□ 周 宇 遼寧省食品檢驗(yàn)檢測(cè)院 管娜巍 鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所 賈宏新 遼寧省食品檢驗(yàn)檢測(cè)院

毛細(xì)管柱氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中甲醇和單體物質(zhì)

□ 周 宇 遼寧省食品檢驗(yàn)檢測(cè)院 管娜巍 鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所 賈宏新 遼寧省食品檢驗(yàn)檢測(cè)院

建立毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中甲醇和乙酸乙酯等各種主要單體物質(zhì)。色譜柱為Aglient DBWAX（30 m×0.250 mm×0.25 μm），檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），采用程序升溫方式，甲醇和幾種單體物質(zhì)得到了很好的分離，回收率、檢出限均滿足日常檢測(cè)。此方法適用于目前各種香型白酒的分析。

毛細(xì)管氣相色譜；甲醇；單體物質(zhì)

白酒是中國(guó)傳統(tǒng)的蒸餾酒，因自然環(huán)境、釀造原料、糖化發(fā)酵劑種類(lèi)和生產(chǎn)工藝等因素的不同，形成了各具特色、風(fēng)格典型的各種香型的白酒，比如濃香型白酒、清香型白酒、米香型白酒、豉香型白酒等[1]。白酒的風(fēng)格特征與其微量成分有密切的關(guān)系。不同香型白酒需對(duì)其特征單體物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)、評(píng)價(jià)，例如濃香型白酒的己酸乙酯、清香型白酒的乙酸乙酯、米香型白酒的乳酸乙酯和β-苯乙醇等。甲醇作為發(fā)酵過(guò)程中的微量副產(chǎn)物，也是白酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中必檢的項(xiàng)目。因此，迫切需要一種有效、快速的檢測(cè)方法[2]。目前，GB/T5009.48-2003標(biāo)準(zhǔn)中甲醇的分析仍然使用填充柱氣相色譜法，柱效低，無(wú)法同時(shí)檢測(cè)白酒中多種單體物質(zhì)[3]。本實(shí)驗(yàn)使用毛細(xì)管柱氣相色譜法同時(shí)檢測(cè)白酒中甲醇和各種特征單體物質(zhì)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及回收率等驗(yàn)證，取得滿意的分析效果[4,5]。本法具有分析速度快、效率高的特點(diǎn)，為白酒的檢測(cè)、評(píng)價(jià)提供了技術(shù)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

儀器：Scion 456-GC型氣象色譜儀（上海天美公司）、附氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）、毛細(xì)管色譜柱，Aglient DB-WAX（30 m×0.250 mm×0.25 μm）。

試劑：乙醇（色譜純）。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：甲醇、乙酸乙酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和β-苯乙醇，均為色譜純。內(nèi)標(biāo)物：乙酸正戊酯（色譜純）。

1.2 測(cè)定方法

色譜條件：柱溫40 ℃保持10 min，20 ℃/min升溫至230 ℃并保持5 min；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；分流比：50︰1；檢測(cè)器溫度250 ℃；柱流量：1.0 mL/min；氫氣：30.0 mL/min；空氣：300.0 mL/min；尾吹氣：30.0 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：精密量取色譜純甲醇、乙酸乙酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯和β-苯乙醇各1.00克，用50%乙醇（色譜純）稀釋至50.0 mL，各物質(zhì)濃度均為20.0 g/L，此溶液為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。根據(jù)需要可將標(biāo)準(zhǔn)貯備液稀釋至各濃度標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)液。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)白酒中各物質(zhì)限量要求，分別吸取標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.50、1.00、2.00、5.00 mL和10.00 mL用50%乙醇（色譜純）稀釋至50.0 mL，濃度分別為 0.2、0.4、0.8、2.0 g/L 和 4.0 g/L。各上機(jī)液均加入1.00 mL乙酸正戊酯（色譜純）作為內(nèi)標(biāo)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件優(yōu)化

本實(shí)驗(yàn)研究了柱溫等因素對(duì)分離的影響。柱溫對(duì)分離的影響最大，初始柱溫由100 ℃逐漸降到40 ℃，每10℃為一個(gè)梯度，發(fā)現(xiàn)直到初始柱溫為100 ℃時(shí)，乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酸乙酯4個(gè)組分的峰未分開(kāi)，逐漸降低初始溫度，分離度逐漸變好。當(dāng)初始溫度降到40 ℃時(shí)，七種物質(zhì)和內(nèi)標(biāo)物均實(shí)現(xiàn)基線分離，見(jiàn)圖1。初始溫度可以使用小于40 ℃的溫度，但是分析速度較慢，且容易受環(huán)境溫度的影響。因此，將溫度條件設(shè)置為40 ℃保持10 min，20 ℃/min升溫至230 ℃并保持5 min。β-苯乙醇的沸點(diǎn)為219 ℃，且白酒中揮發(fā)性物質(zhì)較多，建議將進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度設(shè)置為250 ℃。柱流量對(duì)分離影響不顯著，設(shè)定柱流量為1.0 mL/min。

2.2 回歸方程、線性范圍和檢出限

圖1 8種混合物質(zhì)的色譜圖

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

表2 樣品分析結(jié)果

表3 三水平回收測(cè)定結(jié)果

按照上述配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、檢出限，結(jié)果見(jiàn)表1。從表1數(shù)據(jù)可以看出，各物質(zhì)曲線相關(guān)系數(shù)均在0.999以上，由于各種酒類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)單體物質(zhì)的要求均在0～4.0 g/L，因此本實(shí)驗(yàn)的線性范圍滿足日常白酒的檢測(cè)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)驗(yàn)證

對(duì)GBW（E）100012-100013白酒色譜分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行了測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)表2。測(cè)量結(jié)果均在證書(shū)標(biāo)示值范圍內(nèi)。

2.4 回收率實(shí)驗(yàn)

向樣品中加入三水平的標(biāo)準(zhǔn)品，分別進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3?；厥章示?0%～110%，表明本法回收率滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)使用毛細(xì)管柱測(cè)定白酒中的多種成分，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方法靈敏度高、準(zhǔn)確度好、分析時(shí)間較短，適用于各種香型白酒單體物質(zhì)及有害物質(zhì)的分析，為各種白酒的分析及調(diào)配提供了檢測(cè)依據(jù)。

[1]李燕,張燕,張書(shū)文.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中的特征香氣成分[J].化學(xué)分析計(jì)量,2008(6):59-61.

[2]王先桂,曾丹,郭坤亮.傳統(tǒng)十種白酒香型骨架成分的親緣性分析[J].中國(guó)釀造,2013(9):82-87.

[3]蔡嶸 ,朱杰 ,彭謙 ,等 .毛細(xì)管柱氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中12種有機(jī)物質(zhì)[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜質(zhì),2007(3):392-393.

[4]張倩,郝金竹.白酒色譜分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在毛細(xì)管柱氣相色譜法中的應(yīng)用[J].釀酒科技,2011(9):32-34.

[5]陳發(fā)河,吳光斌.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定白酒中的甲醇、乙酸乙酯和雜醇油[J].食品科學(xué),2007(1):232-233.

遼寧省科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究基金項(xiàng)目（編號(hào)：GY2014-D-028）。

周宇（1980—），男，遼寧沈陽(yáng)人，本科，高級(jí)工程師。研究方向：食品檢驗(yàn)（光譜、色譜分析）。