，流動(dòng)攤販?zhǔn)圪u的煎炸食品不合格。

中小學(xué)校；苯并(a)芘；HPLC；食品安全

苯并(a)芘又稱3，4-苯并芘，簡稱BaP，由一個(gè)苯環(huán)和一個(gè)芘分子稠合而成的多環(huán)芳烴類化合物，分子式為C20H12

[1]。苯并(a)芘的結(jié)構(gòu)圖，如圖1所示。食品中形成苯并(a)芘原因很多，多次使用高溫動(dòng)植物油、燒烤食品、煎炸過火的食品，都會(huì)產(chǎn)生苯并(a)芘，污染食品。

圖1 苯并(a)芘的結(jié)構(gòu)圖

苯并(a)芘的存在對人體健康有巨大的威脅，有強(qiáng)致癌性，在人體內(nèi)蓄積，具有長期隱匿的特性，并可誘發(fā)皮膚癌、肺癌、胃癌、膀胱癌及消化道癌等多種癌癥[1]。

中小學(xué)周圍的流動(dòng)攤販多，銷售的食品價(jià)格低，購買便捷，但衛(wèi)生狀況差，原材料來源不明，食品安全衛(wèi)生問題多，食用后容易引發(fā)群體性食源性疾患。

中小學(xué)生正處于長身體的特殊時(shí)期，生長發(fā)育不完全，臟腑嬌嫩，同時(shí)缺乏食品安全知識，辨識能力差。中小學(xué)生頻繁食用高致癌食品，會(huì)嚴(yán)重危害身體健康，并引發(fā)一系列的問題。

1 材料

1.1 儀器

LC-2030C 3D島津高效液相色譜儀，帶RF-20A熒光檢測器，自動(dòng)進(jìn)樣器，LabSolutions色譜工作站（島津公司）；XS205Du電子分析天平（梅特勒-托利多）；PL2002N電子天平（梅特勒-托利多）；BUCH Syncore，Q-101平行蒸發(fā)儀（南京市賀而頓工業(yè)設(shè)備有限公司）；FA25高速組織粉碎機(jī)（FLUKO）；OA-SYSTM，N-EVAPTM112氮吹儀（美國 Organomation Associates公司）；SK820HP數(shù)控超聲波清洗器等。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與化學(xué)試劑

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：苯并(a)芘（ Benzo(a) pyrene）標(biāo)準(zhǔn)品購于Dr.Eherstorfer GmbH，含量99.6%，批號C20635000 10226，有效期至2019年11月。

化學(xué)試劑：環(huán)己烷、二甲基亞砜、甲醇、乙腈為色譜純，F(xiàn)isher公司；無水硫酸鈉為分析純；水為超純水。

1.3 材料

樣品：隨機(jī)采集于百色城區(qū)內(nèi)各中小學(xué)周圍的流動(dòng)攤販，無菌采樣袋封裝每份樣品。每個(gè)流動(dòng)攤販采集2種樣品，每種2份，每份約100 g，2016年7月2日采集，采樣情況見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：CNW Althena PAHs HPLC C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為乙腈-水（85︰15）；流速為1.2 mL/min；檢測波長：激發(fā)波長384 nm，發(fā)射波長406 nm；柱溫為25 ℃；進(jìn)樣量為10 μL。

表1 流動(dòng)攤販?zhǔn)圪u食品采樣情況表

圖2 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與檢測樣品的HPLC圖

2.2 苯并(a)芘溶標(biāo)準(zhǔn)液制備

準(zhǔn)確稱取苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)品5.52 mg于25 mL容量瓶中，加甲醇制成濃度為219.92 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。準(zhǔn)確量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1.71 mL于25 mL容量瓶中，甲醇稀釋成濃度為15.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液A。準(zhǔn)確量取標(biāo)準(zhǔn)溶液A 0.25 mL于25 mL容量瓶中，甲醇稀釋成濃度為150.0 ng/mL的苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2.3 試樣制備

取適量代表性樣品，絞碎均勻，置于4 ℃冰箱保存[2~3]。

2.4 測定步驟

2.4.1 提取

準(zhǔn)確稱取5.00 g于50 mL離心管中，加入5.0 g無水碳酸鈉，15 mL環(huán)己烷，10 000 r/min勻漿2 min，超聲提取5 min，4 000 r/min離心2 min，收集上清液于平行蒸發(fā)儀中，殘?jiān)?0 mL環(huán)己烷重復(fù)提取2次，合并環(huán)己烷提取液，濃縮到1 mL，轉(zhuǎn)移濃縮液到至50 mL離心管中，用環(huán)己烷清洗平行蒸發(fā)儀的器皿，合并環(huán)己烷溶液，保持體積5 mL左右，分別加入5 mL二甲基亞砜萃取2次，每次渦旋混勻2 min，4000 r/min離心2 min，用吸管吸出二甲基亞砜，合并2次二甲基亞砜萃取液于50 mL離心管中，待進(jìn)化處理。

2.4.2 凈化

在二甲基亞砜萃取液中，加入15 mL 2.0 g/L硫酸鈉溶液，分別加入5 mL環(huán)己烷反萃取3次，每次渦旋混勻2 min，4 000 r/min離心2 min，吸出環(huán)己烷，合并環(huán)己烷于20 mL刻度試管中，氮?dú)獯到?，甲醇定容?.0 mL，過0.45 μm濾膜，待檢測分析。

2.5 線性關(guān)系考察

分別吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00 mL和5.00 mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，甲醇定容至5 mL，標(biāo)準(zhǔn)系列中濃度分別為0、30、60、90、120 ng/mL和150 ng/mL，進(jìn)樣10 μL，記錄色譜圖，以苯并(a)芘濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖2），得回歸方程f(x)=782 383x+805 047，R2=0.999 3，苯并芘在0～150 ng/mL呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一濃度的苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)品溶液10 μL，注入液相色譜中，重復(fù)6次，并記錄峰面積。結(jié)果RSD為0.163%，表明儀器精密度良好。

表2 樣品中的測定結(jié)果表（μg/kg）

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

稱取同一樣品各6份，按“2.4”項(xiàng)下測定步驟制備。精密吸取10 μL注入液相色譜，記錄峰面積，并計(jì)算含量。結(jié)果RSD為0.382%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

稱取已知含量的樣品9份，按方法測定低限、最高殘留限量、自選合適的濃度進(jìn)行三水平加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，按“2.4”項(xiàng)下測定步驟制備。精密吸取10 μL注入液相色譜，記錄峰面積，并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率分別為91.3%、94.6%、96.7%，RSD分別為3.5%、1.5%、1.2%，表明本方法回收率良好。

2.9 樣品測定

對所采集的20份樣品進(jìn)行苯并(a)芘測定，計(jì)算其中的含量，結(jié)果見表2。

3 討論

本文按NY/T 1666的方法檢驗(yàn)，并參考GB/T 27404附錄F要求進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。從檢驗(yàn)結(jié)果可知，中小學(xué)周圍流動(dòng)攤販銷售的煎炸食品，苯并(a)芘均已超過GB2762給定≤5.0 μg/kg的限值[4]，屬不合格食品，按《中華人民共和國食品安全法》第34條第2款規(guī)定，其必須禁止銷售。

中小學(xué)周圍流動(dòng)攤販數(shù)量多、分布面廣、流動(dòng)性大，食藥監(jiān)管部門每年都投入大量人力物力進(jìn)行專項(xiàng)整治，但仍存在諸多無法忽略的問題。主要表現(xiàn)為以下幾方面：①流動(dòng)攤販經(jīng)營者健康狀況不明確?！吨腥A人民共和國食品安全法》第45條“從事接觸直接入口食品生產(chǎn)經(jīng)營人員每年應(yīng)當(dāng)進(jìn)行健康檢查，取得健康證明后方可上崗工作。”但目前，無健康證流動(dòng)攤販數(shù)量龐大；②流動(dòng)攤販經(jīng)營環(huán)境的惡劣。流動(dòng)攤販營業(yè)場所不固定，各種食材，如生肉、熟肉存放在一起，加上室外空氣中的灰塵煙塵污染、天熱高溫食物易變質(zhì)腐爛以及蚊蠅等都是傳播疾病，引發(fā)群體性食源性疾患的高危因素；③原材料來源無法追溯，安全無保障。流動(dòng)攤販經(jīng)營者多為無業(yè)或低收入人群，他們法律意識缺失，為了快速、大量賺取利潤，采用差、假、次甚至過期食品原料，進(jìn)而導(dǎo)致食品原材料的來源難以追溯，難以查明，安全無保障。

本文從小部分流動(dòng)攤販?zhǔn)圪u的煎炸食品中發(fā)現(xiàn)了含有大量的苯并(a)芘，為了中小學(xué)生的健康成長，各監(jiān)管部門應(yīng)積極合作，加強(qiáng)監(jiān)管，務(wù)求實(shí)效，建立健全安全長效的監(jiān)管機(jī)制，嚴(yán)把中小學(xué)周圍食品的安全關(guān)。

[1]史巧巧.食品中苯并芘的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2014(5):380-381.

[2]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.NY/T 1666-2008 肉制品中苯并(a)芘的測定高效液相色譜法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

[3]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 27404-2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.GB 2762-2005食品中污染物限量[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2005.

鄧瑜（1985-），男，廣西桂林人，本科。研究方向：食品檢驗(yàn)。